Совершенствование диагностики инфекций, передаваемых половым путем

Весьма распространенным заболеванием, передающимся половым путем является хламидиоз, вызываемый Chlamydia trachomatis. Высокое социальное значение хламидийной инфекции в первую очередь связано с риском развития осложнений, вызываемых этим возбудителем, приводящих к нарушению репродуктивной функции. На этом основании возбудителя хламидиоза рассматривают как безусловного патогена. Коварство этого микроорганизма заключается в часто малосимптомном или бессимптомном течении инфекционного процесса. Но даже при наличии клинических признаков инфекции их характер не позволяет с уверенностью поставить этиологический диагноз [1,2].

Диагностика инфекции культуральным методом, который на сегодняшний день является «золотым стандартом» чрезвычайно трудоемкий и длительный. Требует 4-7 и более суток инкубации микроорганизма, а также специальных сред и расходного материала [3].

Цель- совершенствование диагностики хламидиоза методом ПЦР NASBA (Nucleic Acid Sequence-Based Amplificaition).

Материалы и методы

На базе нашей клиники было проведено обследование 17 пациентам (из них 6 мужчин, 9 женщин) в возрасте от 22 до 51 лет с целью диагностики хламидиоза методом ПЦР Real-Time - NASBA. Для проведения анализа использовался следующий материал: соскобы эпителиальных клеток из цервикального канала и уретры у женщин, со- скобы из уретры и первая порция утренней мочи у мужчин. Материал забирался одноразовыми урогенитальными зондами в одноразовую пробирку с транспортной средой. Исследования осуществлялись методом ПЦР в режиме реального времени на приборе «Rotor Gene - 6000» (Corbett Research, Австралия) с использованием тест-системы «Ампли-Сенс Chlamydia trachomatis-РИБОТЕСТ» производства «Интерлабсервис» (Москва).

Главным объектом исследования являются молекулы РНК. Она содержится в рибосомах вирусов, различных бактерий и других возбудителях. РНК рибосом является маркером жизнеспособности микроорганизмов.

Результаты исследования

Анализ на возбудитель хламидиоза проводился в течение дня. Параллельно проводилась ПЦР-диагностика в режиме Real-Time. Использование данной тест-системы позволило выявлять очень низкие концентрации возбудителя хламидиоза, подтверждать диагноз в сомнительных случаях и более надежнее оценивать результаты проводимого лечения.

Из 17 пациентов четверо обследовались впервые для исключения возбудителя хламидиоза. Результаты проведенного исследования были отрицательными в обоих форматах. 13 пациентов проходили контрольное обследование после проведенного лечения через 2 недели. Во всех пробах методом ПЦР-NASBA результат был отрицательным. В двух случаях при проведении ПЦР Real-Time результат был положительным. Это объясняется тем, что даже короткие участки ДНК погибшей клетки могут давать положительный результат ПЦР-анализа. Напротив, метод NASBA определяет рибосомальную РНК - маркер жизнеспособности микроорганизма. Поэтому обычный ПЦР- анализ рекомендуется проводить не менее чем через 3 недели после завершения этиотропной терапии.

Таким образом, проведенные исследования показали, что диагностика урогенитального хламидиоза методом ПЦР Real-Time - NASBA является более чувствительным и точным и свидетельствуют о необходимости более активного использования в лабораторной диагностике хламидийной инфекции. Метод NASBA может быть предложен в качестве арбитражного подтверждающего теста, а также для проведения контроля излеченности.

 

Список литературы:

  1. Савичева А.М. Микробиологическая диагностика инфекций, передаваемых половым путем // Consilium Medicum.- 2007.- Том 9, №6.- С.11-14
  2. Герасимова Н.А., Чигвинцева Е.А., Евстигнеева Н.П. и др. Сравнительная оценка информативности методов генодиагностики урогенитального хламидиоза у мужчин //Сборник трудов VII Всероссийской научно-практической конференции.- 2010.- Том 3. - С.200-202.
  3. Якубович А.И., Корепанов А.Р. Урогенитальный хламидиоз// Метод. рекомендации.- Иркутск. - 2006.- 125с.
Год: 2012
Город: Алматы
Категория: Медицина