Морфометрическая характеристика микроциркуляторного русла слюнных желез после введения платифиллина и прозерина

АННОТАЦИЯ

Определены изменения метрических показателей обменных и емкостных звеньев кровеносного микроциркуляторного русла слюнных желез под влиянием платифиллина и прозерина. Проведенное морфометрическое исследование позволило установить, что введение экспериментальным животным платифиллина и прозерина вызывает в обменном и емкостном звеньях гемомикроциркуляторного русла долек больших слюнных желез однонаправленные изменения, которые проявляются увеличением показателей с преобладанием значений при введении прозерина. Наиболее выраженное расширение микрососудов выявлено в поднижнечелюстной железе, меньше всего в околоушной. Характерной особенностью гемомикрососудов долек подъязычной железы было отсутствие достоверной разницы между показателями экспериментальных групп животных.

Введение. Слюнные железы играют важную роль в обеспечении гомеостаза полости рта. Некоторые системные заболевания, патология слюнных желез сопровождаются жалобами на ксеростомию [10-12].

Достаточная саливация у пациентов может быть получена механическим или фармакологическим путём возбуждения слюнных желез [13]. Однако лечение слюнной дисфункции и в настоящее время ограничено из-за небольшого количества рандомизированных клинических исследований и отсутствия в большинстве случаев достоверного повышения слюноотделения при приеме препаратов, которые применяются для стимуляции секреции слюнных желез в современной клинической практике [5, 9].

Ответ органа на стимуляцию возможен при наличии структур, чувствительных именно к этому раздражителю. Введение экспериментальным животным прозерина и платифиллина вызывает структурные изменения в железистых компонентах слюнных желез [2]. Выраженность этих изменений разнообразна, как разнообразны и проявления со стороны концевых отделов и выводных протоков [1, 3]. Согласно данным литературы [4], чувствительными к холинергической стимуляции являются клетки серозных полулуний подъязычных желез, хотя они почти не реагируют на пищевую стимуляцию.

Цель исследования: определение изменений метрических показателей обменных и емкостных звеньев кровеносного микроциркуляторного русла слюнных желез под влиянием платифиллина и прозерина.

Материал и методы исследования. Исследование выполнено на 25 белых беспородных крысах массой 180-200 г. Животные были разделены на 3 группы:

— контрольная группа'. 5 животным в/a капельно вводили 2,5 мл изотонического раствора NaCl для исключения влияния водной нагрузки в группе сравнения,

— I экспериментальная группа'. 10 животным в/a капельно вводили платифиллин-дарница 0,3 мг/кг на изотоническом растворе,

— II экспериментальная: 10 животным в/а капельно вводили прозерин-дарница 0,1 мг/кг на изотоническом растворе.

Животных выводили из эксперимента путем передозировки тиопенталового наркоза. Кусочки больших слюнных желез заключали в епон-812 по общепринятой методике [6]. Из полученных блоков получали полутонкие срезы, окрашивали их полихромным красителем и изучали в световом микроскопе. Морфометрические показатели: диаметр просвета капилляров, посткапиллярных венул и венул в составе долек слюнных желез определяли с помощью микроскопа с цифровой микрофотонасадкой фирмы «Вíогех-3» (серийный номер 8М-500 Т) с цифровой камерой DCM-900 с адаптированными для данных исследований программами.

Количественный анализ результатов морфометрического исследования и статистическую обработку морфометрических данных проводили с общепринятыми статистическими методами с использованием программы Exell [7].

Содержание и манипуляции с животными проводили в соответствии с «Общими этическими принципами экспериментов на животных», принятых Первым национальным конгрессом по биоэтике (Киев, 2001), также руководствовались рекомендациями «Европейской конвенции о защите позвоночных животных, используемых для экспериментальных и других научных целей» [8].

