В работе представлено изучение острой токсичности и местноанестезирующей активности вновь синтезированных производных пиперидина под лабораторными шифрами: МАВ-161, МАВ-162, МАВ-163, МАВ-171, МАВ-173 и МАВ-175. при терминальной анестезии. Установлено, что все испытанные вещества не проявили активности при терминальной анестезии. Острая токсичность соединении, кроме МАВ-175, ниже, чем у препаратов сравнения. МАВ-175 по токсичности сопоставим с тримекаином и лидокаином.
Актуальность проблемы не вызывает сомнения, так как при огромном практическом применении местных анестетиков в медицинской практике трудности заключаются в отсутствии препаратов, соответствующим всем требованиям клиники[1].
Удельный вес местной анестезии на сегодняшнем этапе устранения и профилактики болевого синдрома является достаточно большим, так как при общем обезболивании возможны серьезные нарушения различных функции ССС, ЦНС, ЖКТ и отдельных органов.
Поэтому большой интерес представляют производные пиперидина, которые по данным многочисленных исследовании способны проявлять выраженную местноанестезирующую активность при низкой токсичности [2,3].
Цель: изучение местноанестезирующей активности при терминальной анестезии и острой токсичности вновь синтезированных производных пиперидина.
Материал и методы исследования.
Для экспериментального изучения специфической местноанестезирующей активности и острой токсичности 6 вновь синтезированных производных пиперидина под лабораторными шифрами: МАВ- 161, МАВ- 162, МАВ- 163, МАВ- 171, МАВ- 173 и МАВ- 175, были использованы методы первичного скрининга, рекомендованные
Фармакологическим комитетом РК [4].
Терминальная анестезия.
В опытах были использованы ненаркотизированные кролики-самцы массой 2,0- 2,5 кгвеса. Определялся порог чувствительности роговицы глаза кролика к тактильному воздействию. Определялось максимальное количество ритмических раздражений, наносимых на роговицу глаза с помощью капроновой нити с одним закругленным концом, со скоростью 100 в минуту, не вызывавшие роговичного рефлекса. Исходную чувствительность роговицы глаза кролика определяли дважды с интервалом в 5 минут. Раствор исследуемого вещества в объеме 0,2 мл (4 капли) инстиллировали в конъюнктивальный мешок глаза кролика в 2 раза с интервалом в 1 минуту.
Первое определение поверхностной анестезии проводили на 3 минуте и повторяли через определенные промежутки времени (всего 13 определений). Каждый раз отмечали минимальное число прикосновений одинаковой силы и ритма, вызывающее смыкание век.
Каждую концентрацию вещества проверяли 8 раз. Определялась сила анестезии - глубина анестезии, выраженная в индексах Ренье (максимальный индекс - 1300), длительность полной анестезии и общая продолжительность анестезирующего эффекта.
Активность испытуемых соединений сравнивалась с эталонным анестетиком дикаином. Полученные данные обработаны статистически. Одновременно с выявлением местноанестезирующих свойств определялось раздражающее действие исследуемых соединений на ткани глаза кролика.
Острая токсичность
Острая токсичность определялась при однократном подкожном введении соединений и эталонных препаратов мышам. В эксперимент брали белых беспородных мышей массой 17,0 - 22,0 г. Вещества дозировались в мг на кг веса животного. Животных, получавших одну и ту же дозу, составляло
Фиксировался характер внешних симптомов отравления, скорость их наступления, выраженность скорости регрессии и смертность. За животными, не погибшими в первые 24 часа, устанавливалось наблюдение до полного восстановления поведения и аппетита. Степень токсичности соединений и эталонных препаратов определяли по показателю (ЛДs0). Результаты исследований статистически обработаны по общеизвестной методике. Летальная доза (ЛДs0) рассчитывалась по методу Беренса.
РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ.
Терминальная анестезия
Анестезирующая активность большинства соединений изучалась в 1% растворах. По данной методике было поставлено 48 опытов на 5 кроликах.
Для каждого соединения и препаратов сравнения вычислены индексы Ренье, длительность полной анестезии и общая продолжительность действия.
Результаты опытов представлены в таблице 1.
Таблица 1 - Показатели вновь синтезированных производных пиперидина и препаратов сравнения при терминальной анестезии
Соединение, препарат |
1% растворы |
||
Индекс анестезии М±м |
Длительность полной анестезии (мин.) |
Общая продолжительность действия (мин.) |
|
МАВ-161 |
13,0±0 |
||
МАВ-162 |
13,0±0 |
||
МАВ-163 |
13,0±0 |
||
МАВ-171 |
13,0±0 |
||
МАВ-173 |
13,0±0 |
||
МАВ-175 |
13,0±0 |
||
Дикаин |
1300±0 |
50,0 ± 0 |
более 60 минут |
Из результатов таблицы видно, что 6 представленных соединений в 1% растворах оказались не эффективными при данном виде анестезии.
