Другие статьи

Цель нашей работы - изучение аминокислотного и минерального состава травы чертополоха поникшего
2010

Слово «этика» произошло от греческого «ethos», что в переводе означает обычай, нрав. Нравы и обычаи наших предков и составляли их нравственность, общепринятые нормы поведения.
2010

Артериальная гипертензия (АГ) является важнейшей медико-социальной проблемой. У 30% взрослого населения развитых стран мира определяется повышенный уровень артериального давления (АД) и у 12-15 % - наблюдается стойкая артериальная гипертензия
2010

Целью нашего исследования явилось определение эффективности применения препарата «Гинолакт» для лечения ВД у беременных.
2010

Целью нашего исследования явилось изучение эффективности и безопасности препарата лазолван 30мг у амбулаторных больных с ХОБЛ.
2010

Деформирующий остеоартроз (ДОА) в настоящее время является наиболее распространенным дегенеративно-дистрофическим заболеванием суставов, которым страдают не менее 20% населения земного шара.
2010

Целью работы явилась оценка анальгетической эффективности препарата Кетанов (кеторолак трометамин), у хирургических больных в послеоперационном периоде и возможности уменьшения использования наркотических анальгетиков.
2010

Для более объективного подтверждения мембранно-стабилизирующего влияния карбамезапина и ламиктала нами оценивались перекисная и механическая стойкости эритроцитов у больных эпилепсией
2010

Нами было проведено клинико-нейропсихологическое обследование 250 больных с ХИСФ (работающих в фосфорном производстве Каратау-Жамбылской биогеохимической провинции)
2010


C использованием разработанных алгоритмов и моделей был произведен анализ ситуации в системе здравоохранения биогеохимической провинции. Рассчитаны интегрированные показатели здоровья
2010

Специфические особенности Каратау-Жамбылской биогеохимической провинции связаны с производством фосфорных минеральных удобрений.
2010

Доклиническое изучение безопасности противогриппозного лекарственного препарата на основе эфирного масла котовника украинского

Показателями безопасности являются хорошая переносимость противогриппозного лекарственного препарата, а так же оставшиеся в пределах нормы морфологические показатели периферической крови и биохимические показатели сывороток у подопытных лабораторных животных.

Введение

В последние годы вирус гриппа, в особенности, вирус гриппа типа А приковывает к себе большой интерес со стороны мировой общественности. Это связано, прежде всего, с периодическими вспышками данной инфекции в различных частях планеты. Возбудителем очагов инфекции является вирус гриппа типа А, отличающийся от других типов, способностью поражать не только животных и птиц, а также и людей.

Возбудители гриппа типа А являются возбудителями гриппозных пандемий в ХХ столетии. Наиболее разрушительной из них оказалась пандемия «испанки» А/(H1N1), которая разразилась в 1918-1919 гг. унесла, по разным подсчетам, от 20 до 100 млн. жизней.

На сегодняшний день имеются различные способы борьбы с вирусными инфекциями, в том числе и с гриппом, такие как вакцинация и лечение лекарственными средствами.

В последнее время изготовление противовирусных препаратов постепенно переходит от синтеза химических соединений к использованию фармакологически активных веществ растений, что обусловлено меньшей их токсичностью, а также большим разнообразием химической структуры. Среди фармакологически активных растительных соединений интерес к флавоноидам, кумаринам, эфирным маслам и др. начинает усиливаться во всём мире.

Изучение растений широко применяемых в народной и традиционной медицине, а так же разработка на их основе высокоэффективных лекарственных средств является одной из актуальных задач медицинской и фармацевтической науки [1, 2]. Лекарственные препараты растительного происхождения обладают преимуществом перед синтетическими, которое заключается в малой токсичности, большей частью мягкостью действия, редким индуцированием аллергических реакций и возможностью проведения повторных и длительных курсов лечения и профилактики.

