Опыты по изучению противовоспалительной эффективности мази Гидроцель проводились на кроликах породы белый великан. Воспаление вызывали нанесением резаной раны в области бедра правой конечности.
Проведенными исследованиями установлено, что при применении мази Гидроцель изучаемые иммунологические показатели крови подвержены меньшим изменениям, а нормализация их наступает раньше чем при использовании линимента Вишневского.
Актуальность. Проблема воспаления издавна привлекает внимание ученых. Ей принадлежит ведущее место во всей истории учения о болезни; можно сказать, что она является краеугольным камнем современной медицины. Как общепатологическая реакция воспаление лежит в основе или сопутствует большинству заболеваний. Этим объясняется тот глубокий интерес, который всегда проявляли к изучению воспаления исследователи разных времен и специальности. Несмотря на многовековую давность своего существования, проблема воспаления всегда оставалась новой и весьма актуальной. Она живо интересует не только патологов, но и физиологов, клиницистов, а в последние годы особенно иммунологов [1].
Требуются углубленные исследования физиологических и иммунологических процессов жизнедеятельности организма при воспалении разного генеза. Ключевое значение в решении этих вопросов имеет проблема резистентности, актуальность которой, связана с раскрытием механизмов влияния воспаления на организм [2].
Принципиальный характер этого положения обусловлен тем, что резистентность организма характеризует устойчивость его к действию разнообразных по своей природе факторов, а ее механизмы играют ведущую роль в защите организма от микробной, бактериальной и вирусной агрессии [3,4,5,6].
Огромное значение имеет общее состояние организма, его реактивность и резистентность. При угнетении реактивности организма воспаление течет по типу гипергического или даже анергического, когда внедрившиеся в ткани микробы получают условия для быстрого размножения, повышения вирулентности и генерализации (ишемия, сепсис) заканчивающейся часто гибелью организма [7].
В современных условиях изучение влияния воспаления на резистентность организма и повышение ее к воздействию различных неблагоприятных факторов является важной проблемой.
В качестве регуляторов воспаления и стимуляторов регенеративных процессов применяли большое количество средств, многие из которых оказались малоэффективными. Поэтому вполне актуальной проблемой является поиск и разработка новых, противовоспалительных препаратов, сочетающих в себе элементы этиотропного и патогенетического воздействия.
Цель исследования. Изучить влияние мази Гидроцель на показатели неспецифической резистентности кроликов при воспалении травматического происхождения. В соответствии с целью исследований основными задачами явились: изучение динамики Т- и В-лимфоцитов в крови кроликов при воспалении, вызванной травмой, при применении линимента Вишневского и мази Гидроцель.
Материалы и методы исследования. Опыты проводились в лаборатории кафедры Клиническая ветеринарная медицина КазНАУ, лаборатории лейкоза Института экспериментальной ветеринарии Сибири и Дальнего Востока Россельхозакадемии.
Опыты проводили на кроликах породы Белый великан, подобранных по принципу аналогов. Под опытом находились 30 кроликов, разделенных на 3 группы по 10 голов в каждой. У животных всех трех групп вызывали воспаление нанесением резаной раны в области бедра. Раневой дефект моделировали рассечением кожно-мышечной ткани. Резаные раны продольной формы наносились в области бедра после подготовки операционного поля, длиной 4-5 см, глубиной – 1,5 см. Операция проводилась под общим обезболиванием с применением рометара внутримышечно в дозе 0,5-0,7 мл и 0,5%-го раствора новокаина для местной анестезии.
Животным всех трех групп вводили антибиотик широкого спектра действия кобактан в дозе из расчета 0,5 мл/5кг массы, ежедневно в течение 5 дней. Кроликам второй группы после взятия крови, введения антибиотика и остановки кровотечения, на рану наносили линимент Вишневского, а кроликам третьей группы после взятия крови, введения кобактана и остановки кровотечения на рану наносили мазь Гидроцель. Животные первой группы служили контролем.
Мазь «Гидроцель» для заживления ран, содержащая в качестве активного компонента перекись водорода, в качестве наполнителей метилцеллюлозу, ланолин и вазелин при следующем соотношении компонентов, мас.%: перекись водорода 30,0 - 40.0 метилцеллюлоза 10,0 - 20,0 ланолин 20,0 - 30,0 вазелин 20,0 - 30,0.
Подано заявление о выдаче инновационного патента, которое зарегистрировано НИИС Комитета по правам интеллектуальной собственность от 6.04.2012 г. № 06189.
Мазь готовят в асептических условиях. В стерильную подставку наливают 400 г перекиси водорода, куда добавляют 100 г метилцеллюлозы, и оставляют для набухания на 30 минут. Далее смесь перемешивают до образования однородной массы, затем смешивают с 200 г расплавленного вазелина и 300 г ланолина, гомогенизируют до образования однородной массы. Полученную мазь разливают в стерильные тубы или банки с навинчиваемыми крышками.
Полученную мазь светло желтого цвета наносили наружно. Объем наносимой мази зависел от площади раны, с условием равномерного покрытия раны.
