Исследование растворимости труднорастворимых лекарственных веществ, при создании мягких лекарственных форм является ключевым этапом разработки, обеспечивая необходимые биофармацевтические свойства. В статье приведены результаты исследования растворимости глюкокортикостероида метилпреднизолона ацепоната (МПА) в смешанном водно-пропиленгликолевом растворе в зависимости от температуры. Проведена валидация разработанной аналитической методики. Обосновано введение пропиленгликолевого раствора МПА в эмульсионную основу крема при температуре 65оС с целью предотвращения его кристаллизации.
Ведение. Одним из важнейших вопросов разработки нового лекарственного средства является обеспечение высоких показателей биодоступности, которые зависят как от рационально выбранного носителя лекарственного вещества, так и от характера его распределения в лекарственной форме. Введение действующего вещества в состав мягких лекарственных форм может осуществляться как по типу суспензии, так и в виде раствора. Известно, что мягкие лекарственные средства, содержащие лекарственные субстанции в растворенном состоянии, имеют более высокий терапевтический эффект. При разработке лекарственных средств местного применения с содержанием трудно растворимых или нерастворимых в воде лекарственных веществ широко используются гидрофильные неводные растворители или их смеси с водой. К гидрофильным неводным растворителям относятся спирт этиловый, пропиленгликоль, глицерин, диметилсульфоксид и др. Многие из них, благодаря своим свойствам, выполняют смягчающее, увлажняющее действие, функцию пенетраторов, солюбилизаторов или структурообразующих вспомогательных веществ. Как правило, значительное количество лекарственных веществ являются гидрофобными органическими соединениями, что вызывает трудности при создании лекарственных препаратов. Так, МПА относится к группе глюкокортикостероидов и является гидрофобным веществом, однако он легко растворим при нагревании в пропиленгликоле. При смешивании пропиленгиколевого раствора МПА с водой, которая является дисперсной средой в составе разработанного нами крема, МПА выпадает в осадок, поэтому целесообразно исследовать предельную растворимость и динамику растворения МПА в смешанном водно-пропиленгиколевом растворе [1, 2].
Цель исследования. Исследование предельной растворимости МПА в смешанном водно- пропиленгликолевом растворе различной концентрации и влияние температуры на растворимость МПА.
Материалы и методы. Объектом исследований стали пресыщенные 20¿-ные водно-пропиленгликолевые растворы МПА. Концентрация раствора варьировалась от 0¿ до 100 ¿ с шагом в 10¿. Приготовленные растворы МПА термостатировали в течение суток при температуре 25оС, 35оС, 45оС, 55оС, 65оС. В полученных растворах МПА выпадал в осадок, количество которого увеличивалось с уменьшением концентрации пропиленгликоля и температуры. Полученные растворы после термостатирования фильтровали через фильтр «желтая лента». Концентрацию МПА в фильтрате определяли спектральным методом, оптическую плотность измеряли в УФ области при длине волны 244 нм на Расчет
А - оптическая плотность при длине волны 244 нм;
r - коэффициент разведения метиловым спиртом; mн - масса фильтрата;
Еуд - удельный показатель поглощения, рассчитанный по результатам валидации (линейности) методики.
Для проведения валидации аналитической методики было приготовлено 9 модельных образцов раствора МПА в диапазоне концентрации 4 - 30 мкг/мл. Для приготовления растворов точную навеску МПА (0,02512 г) переносили в колбу на 100,00 мл и доводили объем колбы до метки метиловым спиртом. Необходимое количество полученного раствора переносили в колбу на 10,00 мл и доводили объем до метки метиловым спиртом. Полученные растворы исследовали на спектрофотометре, по результатам которых было установлено оптическую плотность (А) при длине волны 244 нм.
Результаты исследований и их обсуждение. Для подтверждения достоверности полученных результатов при
исследовании растворимости МПА в водно- пропиленгликолевом растворе была проведена валидация аналитической методики. Были рассчитаны такие валидационные характеристики, как: прогноз полной неопределенности анализа, линейность, прецизионность и правильность [3, 4].