Основным источником для поиска новых лекарственных растений является арсенал средств народной медицины. С этой точки зрения особый интерес представляют растения семейства Lamiaceae, широко используемые в нетрадиционной медицине. Лечебным эффектом обладает эфирное масло, содержащееся в растениях данного семейства [2, 3], а именно эфирное масло Котовника украинского, на основе которого и был получен исследуемый противогриппозный лекарственный препарат.

Раннее были проведены работы по изучению безопасности, защитного действия и лечебно-профилактической эффективности, где и было установлено, что противогриппозный лекарственный препарат, в концентрации 40 мг/кг эфирного масла в дозе 25 мкл для мышей и 100 мкл для морских свинок безопасен, обладает как профилактическим   так   и   лечебными   свойствами   против   штамма   A/     California /7/2009/(H1N1) pdm09 вируса гриппа на 60-80 % [4].

Для дальнейшего изучения безопасности, были проведены доклинические испытания исследуемого лекарственного препарата на лабораторных животных, а именно изучение острой токсичности, что является одним из основных и обязательных этапов при разработке и внедрении в медицинскую практику иммунобиологических препаратов [5, 6].

Материалы и методы

В    работе    использовали    3    экспериментальные    серий    противогриппозного лекарственного препарата против гриппа A/H1N1. Исследуемый препарат приготовлен из эфирного масла, выделенного из растения Котовника украинского (Nepeta ucranica) произрастающего на территории Республики Казахстан, который представляет собой жидкую форму в виде капель и по предназначению вводится в организм интраназально. Испытание проводилось     на  двух  видах  лабораторных  животных  обоего пола: белых мышах и морских свинках с живой массой 25-30 г. и 350-400 г.,  соответственно.

В исследованиях использованы клинически здоровые животные, содержащиеся в соответствии с действующими правилами [7].

Лабораторные животные распределялись по группам случайным образом методом рандомизации на 2 группы (опытная и контрольная). В качестве критериев приемлемости рандомизации считали отсутствие внешних признаков заболеваний и гомогенность групп по весу тела (± 20%). Для испытания 3 экспериментальных серий препарата, каждая группа состояла из 8 особей в опыте на мышах и 6 особей в опыте на морских свинках, включая контрольные группы. Каждому животному был присвоен индивидуальный номер (в соответствии с номером группы и порядковым номером).

Испытание острой токсичности противогриппозного лекарственного препарата на системы и органы лабораторных животных определяли введением опытным группам 0,1 мл то есть 4 дозы для мышей (1 стандартная доза в объеме 25 мкл, вводилась 4 раза в течение 4 часов с интервалом между введением – 1 час) и 0,2 мл лекарственного препарата морским свинкам, то есть 4 дозы (по 50 мкл), интраназально в концентрации 40 мг/кг эфирного масла. Для контрольных групп в качестве негативного контроля использовали раствор натрия хлорида.

Токсическое действие противогриппозного препарата оценивали по клиническим признакам интоксикации, показателям общего состояния, изменения поведения, наличия судорог, оценки координации движения, интенсивности и характера двигательной активности, ежедневной регистрации массы тела, потребление воды и пищи.

Для определения влияния препарата на организм, изучали гематологические, морфологические и биохимические показатели крови животных [8, 9, 10, 11], кровь у мышей получали пункцией хвостовой вены, а у морских свинок из сердца.

Статистическую обработку экспериментальных данных, определяли согласно среднему значению выборки и ее среднеквадратичной ошибки. Достоверность различий между показателями (р<0,05) определяли с применением критерия Стьюдента.

Результаты и обсуждение

На протяжении всего периода клинического наблюдения общее состояние и поведение животных всех экспериментальных групп соответствовало обычному характеру живот- ных, общее состояние опытных и контрольных групп (потребление воды, корма и внешний вид) было удовлетворительным, признаков болезни и случаев гибели не отмечено, при этом достоверные отличия между опытной и контрольной группой отсутствовали.

Интенсивность и характер двигательной активности, координация движений, тонус скелетных мышц сохранялись на фоновом уровне. Поведенческие реакции не отклонялись от нормы опытных групп от группы контроля, состояние волосяного и кожного покрова, окраска слизистых были без патологических изменений.