Результаты исследования. Комплексная оценка данных морфометрии обменных и емкостных звеньев кровеносного микроциркуляторного русла долек слюнных желез установила, что введение платифиллина и прозерина достоверно влияло на значения среднего диаметра просвета капилляров, посткапилляров и венул в дольках околоушных желез крыс.

При введении платифиллина средний диаметр просвета капилляров достоверно (при р‹ 0,05 по сравнению с контрольной группой животных) увеличился на 79,4 %. Средний диаметр посткапилляров достоверно (при р ‹ 0,05 по сравнению со значениями в контрольной группе) увеличился на 27,6 %, а средний диаметр просвета венул достоверно (при р‹ 0,05 по сравнению с контрольной группой животных) увеличился на 22,2 %.

Средние метрические показатели диаметра просвета капилляров, посткапилляров и венул крыс, которым вводили прозерин, были достоверно больше значений в контрольной группе животных (при р‹ 0,05). При введении прозерина средний диаметр просвета капилляров достоверно (при р‹ 0,05 по сравнению с контрольной группой животных) увеличился на 55,9 %. Средний диаметр просвета посткапилляров достоверно (при р‹ 0,05 по сравнению с контрольной группой животных) увеличился на 39,4 %, а средний диаметр просвета венул достоверно (при р‹ 0,05 по сравнению с контрольной группой животных) в среднем увеличился на 12,3 %.

Достоверных отличий по сравнению с I экспериментальной группой со стороны среднего диаметра просвета капилляров во II экспериментальной группе нами не обнаружено.

Средний диаметр просвета посткапилляров и венул в I экспериментальной группе, хотя и был достоверно больше, чем в контроле (при р‹ 0,05), но по сравнению со II экспериментальной группой животных средний диаметр просвета капилляров на 13,1 %, средний диаметр просвета посткапилляров на 18,6 %, показатель среднего диаметра просвета венул на 9,2 % были меньше (табл. 1).

Таблица 1

Средние значения диаметров обменных и емкостных звеньев гемомикроциркуляторного русла долек околоушной железы крыс, мкм

Примечание:

* р‹ 0,05 по сравнению с контрольной группой;

** р ‹ 0,05 по сравнению с экспериментальной группой.

Посткапилляры долек поднижнечелюстных слюнных желез при введении платифиллина достоверно (р‹ 0,05 по сравнению с контрольной группой) увеличили показатели среднего диаметра просвета на 95,1 %. При введении прозерина значения среднего диаметра просвета посткапилляров увеличился на 79,1 %. При сравнении полученных метрических данных между экспериментальными группами животных нами установлена достоверная разница (р‹ 0,05) в сторону преобладания средних значений диаметра просветов посткапилляров на 9 % в I экспериментальной группе животных.

Венулы при введении платифиллина увеличили средний диаметр просвета (при р‹ 0,05 по сравнению с контрольной группой животных) на 111,1 %. При введении прозерина этот метрический показатель также увеличился (при р‹ 0,05 по сравнению с контрольной группой животных) на 117,9 %. Отметим, что при сравнении полученных данных нами установлено отсутствие достоверной разницы между средними показателями диаметра просвета венул (при р‹ 0,05) между экспериментальными группами крыс (табл. 2).

Средние значения диаметров просветов обменных и емкостных звеньев кровеносного микроциркуляторного русла долек подъязычных слюнных желез увеличились во всех экспериментальных группах.

Средний диаметр просвета капилляров при введении платифиллина достоверно (р‹ 0,05 по сравнению с контрольной группой животных) увеличился на 72,6 %. Введение прозерина вызвало увеличение средних значений диаметра просвета капилляров на 81,8 %. Между экспериментальными группами животных достоверных различий изученного показателя не установлено.

Средний диаметр просвета посткапилляров при введении платифиллина достоверно (р‹ 0,05 по сравнению с контрольной группой животных) увеличился на 37,3 %, при введении прозерина на 42,4 %. Однако достоверной разницы метрических значений (при р‹ 0,05) между экспериментальными группами крыс нами не обнаружено.

