Стандартизация сухого экстракта «кучли юрак»

Резюме

Получено оригинальное лекарственное средство «Кучли юрак» в виде сухого экстракта. Сухой экстракт применяется как средство для профилактики сердечной недостаточности в качестве источника биологически активных веществ. Настоящей работы является разработка методики качественного и количественного определения биологически активных вешеств сухом экстракте. На основании полученных результатов рекомендовано стандартизировать сухой экстракт по содержанию флавоноидов, Содержание суммы флавоноидов в пересчете на рутин в сухом экстракте составило 0,55 мг/мл, относительная ошибка среднего результата составила Eср=1,89%, что соответствует требованиям, предъявляемым инструментальным методам анализа. Определение на сухой остаток провели по требованиям НТД. Полученный нами экстракт влаги содержит 3,60% влаги.

Ключевые слова: сухой экстракт, флавоноиды,, рутин, сухой остаток, макро-микро элементы, УФ- спектрофотометрия.

В последнее время растет потребность в лекарственных травах, лекарствах. В связи с этим ведутся важные исследования по изучению и внедрению новых, эффективных, обладающих мягким действием и практически без побочных эффектов препаратов на основе лекарственных растений. Лекарственные травы очень важны как в народной и в научной медицине. Хорошо известно, что растения содержат макро- и микроэлементы в дополнение к своим основным химическим веществам. Они органически связаны, удобны и усваиваются растениями. Терапевтическое действие микроэлементов может усиливать начальную активность растений. Кроме того, тяжелые металлы имеют большое значение для контроля качества и стандартизации растений и лекарств [1,2].

Сырьё лекарственных растений содержит достаточно богатый комплекс биологически активных веществ, среди которых превалирующей группой в количественном отношении являются флавоноиды. Флавоноиды природные красители, пищевые антиоксиданты, дубильные вещества. Флавоноиды это группа растительных веществ, которые попадая в организм человека с пищей, влияют на активность многих ферментов и широко используются как официальной, так и народной медициной в качестве лекарственных средств. Научно доказана способность многих флавоноидов регулировать проницаемость стенок кровеносных сосудов и улучшать их эластичность, а также предотвращать склеротические поражения. В качестве лекарственных средств применяются флавоноиды рутин и кверцетин, называемые P-витаминами. Они обладают способностью, особенно выраженной в сочетании с аскорбиновой кислотой, уменьшать проницаемость и ломкость капилляров, тормозят свёртывание крови и повышают эластичность эритроцитов Самый известный из флавоноидов, оказывающий благотворное действие на сосуды – это рутин (иногда его еще называют витамином Р или С2). Этот флавоноид (или его синтетический аналог) входит в состав многих препаратов, которые уменьшают ломкость капилляров [3].

Эти же флавоноиды способны защищать ткани от повреждений, вызванных избыточным выбросом так называемых гистаминов (веществ, высвобождающихся при воспалительных процессах и аллергии), что дает дополнительные возможности в лечении астмы и аллергических реакций [4].

Цель исследования: Нами было получено оригинальное лекарственное средство «Кучли юрак» в виде сухого экстракта. Сухой экстракт применяется как средство для профилактики сердечной недостаточности в качестве источника биологически активных веществ. Целью настоящей работы является разработка методики качественного и количественного определения биологически активных вешеств сухом экстракте.

Материали и методы: Исходным сырьем для получения сухого экстракта «Кучли юрак» служили лекарственные растения такие, как плоды боярышника (Fructus Srataegi), трава пустырника (Herba Leonuri), трава зизифоры (Folia Herba Ziziphore), плоды шиповника(Fructus Rozae).

Боярышника плоды - Плоды боярышника усиливают сокращение сердечной мышцы и уменьшают ее возбудимость, улучшает кровообращение в сосудах сердца и мозга, повышает чувствительность миокарда к действию сердечных гликозидов.

Пустырника трава - Оказывает седативное, гипотензивное, отрицательное хронотропное и кардиалгические действие. Невротические и астеноневротические расстройства, сопровождающиеся нарушениями сна, неврастения, неврозы, вегетососудистая дистония. Вегетоневрозы в предклимактерическом периоде, сопровождающиеся повышением артериального давления, тахикардией и кардиалгическими болями. В составе комплексной терапии начальной стадии артериальной гипертонии. Повышенная возбудимость и при гипертериозе.