Забор крови проводили в утренние часы перед кормлением до нанесения, через 1, 3, 5, 7, 14 и 21 день после нанесения раны кровь набирали в пробирки Флоринского с трилоном Б.
В крови определяли количество лейкоцитов, лимфоцитов Т- и В-лимфоцитов. Количество лейкоцитов подсчитывали в камере Горяева, количество лимфоцитов путем выведения лейкоцитарного профиля по общепринятой методике. Количество Т- и В- лимфоцитов определяли методом розеткообразования. Метод основан на способности поверхностных рецепторов лимфоцитов связывать в определенных условиях in vitro различные эритроциты быка, конъюгированные с комплементом – ЕАС - розетки.
Полученный цифровой материал обработан методом вариационной статистики по методу Садовского.
Результаты исследований. Результаты проведенных исследований приведены в таблице 1. Данные таблицы 1 показывают, что применение мази в комплексе с другими препаратами оказывает положительное противовоспалительное действие.
Так, под влиянием линимента Вишневского по сравнению с контролем отмечен умеренный лейкоцитоз. Через 1 сутки после нанесения раны увеличилось количество лейкоцитов в контрольной группе на 37,8%, а в опытной группе на 31,2%. Максимальное значение количества лейкоцитов отмечена на 3 сутки развития воспаления и составила по контрольной группе 50,0%, по опытной группе 37,7%. В последующие дни исследования уровень лейкоцитов снижается. К 14 дню развития воспаления количество лейкоцитов у опытных кроликов достигает исходного уровня.
На фоне повышения количества лейкоцитов количество лимфоцитов в первую половину воспалительной реакции снижается. Так, количество лимфоцитов у животных контрольной группы на 3 сутки после нанесения раны понизилось на 4,0%, а у животных опытной находился в пределах исходных данных. В количественном отношении, наоборот, по сравнению с исходным показателем произошло увеличение на 3 сутки у животных контрольной группы на 27,3%, а опытной на 34,1%. Начиная с 5-х суток исследования уровень лимфоцитов снижается и у опытных кроликов на 14 сутки достигает исходных значений.
Количество Т-лимфоцитов (Е-РОК) как в процентном, так и в количественном отношении снижается. На 3 сутки у животных контрольный группы снижение составило 5,7%, у животных опытной группы 1,0%. Затем уровень их повышается и достигает исходного показателя по контрольной группе на 21 сутки, а по опытной на 14 сутки.
Таблица 1 -Влияние мази Гидроцель на иммунологические показатели крови кроликов при воспалении, вызванной травмой (n=20, М±n).
Уровень В-лимфоцитов в процентном выражении у животных при воспалении с первых суток развития снижается с максимальным проявлением на 3 сутки. У кроликов контрольной группы снизилось на 22,1%, а у опытных на 18,6%.
Использование мази Гидроцель показало, что она оказывает более благоприятное влияние на течение воспалительного процесса. Это подтверждается меньшими изменениями в показателях содержания лимфоцитов в крови подопытных животных. Так, по сравнению с исходными данными контрольной группы у опытных животных на 3 сутки снизились показатели лейкоцитов на 19,0% лимфоцитов на 1,5%, Т-лимфоцитов на 19,3, В-лимфоцитов на 13,6%. Повысился уровень Т- и В-лимфоцитов на 3 сутки Т- лимфоцитов на 1,0%, В-лимфоцитов на 8,0%.
В последующие сроки исследования уровни изучаемых показателей постепенно снижаются и достигают исходных данных. У животных, которым применяли мазь Гидроцель нормализация происходит уже к 14 суткам после нанесения раны.
Сравнительный анализ влияния мази Гидроцель и линимента Вишневского показал, что уровни иммунологических показателей были неодинаковыми. При применении мази Гидроцель изменения со стороны иммунологических показателей выражены в меньшей степени, это является свидетельством эффективности данной мази.
Выводы.
- Проведенными исследованиями установлено, что мазь Гидроцель обладает выраженным противовоспалительным действием.
- При применении мази Гидроцель изучаемые иммунологические показатели крови подвержены меньшими изменениями, чем при использовании линимента Вишневского. Нормализация изучаемых показателей наступает на 14 сутки, а при применении линимента Вишневского на 21 сутки.
Литература
- Альперн Д.Е. Воспаление. М.: Медгиз. С 5.
- Иванов В.А., В кн. Русакова В.И. Регуляция воспаления и регенерация в хирургии. Ташкент, 1971. С
- Яковлев Г.М., Новиков В.С., Хавинсон В.Х. Резистентность стресс регуляция. Ленинград.: Наука
- Сиротинин Н.Н. Эволюция резистентности и реактивности организма. М.: Медицина, 1981. – 236 с.
- Зильбер Л.А. Основы иммунологии. Пер.с анг. М.1969 – 648 с.
- Бойд У. Основы иммунологии. Пер.с анг. М. 1969 – 648 с.
- Русаков В.И. Регуляция воспаления и регенерации в хирургии. Ташкент, 1971.С65.