В таблице 1 и 2 приведены результаты динамики массы тел через 24 ч, 7 и 14 сут после введения противогриппозного препарата опытным группами и контрольным.

Таблица – 1 Среднее значение изменения массы тела белых мышей (самок и самцов) при определении острой токсичности противогриппозного препарата

     Среднее значение изменения массы тела белых мышей (самок и самцов) при определении острой токсичности противогриппозного препарата

Таблица – 2 Среднее значение изменения массы тела морских свинок (самок и самцов) при определении острой токсичности противогриппозного препарата

Среднее значение изменения массы тела морских свинок (самок и самцов) при определении острой токсичности противогриппозного препарата

Представленные в таблицах 1 и 2 данные показывают, что массы тела белых мышей и морских свинок в трех группах не имели значительных различий (р<0,05).

В нормальных физиологических условиях неизменно  поддерживается постоянство морфологического и химического состава, а также и физико - химических свойств крови. Изменения состава крови, которые во многих случаях являются вторичными, обусловленными нарушениями физиологической деятельности различных систем или органов при воздействии различных лекарственных и иммунобиологических препаратов, могут отразиться на  нормальном функционировании организма. Учитывая, что кровь в той или иной степени отражает, как в зеркале, многое из того, что происходит в организме. Для изучения безопасности экспериментальных серий противогриппозного препарата использовали лабораторно - инструментальные методы по показателям общего анализа крови (гемоглобин, гематокрит, эритроциты, нейтрофилы, базофилы, эозинофилы, лимфоциты, моноциты). Результаты гематологических исследований периферической крови при изучении острой токсичности противогриппозного лекарственного препарата представлены в таблицах 3 и 4. 

Таблица – 3 Влияние противовирусного препарата на морфологический состав периферической крови белых мышей

 Влияние противовирусного препарата на морфологический состав периферической крови белых мышей

Таблица – 4 Влияние противовирусного препарата на морфологический состав периферической крови морских свинок

 Влияние противовирусного препарата на морфологический состав периферической крови морских свинок

Данные представленные в таблицах 3 и 4 свидетельствуют об отсутствии достоверных различий между уровнями гемоглобина, эритроцита, гематокрита и лейкоцитарной формуле в контрольных и опытных группах лабораторных мышей после введения экспериментальных серии противогриппозного препарата (р<0,05). Отсутствовали также достоверные различия между самками и самцами.

При изучении морфологического состава крови лабораторных мышей и морских свинок, после введения дозы препарата отмечено незначительное снижение гемоглобина и тромбоцитов по сравнению с контрольной группой.

Результаты, представленные в таблицах 3 и 4 , свидетельствуют, что обнаружено незначительное снижение эозинофилов, которое свидетельствует в пользу отсутствия аллергизирующего действия данного препарата на лабораторных мышей.

Таким образом, применение противогриппозного препарата у мышей и морских свинок не вызвало достоверных изменений в морфологическом  составе периферической крови, уровне гемоглобина и гематокрита по сравнению  с контрольной группой. Выявленные изменения могут быть интерпретированы с точки зрения активизации иммунного ответа.

Результаты биохимических исследований крови при изучении  острой токсичности препарата.

Для адекватной оценки изменения физиологического состояния макроорганизма на фоне воздействия противогриппозного лекарственного препарата провели определение в сыворотке крови лабораторных мышей и морских свинок комплекса наиболее информативных показателей активности ключевых ферментов метаболизма, а также показателей белкового, углеводного и липидного обмена – общего белка, мочевины, креатинина, холестерина, глюкозы, билирубина общего и связанного, активности аспартамаминотрансферазы (АСТ) и аланинаминотрансферазы (АЛТ) (таблицы 5 и 6). 