Трава Зизифоры-в составе комплексной терапии стенокардии, миокардита, легкой формы артериальной гипертензии, затруднения мочеиспускания, хронических нефритов. Плоды шиповника - Стимулирует неспецифическую резистентность организма, способствует регенерацию тканей и синтез гормонов, уменьшает проницаемость сосудов, участвует в углеводном обмене, обладает противовоспалительными свойствами. По литературным данным использованные лекарственные растения содержат такие биологически активные вещества, как флавоноиды, дубильные вещества, эфирные масла, белковые вещества, витамины С, Р, К 1, В2, макро – и микроэлементы и др [5,6].

Качественные реакции проводили по НТД, макро- и микроэлементы определяли с помощью ICP масс- спектрального анализа, количественное определение УФ-спектрофотометрическом методом .

Сухой экстракт «Кучли юрак» бурого цвета с характерным запахом. Сухой экстракт нерастворим в воде, трудно растворим в спирте и органических растворителях.

Сухой экстракт содержит значительное количество остаточной влаги, но не может превышать количество, указанное в технических характеристиках. Если остаточный избыток превышает нормальное содержание влаги, ферменты в сухом экстракте вызывают деградацию или полную потерю лекарственного средства, такие как расщепление и гидролиз активных веществ. Кроме того, чрезмерная остаточная влажность вызывает гниение и образование экстракта. Определение на сухой остаток провели по требованиям НТД [7,8,9]. Полученный нами экстракт влаги содержит 3,60% влаги .

Масс-спектральный анализ может определить качество и количество микроэлементов. Пробу отправляли на масс-спектрометр со скоростью 1 мл в минуту. Приготовление образца: 0,1 гр сухого экстракта помещали в мерную пробирку на 10 мл и разбавляли водой до метки. Полученный раствор фильтруют и в дальнейшем используют для прямого ввода в спрей-камеру прибора ICP-MS. Параметры: мощность плазмы 1200 Вт, время интегрирования 0,1 с, вращение перистальтического насоса - 0,1 с / мес.

Результаты и обсуждение: Стандартный раствор мультиэлемента, содержащий 27 элементов, составляет 1,0 мг / л. Результаты представлены в таблице №1

Таблица 1 – стандартный раствор

В результате проведенных исследований было выявлено, что сухой экстракт содержит все необходимые макро и микроэлементы, среди которых наибольшее количество составляют: магний–2,664 мг/гр, калий–43,125 мг/гр, кальций–2,005 мг/гр, фосфор–9,145 мг/гр.

Количественное содержание суммы флавоноидов в сухом экстракте определяли спектрофотометрическим методом в пересчёте на рутин, основанным по реакции комплексообразования с алюминия хлоридом.

Для спектрофотометрического анализа количественного содержания суммы флавоноидов нами исследованы спектры поглощения «Кучли юрак» и раствора РСО рутина в комплексе с AlCl3. Максимумы поглощения окрашенных продуктов реакции суммы флавоноидов с AlCl3 представленны в табл. 2.

Таблица 2- Максимумы поглощения окрашенных продуктов реакции суммы флавоноидов с AlCl3

Для этого 1 мгр препарата помещают в мерную колбу объемом 25 мл, прибавляют 5 мл 96% спирта этилового, 5 мл 5% раствора алюминия хлорида в 70% спирте этиловом, через 10 минут прибавляют 2 мл 5% раствора уксусной кислоты в 70% спирте этиловом, доводят объем раствора 70% спиртом этиловым до метки и перемешивают. Через 30 минут измеряют оптическую плотность полученного раствора на спектрофотометре при длине волны 408 нм в кювете с толщиной слоя 10 мм. В качестве раствора сравнения используют раствор, который состоит из 1 мгр препарата, 2 мл 5% раствора уксусной кислоты в 70% спирте этиловом, которые были получены в мерной колбе объемом 25 мл и доведены до метки тем же спиртом.

