Представлены данные изменения кариологических показателей эпителиальных клеток влагалища у экспериментальных крыс, выражающиеся в повышении частоте выявления МЯ в клетках, ядерных протрузий, пролиферации с круговыми насечками клеток, деструкции ядра с некрозом и кариолизисом клеток, являющимся признаком цитогенетических нарушений и хромосомных аббераций.
Актуальность вопроса нарушение репродуктивных органов в условиях воздействия малых доз ионизирующего излучения объясняется тем, что этот показатель отражает состояния здоровья общества в целом и является одним из чувствительных индикаторов действия любых повреждающих факторов окружающей среды [1]. Вопросы диагностики, терапии и профилактики нарушений репродуктивной системы женщин составляют одну из важнейших проблем и имеют серьезное медицинское, социальное и демографическое значение [2].
Обнаружение клеток имеющих в составе микроядра (МЯ), может позволит использовать их в качестве своеобразного маркера патологических изменений в организме [3,4]. Все патологические процессы лежащие в основе образования микроядер, свидетельствуют о снижении жизнеспособности таких клеток, что является показателем не стабильности их функционирования, активизации процессов воспаления и апаптоза. Поскольку апаптоз, играет важную роль в воспалительном процессе, то формирование микроядер целесообразно учитывать как морфологический признак при диагностике заболеваний, сопровождающихся воспалительным процессом. Регистрация структурнофункциональных изменений, при которых в клетках выявляются наличие микроядер, представляют собой высокоинформативный и простой в техническом отношении методом оценки влияния на организм различного рода патогенных факторов [5,6,7].
Однако исследования, посвященные изучению МЯ в эпителиальных клетках влагалища у экспериментальных животных при радионуклидной нагрузке, отсутствуют, что и обусловило необходимость настоящих исследований.
Цель исследования - определить кариологические показатели эпителиальных клеток влагалища у экспериментальных животных при радионуклидной нагрузке ураном.
Материалы и методы.
В качестве объекта исследования явились 60 животных (крысы) с весом 150-250 грамм, из которых: 30 (контрольная) группа; 30 (опытная) группа животных получавшие воду с радионуклидами урана из расчета (10мл /кг веса) ежедневно в течении месяца.
Определяли МЯ в эпителиальных клетках влагалища у экспериментальных животных с учетом их отношения к общему числу ядросодержащих клеток на 1000 клеток. Статистическая обработка материала проводилась методом вариационной статистики с помощью компьютерной программных пакетов MicrosoftExel и Стьюдента.
Результаты исследования:
Как видно из таблицы 1,цитогенетические показатели клеток у экспериментальных животных опытной группы,наблюдались достоверные увеличение частоты МЯ и протрузиями по сравнению с показателем контрольной группы (Р<0,05)при этом частота клеток с МЯ и протрузиями опытной группы составила 4,7±0,3, что значимо выше контрольной группы 2,9±0,4. Показатели частоты клеток с атипичной формой ядра не достиг достоверных значений (Р>0,05).Со стороны пролиферации клеток с двумя ядрами (Р>0,05)наблюдалось не достоверные значения, а клеток с круговой насечкой достоверность выше 4,01±0,01 (Р<0,05) чем в контрольной группе 2,1±0,2 (Р<0,05).Показатели ранней стадии деструкции ядра свидетельствуют об увеличении клеток с некрозом, а именно, наблюдалось значимое повышение клеток с перинуклеарной вакуолью и вакуолизацией ядра в опытной группе (Р<0,05). При этом частота клеток с конденсацией хроматина (Р>0,05).Завершение деструкции ядра с кариолизисом достоверно выше в опытной группе 4,1±0,6 (Р<0,05), а клеток с кариопикнозом, кариорексисом и апаптозными телами не достоверна (Р>0,05).