Средний диаметр просвета венул при введении платифиллина достоверно (р‹ 0,05 по сравнению с контрольной группой животных) увеличился на 16,8 %. Введение прозерина вызвало достоверное увеличение среднего диаметра просвета венул (при р‹ 0,05 по сравнению с контрольной группой животных) на 66,6 % (табл. 3).

Выводы

Введение экспериментальным животным платифиллина и прозерина вызывает в обменных и емкостных звеньях кровеносного микроциркуляторного русла долек больших слюнных желез крыс однонаправленные изменения, которые проявляются увеличением показателей с преобладанием значений при введении прозерина. Наиболее выраженное расширение микрососудов определено в поднижнечелюстной железе, наименьшее в околоушной. Характерной особенностью гемомикрососудов долек подъязычной железы было отсутствие достоверной разницы между показателями в экспериментальных группах животных.

ЛИТЕРАТУРА

1. врошенко Г. А., Костиленко Ю. П., Скрипнíков М. С. та ін. Кореляцíйнí зв'язки мíж морфометричними показниками великих слинних залоз щурíв в нормí í пíсля стимуляцľí периферичноï нервовоï системи // Свíт медицини та бíологľí. 2009. № 3, Ч. I. С. 64-69.
2. врошенко Г. А., Шепíтько В. I., Цуканов Д. В. Морфометрична характеристика слинних залоз щурíв пíсля введения прозерину í платифİлíну ⁄ // Свíт медицини та бíологľí. 2011. №3. С. 7-10.
3. врошенко Г. А. Морфометричне дослíдження привушних залоз пíсля стимуляцíï адреналíном // Вестник проблем биологии и медицины. Полтава. 2003. Вии. 3. С. 72-75.
4. врошенко Г. А. Морфометрична характеристика обмíнних ланок кровоносного мíкроциркуляторного русла слинних залоз пíсля введения ацетилхолíну // Галицький лíкарський вíсник. ìвано-Франкíвськ. 2003. № 2. С. 89-91.
5. врошенко Г. А. Стимуляцíя адреналíном МЦР слинних залоз // Вестник проблем биологии и медицины. Полтава. 2003. Вии. 2. С. 27-29.
6. Kapyny В. Я. Электронная микроскопия. Киев: Вища школа. 1984. 208 с.
7. Л апач С. H., Чу б енко А. В., Бабич П. Н. Статистические методы в медико-биологических исследованиях с использованием Exel. Киев: Морион. 2000. 320 с.
8. European convention for the protection of vertebrate animals used for experimental and other scientific purposes // Slrasbonrg: Council of Europe, 1986. 53 p.
9. MasudaW., JimiE. CD38∕ADP-ribosyl cyclase in the rat sublingual gland: Subcellular localization under resting and saliva-secreting // J.Dent Res. 2012. Vol. 91 (2). P. 197-202.
10. Mattioli T. M., Silva S. D., Gregio A. M. et al. // The effects of antidepressants and pilocarpine on rat parotid glands: an immunohistochemical study // Gerodontology. 2012. Vol. 29 (2). P. 1045-1051.
11. OnoK., Inagaki T., IidaT. et al. Distinct effects of Cevimeline and pilocarpine on salivary mechanisms, cardiovascular response and thirst sensation in rats // Arch Oral Biol. 2012. Vol. 57 (4). P. 421-428.
12. Qi W., YangX F. Shan et al. Effect of parasympathectomy on the salivary secretion of submandibular glandin // Zhonghua Kou Qiang Yi Xue Za Zhi. 2011. Vol. 46 (9). P. 519-523.
13. SumidaT., IizukaM., AsashimaH. Pathogenic role of anti-M3 muscarinic acetylcholine receptor immune response in Sj~-gren's syndrome // Presse Med. 2012. Vol. 41 (9 Pt 2). P. 461-466.