В указанной концентрации все соединения значительно уступает дикаину, по всем параметрам 1% раствору дикаина. Индекс Ренье их равен 13. Все испытанные вещества не вызывают полной анестезии, общая продолжительность действия их равна 0. В этой концентрации все соединения оказывают умеренное раздражающее действие на ткани глаза кролика.
% растворы дикаина проявляют более сильное и длительное раздражающее действие на ткани глаза: гиперемию коньюнктивы век, мигательной перепонки, краев век, склеры, инфильтрацию тканей век.
Острая токсичность.
Токсичность соединений при подкожном введении беспородным белым мышам
Острая токсичность всех представленных соединений и препаратов сравнения изучалась при подкожном введении 300 мышам. Всего поставлено 300 опытов.
Все соединения вводились в1-2 % растворах.
В связи с тем что предельно допустимый вводимый обьем жидкости мышам составляет 1 мл., концентрация растворов малотоксичных веществ была увеличена до 4%.
Картина отравления при ведении токсических доз соединений была однотипной и отличалась быстротой нарастания токсических проявлений с увеличением дозы. Явления интоксикации начинали развиваться через 7-20 минут. Отравление проявлялось общим угнетением животных: у мышей развивалась заторможенность, полностью отсутствовали ответные реакции на внешние раздражения (перемещение животных из одной клетки в другую). Одновременно развивалась одышка. Повышение дозы вело к появлению сначала мышечных подергиваний, а затем клонических, или клонико-тонических судорог. Мыши принимали боковое положение, дыхание становилось редким, аритмичным, поверхностным. Смерть наступала от первичной остановки дыхания через 15-50 минут от момента введения соединения. Выжившие мыши уже через 1,5-2 часа (при введении доз, близких к максимально переносимым) или к концу первых суток выходили из заторможенного состояния, принимали обычное положение, вели себя активно и не отличались от интактных животных. Результаты исследований и вычисленные из опытов данные средней смертельной дозы - ЛД50 со стандартной средней арифметической ошибкой представлены в таблице 2.
Таблица 2 - Острая токсичность вновь синтезированных производных пиперидина и эталонных препаратов
Соединения, препараты |
ЛД50 |
Стандартная средняя арифметическая ошибка |
|
МАВ 161 |
>1000 |
Р1<0.001 P2>0.001 P3<0.001 |
|
МАВ 162 |
1225 |
Р1<0.001 P2>0.001 P3<0.001 |
27,2 |
МАВ 163 |
1125 |
Р1<0.001 P2>0.001 P3<0.001 |
27,2 |
МАВ 171 |
1525 |
Р1<0.001 P2>0.001 P3<0.001 |
24,03 |
МАВ 173 |
1725 |
Р1<0.001 P2>0.001 P3<0.001 |
25,14 |
МАВ 175 |
245 |
Р1>0.05 P2>0.002 P3<0.001 |
19,3 |
Тримекаин |
378,2 |
19,4 |
|
Лидокаин |
248,6 |
18,4 |
|
Новокаин |
480,0 |
9,8 |
|
Дикаин |
41,5 |
1,9 |
|
Примечания: р - коэффициент корреляции по сравнению с тримекаином р - по сравнению с лидокаином р - по сравнению с новокаином. |
Как видно из результатов таблицы, наименее токсичным среди изученых соединений и препаратов сравнения являются соединение МАВ-161, МАВ-162, МАВ-163, МАВ-171, МАВ-173 (плохо растворимые), исследованные ввиде взвесей. ЛД50 их составляет более 1000 мг на кг.
МАВ-175 по токсичности несколько более токсичен, чем тримекаин (p>0.05), и токсичнее, чем новокаин.
Токсичность МАВ-175 статистически достоверно меньше, чем у лидокаина.
Заключение.
Следовательно, все изученные соединения не проявили эффекта при терминальной анестезии, оказывая умеренное раздражающее действие на ткани глаза кролика. Испытанные соединения, кроме МАВ-175, менее токсичны в сравнениии с эталонными препаратами, МАВ-175 сопоставимый по токсичности с тримекаином и лидокаином, и менее токсичный, чем дикаин, могут быть рекомендованы для дальнейшего изучения специфической активности (при инфильтрационной и проводниковой анестезии).
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
- Mukhamedtzhanova G.S., Kadurova D.M., Nasurova S.R. Local anaesthetic activity of the new amidoXime derivatives//Pharmaceutical Chemistry Journal, Springer: 2011. - N8. - Volume 45. - P.468-471.
- Имашова Ш.О., Насырова С.Р., Пичхадзе Г.М. и др. Влияние наноструктурных биополимеров на биофармацевтические свойства активных местноанестезирующих веществ // Вестник КазНМУ. - №5. - 2010. - С.217-219.
- Harvey K., Adair J., Isho M. Can intravenous lidocaine decrease postsurgical ileus and shorten hospital stay in elective bowel surgery. A pilot study and literature review. Am.J.Surg. - 2009. - №198. - Р. 231-236
- Хабриев Р.У. Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ (издание второе, переработанное и дополненное)// Медицина. - М.: 2005. - С.364-392.