Прогноз полной неопределенности анализа. Для подтверждения корректности аналитической методики необходим прогноз полной неопределенности результатов анализа, который не должен превышать максимально допустимую неопределенность результатов анализа max ∆аs = 3,2¿ [3, 5]. Прогнозируемую полную неопределенность рассчитывали по формуле:
Правильность аналитической методики оценивают по критерию статистической или практической незначительности погрешности. Систематическая погрешность статистически не отличается от нуля, если отклонение Zср от 100¿ не превышает свой доверительный интервал:
Как видно из рисунка 2, растворимость МПА в водно- пропиленгликолевом растворе увеличивается с увеличением концентрации пропиленгликоля и температуры. При концентрации пропиленгликоля от 10¿ до 50¿ в растворе концентрация МПА незначительна и находится в пределах от 0,0036¿ до 0,6399¿. В интервале концентраций пропиленгликоля от 50¿ до 80¿ растворимость МПА увеличивается до 4,0484¿. При увеличении концентрации пропиленгликоля более 80¿ происходит стремительное увеличение растворимости МПА. Максимальная концентрация МПА составляет 19,8292¿ в 100¿ пропиленгликоле и при 65оС.
Таким образом, введение пропиленгликолевого раствора МПА в основу крема необходимо осуществлять при температуре 65оС обеспечивая его равномерное распределение в основе с последующим постепенным охлаждением. При охлаждении сложная эмульсионная система структурируется, МПА заключается в состав масляных частичек и таким образом предотвращается его кристаллизация.
Выводы. 1. Разработана методика количественного определения МПА в смешанном водно-пропиленгликолевом растворе, которая была валидирована по таким характеристикам как: прогноз полной неопределенности анализа, линейность, прецизионность и правильность.
- Исследовано влияние температуры и концентрации водно- пропиленгликолевого раствора на растворимость МПА.
- Определено температурный режим (65оС) введения пропиленгликолевого раствора МПА в эмульсионную основу крема.
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
- И.М. Перцев Фармацевтические и биологические аспекты мазей . - Х. : НФаУ : Золотые страницы, 2003. - 288 с.
- М'які лікарські засоби для місцевого застосуванняN // Державна Фармакопея Украïни / Державне пíдприeмство «Науково- експертний фармакопейний центр» 1-е вид. - Харків: РІРЕГ, 2001. - С. 507-511. - Доповнення 2. - 2008. - С. 312-315.
- Валідація аналітичних методик і випробувань / / Державна Фармакопея Украïни / Державне пíдприeмство «Науково-експертний фармакопейний центр» 1-е вид. - Харків: РІРЕГ, 2001. - С. 58-67. - Доповнення 1 - 2004. - С. 2-4. - Доповнення 2 - 2008. - С. 85-100.
- Йоахим Эрмер, Джон Х. МакБ. Миллер. Валидация методик в фармацевтическом анализе. Примеры наилучших практик, 1-е изд.: Пер. с англ. - М.: Группа компаний ВИАЛЕК, 2013 - 512 с.
- Гризодуб А.И. Стандартные процедуры валидации методик контроля качества лекарственных средств // Фармаком. - 2006. - № 1/2. - С. 35-44.
- Гризодуб А.И., Леонтьев Д.А., Денисенко Н.В., Подпружников Ю.В. Стандартизованная процедура валидации методик количественного анализа лекарственных средств методом стандарта // Фармаком. - 2004. - № 3. - С. 3-17.
- Кухтенко Г. П. Валідація аналíтичноï методики кількісного визначення дíючоï речовини у складі крему «Стерокорт» / Г. П. Кухтенко, О. О. Ляпунова, О. С. Назарова / / Проблеми еколоriчноï та медичноï генетики і клінічноі' íмунолоriï. - 2012. - № 5(113). - С. 465-474