Таблица 5 – Влияние лекарственного препарата на основные биохимические показатели периферической крови белых мышей

Влияние лекарственного препарата на основные биохимические показатели периферической крови белых мышей 

Таблица 6 – Влияние лекарственного препарата на основные биохимические показатели периферической крови морских свинок

  Влияние лекарственного препарата на основные биохимические показатели периферической крови морских свинок

Биохимическое исследование крови подопытных животных не показывало увеличение содержания общего белка, как у мышей так и у морских свинок независимо от введенных дозы противовирусного препарата. При этом тенденция к гиперпротеинемии имела устойчивый характер, т.к. наблюдалась при  исследовании всех трех серий лекарственного препарата. Следует также отметить, что наиболее выраженные изменения наблюдались у самок. Анализ литературных данных [12] свидетельствует, что полученные данные могут быть результатами профилактического процесса.

 

Соответственно, практически не повышался уровень мочевины и креатинина. Уровни глюкозы, холестерина, общего и связанного билирубина, трансаминаз у животных опытной группы не отличались от результатов контрольной группы (р<0,05). Таким образом, введение противогриппозного лекарственного препарата не вызывает   существенных   изменений   основных   биохимических   показателей  крови лабораторных мышей и морских свинок.

В результате наблюдения за общим состоянием и поведением животных всех экспериментальных установлено отсутствие отклонений от нормы, это является доказательством хорошей переносимости препарата на лабораторных животных.

Отсутствие снижения веса в течение наблюдения всего опыта свидетельствует об отсутствии специфического воздействия исследованного препарата на аппетит и потребление воды. Прирост массы тела как в контрольной, так и в опытных группах животных показывает отсутствие различий в усвояемости пищи.

Выводы

В ходе проведенных исследований токсикометрии, данные наблюдений за экспериментальными животными на протяжении 7 и 14 дней после острого введения противогриппозного лекарственного препарата в превышающей дозе в 4 раза, не влияет на внешний вид, общее состояние, массу тела и поведение животных, а так же не оказывает негативного влияния на биохимические параметры крови и основные физиологические функции организма. Полученные нами результаты позволяют отнести противогриппозный лекарственный препарат к V классу – практически нетоксичных лекарственных веществ. Состояние животных после острого введения препарата свидетельствует о хорошей переносимости и безвредности   препарата.

 

Литература 

  1. Горяев М.И. Эфирные масла флоры СССР. Алма-Ата: Изд. АН Каз ССР, 380 с.
  2. Буйко Р.А. Гращенков А.Е., Маковкина А.О., Соколов В.С. Библиография по эфирномасличным растениям и эфирным маслам (указатели отечественной литературы за 1747 – 1965 гг.). Л.: Наука, 1968. 275 с.
  3. Смолянова А.М. Эфирномасличные культуры / М.: Колос, 1976. 331 с.
  4. Отчет о научно-исследовательской работе «Разработка противовирусных препаратов как средств неспецифической защиты от потенциально пандемических вирусов гриппа A/Н1N1» НТП «Мониторинг, изучение, разработка средств диагностики, профилактики и терапии гриппа «инфлюэнца A/H1N1» исполн.: Касенов М.М., Гвардейский, 2011 Инв №0211РК01630, № госрегистрации 0111РК00433
  5. «Правила доклинической оценки безопасности фармакологических средств (GLP)», (РД 64-126-91. М., 1992);
  6. Кукес В.Г., Булаев В.М., Колхир В.К., и др. Методические указания по доклиническому изучению новых препаратов, разрабатываемых из природного сырья. В сб. Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармацевтических веществ М., Минздрав РФ – С. 346-348.
  7. Каркищенко Н.Н., Руководство по лабораторным животным и альтернативным моделям в биомедицинских технологиях М., 2010. – С. 123-151.
  8. Сидорова К.А., Калашникова М.В., Пашаян С.А. Клиническая гематология животных (учебное пособие) // Международный журнал прикладных и фундаментальных исследований. – 2014. – № 3 – С. 131-131.
  9. Любина А.Я., Ильичева Л.П., Катасонова С.А., Петросова С.А., Клинические лабораторные исследования «Медицина» 1984. – С. 63-69.
  10. Карпищенко А.И. Медицинские лабораторные технологии (справочник в 2-х томах) /Под ред. А.И. Карпищенко. − СПб.:Интер-медика, 1999. − Т. 2. 350 с.51
  11. МсCleskey E. Fluorometric method for the determination of urea in blood / J. E. McCleskey // Anal. Chem. — 1964. — Vol. 36. — P. 1646-1648.
  12. Козинца Г.И. Атлас клеток крови и костного мозга «Триада - Х»