Таблица 1 - Кариологические показатели эпителиальных клеток влагалища у экспериментальных животных
Анализируемые показатели |
Группа |
Уровень достоверности, Р1-2 |
|
1-контрольная,n=30 М±m |
2-опытная,n=30 М±m |
||
Цитогенетические показатели клеток с: |
|||
МЯ |
0,4±0,7 |
0,8±0,6 |
>0,05 |
протрузиями |
3,9±0,8 |
5,0±0,6 |
>0,05 |
МЯ и протрузиями |
2,9±0,4 |
4,7±0,3 |
<0,05 |
ядром атипичной формы |
3,4±0,5 |
4,2±0,6 |
>0,05 |
Показатели пролиферации клеток с: |
|||
двумя ядрами |
4,4±0,6 |
5,0±0,1 |
>0,05 |
круговой насечкой |
2,1±0,2 |
4,0±0,01 |
<0,05 |
Показатели ранней деструкции ядра с: |
|||
перинуклеарной вакуолью |
3,8±0,6 |
9,3±1,6 |
<0,05 |
конденсацией хроматина |
2,8±0,5 |
4,5±0,5 |
>0,05 |
вакуолизацией ядра |
3,7±0,6 |
5,6±0,7 |
<0,05 |
Показатели завершения деструкции ядра с: |
|||
Кариорексисом |
4,0±0,6 |
4,4±0,7 |
>0,05 |
Кариопикнозом |
2,8±0,6 |
4,3±0,6 |
>0,05 |
Кариолизисом |
3,6±0,6 |
4,1±0,6 |
<0,05 |
апаптозными телами |
2,2±0,4 |
5,0±1,0 |
>0,05 |
Кариологические показатели клеток с протрузиями как и МЯ, образуются в результате хромосомной нестабильности и в следствии апаптоза. Показатели пролиферации клеток ядра с круговой насечкой, образуются в процессе незавершенного митоза. Если изменения в структуре ядра необратимы, то последовательно развивается кариопикноз (сморщивание), кариорексис (распад ядра) и кариолизис (растворение), что заканчивается гибелью клеток
Таким образом, исследования показали что, длительное действие радионуклидов урана на экспериментальных животных оказывает выраженное влияние на эпителиальные клетки влагалища, выражающейся в повышении частоте выявления МЯ в клетках, ядерных протрузий, пролиферации с круговыми насечками клеток, деструкции ядра с некрозом и кариолизисом клеток, являющимися признаками цитогенетических нарушений и хромосомных аберраций.
Отсюда следует, что появление клеток, содержащих МЯ у экспериментальных животных при радионуклидной нагрузке ураном, косвенно свидетельствует о наличии хромосомных нарушений. Поэтому МЯ тест может быть использован в клинической практике для выявления и прогнозирования течения ряда заболеваний, в том числе патологии репродуктивных органов у женщин проживающих вблизи урановых хвостохранилищ.
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
- Юрченко О.Б. Репродуктивное здоровье женщин после односторонней овариоэктомии, проживающих в зонах воздействия малых доз радиации: Автореф. дисс. ... канд.мед.наук –М., 2004. – 41 с.
- Кулаков В.И. Репродуктивное здоровье: проблемы, достижения, перспективы // Проблемы репродукции. - 1999. - №2. - С. 6-9.
- Ильин Д.А. Аспекты формирования микроядер (Обзор литературы) / Д.А. Ильин // Естествознания и гуманизм. - 2006. - Т.3., №3. - С. 67-73.
- Калаев В.Н. Частота встречаемости клеток с микроядрами в плоском эпителии, полученном из соскоба с шейки матки женщин детородного возраста при различных физиологических состояниях, в норме и при воспалении // Естествознание и гуманизм. - 2006. - Т.3., №2. - С. 22-23.
- Колмакова Т.С. Использование микроядерного теста для оценки эффективности лечения аллергии у детей // Методические рекомендации. - 2013. - С. 6-11.
- Юнусов А.А. Формирование микроядер в эксфолиативных клетках при аутоиммунномтиреодите у женщин репродуктивного возраста // Ветник КРСУ. - 2014. - Т.14., №5. - С. 198-208.
- Сулайманов С.Б. Формирование микроядер в клетках при эктопической беременности у женщин репродуктивного возраста // Вестник КРСУ. - 2014. – Т.14. - С. 164-169.