Параллельно измеряют оптическую плотность 1 мл раствора Б стандартного образца рутина приготовленного аналогично испытуемому раствору.

Приготовление раствора стандартного образца рутина.

Около 0,025г (точная навеска) рутина высушенная при 1030С до постоянной массы, помещают в мерную колбу вместимостью на 100 мл, растворяют в 80 мл 96 % ного спирта при нагревании на водяной бане, после охлаждения объём доводят тем же спиртом до метки перемешивая (раствор А). 2,5 мл раствора А стандартного образца рутина помещают в мерную колбу вместимостью на 25 мл и доводят до метки 70 % ным спиртом этиловым (раствор Б).

Содержание суммы флавоноидов (Х) в препарате при перерасчете на рутин в миллиграммах в 1мл рассчитывают по формуле:

37

Таблица 1 - Метрологические характеристики результатов метода количественного определения суммы флавоноидов сухого экстракта «Кучли юрак» (n=5; P=95%; t(p,f)=2,78)

Из результатов исследований, содержание флавоноидов, в пересчете на рутин в сухом экстракте должно быть не менее 0,55 мг/мл .

Результаты изучения метрологической характеристики разработанной методики показали, что относительная ошибка среднего результата составила Eср=1,42%.

Выводы. На основании полученных результатов рекомендовано стандартизировать сухой экстракт по содержанию флавоноидов, содержание суммы флавоноидов в пересчете на рутин в сухом экстракте составило 0,55 мг/мл, относительная ошибка среднего результата составила Eср=1,89%, что соответствует требованиям, предъявляемым инструментальным методам анализа. Определение на сухой остаток провели по требованиям НТД . Полученный нами экстракт влаги содержит 3,60% влаги.

Сухой экстракт содержит все необходимые макро и микроэлементы, среди которых наибольшее количество составляют: магний–2,664 мг/гр, калий–43,125 мг/гр, кальций–2,005 мг/гр, фосфор–9,145 мг/гр. Содержание минеральных веществ позволяет расширить спектр применения сухого экстракта и свидетельствует о перспективности его использования в медицинской практике при недостатке вышеуказанных макро и микроэлементов.

Литература

1. Иминова И.М., Мамажалилова М.М., Макро- и микроэлементный состав жидкого экстракта «Гепостим». Фармацевтична наука та практика: проблеми, досягнення, перспективи розвитку. Матеріали I науково- практичної інтернет-конференції з міжнародною участю. 24-25 березня 2016 року м. Харків.
2. Иминова И.М., Иминова М.М., «Кучли юрак» суюқ экстракт таркибидаги биологик фаол моддаларни УБ- спектрофотометрия усулида аниқлаш. “XXI ASR-INTELLEKTUAL AVLOD ASRI ” shiori ostidagi yosh olim va talabalarning hududiy ilmiy amaliy konferensiyasi 2016 yil 24-25may
3. А.И. Чирков, В.С.Серый. Лекарственные сборы. Москва. “Медицина” 1993,134С.
4. Хоружая Т.Г., Чучалин В.С. Растворы, настойки, экстракты промышленного производства. Деловая игра.Томск. СГМУ. 2009, 177С.
5. Ross J. A , Kasum C. M. Dietary flavonoids: bioavailability, metabolic effects, and safety // Annu Rev Nutr. - 2002. - Т. 22.- С. 19-34.-PMID 12055336.
6. Е.А. Ладынина, Р.С. Морозова. Фитотерапия. Ленинград. “Медицина” 1987,66С.
7. Middleton E., Jr., Kandaswami C., Theoharides T.C. The Effects of Plant Flavonoids on Mammalian Cells:Implications for Inflammation, Heart Disease, and Cancer. Pharmacol. Rev. 2000. V.52, No.4. P.673-751 -> abstract: [1] & Full Text: [2].
8. Биологическая активность растительных источников флавоноидов/ Мокин Ю.Н., Арльт А.В., Зенченко Л.А., Ивашев М.Н. // Фармация.-Москва, 2006.- № 3.-С. 36-37.
9. Государственная фармакопея – Изд. XI. – Вып. 1. Общие методы анализа. Лекарственное расти-тельное сырье. – М.: Медицина, 1990.