Разделы знаний

Архитектура

Научные статьи по Архитектуре

Биология

Научные статьи по биологии 

Военное дело

Научные статьи по военному делу

Востоковедение

Научные статьи по востоковедению

География

Научные статьи по географии

Журналистика

Научные статьи по журналистике

Инженерное дело

Научные статьи по инженерному делу

Информатика

Научные статьи по информатике

История

Научные статьи по истории, историографии, источниковедению, международным отношениям и пр.

Культурология

Научные статьи по культурологии

Литература

Литература. Литературоведение. Анализ произведений русской, казахской и зарубежной литературы. В данном разделе вы можете найти анализ рассказов Мухтара Ауэзова, описание творческой деятельности Уильяма Шекспира, анализ взглядов исследователей детского фольклора.  

Математика

Научные статьи о математике

Медицина

Научные статьи о медицине Казахстана

Международные отношения

Научные статьи посвященные международным отношениям

Педагогика

Научные статьи по педагогике, воспитанию, образованию

Политика

Научные статьи посвященные политике

Политология

Научные статьи по дисциплине Политология опубликованные в Казахстанских научных журналах

Психология

В разделе "Психология" вы найдете публикации, статьи и доклады по научной и практической психологии, опубликованные в научных журналах и сборниках статей Казахстана. В своих работах авторы делают обзоры теорий различных психологических направлений и школ, описывают результаты исследований, приводят примеры методик и техник диагностики, а также дают свои рекомендации в различных вопросах психологии человека. Этот раздел подойдет для тех, кто интересуется последними исследованиями в области научной психологии. Здесь вы найдете материалы по психологии личности, психологии разивития, социальной и возрастной психологии и другим отраслям психологии.  

Религиоведение

Научные статьи по дисциплине Религиоведение опубликованные в Казахстанских научных журналах

Сельское хозяйство

Научные статьи по дисциплине Сельское хозяйство опубликованные в Казахстанских научных журналах

Социология

Научные статьи по дисциплине Социология опубликованные в Казахстанских научных журналах

Технические науки

Научные статьи по техническим наукам опубликованные в Казахстанских научных журналах

Физика

Научные статьи по дисциплине Физика опубликованные в Казахстанских научных журналах

Физическая культура

Научные статьи по дисциплине Физическая культура опубликованные в Казахстанских научных журналах

Филология

Научные статьи по дисциплине Филология опубликованные в Казахстанских научных журналах

Философия

Научные статьи по дисциплине Философия опубликованные в Казахстанских научных журналах

Химия

Научные статьи по дисциплине Химия опубликованные в Казахстанских научных журналах

Экология

Данный раздел посвящен экологии человека. Здесь вы найдете статьи и доклады об экологических проблемах в Казахстане, охране природы и защите окружающей среды, опубликованные в научных журналах и сборниках статей Казахстана. Авторы рассматривают такие вопросы экологии, как последствия испытаний на Чернобыльском и Семипалатинском полигонах, "зеленая экономика", экологическая безопасность продуктов питания, питьевая вода и природные ресурсы Казахстана. Раздел будет полезен тем, кто интересуется современным состоянием экологии Казахстана, а также последними разработками ученых в данном направлении науки.  

Экономика

Научные статьи по экономике, менеджменту, маркетингу, бухгалтерскому учету, аудиту, оценке недвижимости и пр.

Этнология

Научные статьи по Этнологии опубликованные в Казахстане

Юриспруденция

Раздел посвящен государству и праву, юридической науке, современным проблемам международного права, обзору действующих законов Республики Казахстан Здесь опубликованы статьи из научных журналов и сборников по следующим темам: международное право, государственное право, уголовное право, гражданское право, а также основные тенденции развития национальной правовой системы.