Валидационная оценка методик количественного определения аскорбиновой кислоты в лекарственных формах

Резюме

Проведена валидация методик идентификации, количественного определения аскорбиновой кислоты в лекарственной форме по показателям “Специфичность”, “Правильность”. Методика соответствует валидацион- ной характеристике “Специфичность”, “Правильность”. Поскольку t =0,94 << (95%, f) =2,31, что позволяет считать результаты выборки свободными от систематической ошибки.

Ключевые слова: валидация, аскорбиновая кислота, специфичность, правильность

Как известно, валидация на фармацевтическом производстве установлена в разделе “ Валидация” ОСТ 42-510-98 «Правила производства и контроля качества лекарственных средств GMP». Пунктом 7.1. данного документа сформулировано следующее :«Валидация заключается в документированном подтверждение соответствия оборудования, условий производства, технологического процесса, качества полупродукта и готового продукта действующим регламентом и/или требованиям нормативной документации »(3). Следовательно, предприятие должно провести проверку и оценку надежности всех элементов производственного цикла для того, чтобы подтвердить свою способность стабильно выполнять соответствующий технологический регламент производства и выпускать готовый продукт, характеристики которого удовлетворяют требования соответствующей фармакопейной статьи, и письменно зарегистрировать полученные результаты и выводы (4). Так, цель валидации аналитических методик- демонстрация их пригодности для решения предполагаемых задач, т.е. установления измеряемых и оцениваемых показателей качества лекарственных средств,то есть пригодности проведения контроля качества. При валидации методик для оценки качества лекарственного препарата по показателю « Правильность», как правило, используются несколько методов. Все руководства по валидации методик измерений рекомендуют оценивать параметр “ Правильность” в ходе контролируемого эксперимента с использованием специально подготовленных проб с известным содержанием анализируемого вещества или в сравнении результатов, полученных при использовании другой давно используемой методики. Нами использован метод оценки на модельных смесях « плацебо».

Проведена валидация методик идентификации с различными реактивами. Приведена валидационная оценка методики количественного определения аскорбиновой кислоты в лекарственной форме по показателям “Специфичность”, “Правильность”. Методика соответствует валидационной характеристике “Специфичность”, “Правильность”. Поскольку t =0,94 << (95%, f) =2,31, что позволяет считать результаты выборки свободными от систематической ошибки.

Возрастающие требования к безопасности, эффективности и качеству лекарственных средств обуславливают необходимость разрабатывать новые, а также стандартизовать существующие методы их анализа. Любая аналитическая методика должна быть утверждена в установленном порядке, что подтверждает ее метрологическая аттестация. Для этой цели в фармацевтической практике используют метод валидации, то есть экспериментальное доказательство того, что методика пригодна для выполнения поставленных задач (1).

Цель и задачи исследования. Провести валидационную оценку методик качественного и количественного анализа кислоты аскорбиновой в растворе для инъекций по показателю “Специфичность”, “Правильность” .

Материалы и методы. Аскорбиновая кислота, титриметрия.

Результаты и обсуждение. Под специфичностью методики следует понимать способность достоверно определять анализируемое соединение в присутствии других компонентов образца – лекарственных веществ, вспомогательных веществ и посторонних примесей (включая потенциально возможные).

Для определения специфичности методики приготовили согласно прописи три модельных смеси (таб.1). Для установления специфичности в идентификационных тестах, основанных на качественных реакциях отмечено, что в отсутствии положительного эффекта реакции на сопутствующие вещества, так и в возможности ингибирования данной реакции компонентами образца.

Так, провели установление специфичности следующих реакций:К 1 мл каждой модельной смеси прибавляли 0,5 мл раствора серебра нитрата (для 5 % раствора);

С модельными смесями 1 и 2 выпадал темно-серый осадок (кислота аскорбиновая), с модельной смесью 3 осадок не образовывался.К 0,2 мл каждой модельной смеси разбавляли 10 мл воды и прибавляли по каплям раствор натрия 2, 6-дихлор-фенолиндофенолята;С модельными смесями 1 и 2 синяя окраска последнего исчезала (кислота аскорбиновая), с модельными смесями окраска сохранялась.

Таблица 1 - Приготовление модельных растворов кислоты аскорбиновой

Модельная смесь

1

2

3

Навеска кислоты аскорбиновой (г)

5,0

5,0

 

Трилона Б (г)

0,025

 

0,025

Натрия гидрокарбоната(г)

2,385

 

2,385

Натрия сульфита безводного(г)

0,200

 

0,200

Воды для инъекций

До 100 мл

До 100 мл

До 100 мл

Методики, используемые для количественного определения также подвергались валидационной оценке по данному критерию. Главным является то, что растворители и сопутствующие компоненты не вступили в реакцию с титрантом, а также необходимо убедиться в специфичности индикатора. При анализе конкретных объектов приготовили модельную смесь и провели титрование. Поскольку, в ряде случаев, затрачивается часть титранта на взаимодействие с растворителем, проводился контрольный опыт.

Таблица 2 -Приготовление модельных растворов кислоты аскорбиновой

Модельная смесь

1

2

3

Навеска кислоты аскорбиновой (г)

4,0

5,0

6,0

Трилона Б (г)

0,02

0,025

0,03

Натрия гидрокарбоната (г)

1,908

2,385

2,862

Натрия сульфита безводного (г)

0,16

0,200

0,24

Воды для инъекций

До 100 мл

До 100 мл

До 100 мл

Так, провели установление специфичности йодатометрической методики количественного определения аскорбиновой кислоты: К 1,0 мл каждой модельной смеси прибавляли 5 мл воды и титровали 0,05 М раствором йода до слабо-желтого окрашивания, не исчезающего в течение 30 сек. При этом установлено, что на титрование модельной смеси 1 и 2 затрачены равные количества титранта, модельная смесь 3 в данных условиях не титровалась.

Также валидировалась эта методика по показателю правильность. Как известно, правильностью аналитической методики называется степень близости экспериментальных результатов к истинному значению во всей области измерений. Главным фактором, определяющим правильность, является значение систематической погрешности. Согласно рекомендациям ICH необходимо проанализировали не менее 9 образцов на 3 уровнях концентраций. Для оценки полученных результатов наиболее простым и наглядным критерием послужила открываемость (R) (2). Результаты приведены в таб.3.

Таблица 3 - Результаты определения правильности методики йодатометрического

количественного определения

№ п/п

Уровень

Взятомодельной смеси,(г или мл)

Взятолекарств енного вещества, г

Объем титранта, мл

Найденолекарст венного вещества, г

Открываем ость

Метрологи ческие характ-ки

   

1

1

1,0 мл

0,04

4,9

0,0406

101,4

100,4 SD=1,913 RSD=1,27 t=0.94

2

1

1,0 мл

0,04

5,8

0,0474

102,3

3

1

1,0 мл

0,04

5,0

0,0412

103,5

4

2

1,0 мл

0,05

5,7

0,0498

99,6

5

2

1,0 мл

0,05

5,9

0,0488

97,7

6

2

1,0 мл

0,05

6,1

0,0502

100,4

7

3

1,0 мл

0,06

7,4

0,0607

101,6

8

3

1,0 мл

0,06

7,2

0,0590

98,4

9

3

1,0 мл

0,06

7,2

0,0595

99,1

Таким образом, R должна находиться в пределах от 98 до 102, следовательно, данная методика соответствует валидационной характеристике “Правильность”. Поскольку t =0,94 << (95%, f) =2,31, что позволяет считать результаты выборки результатов свободными от систематической ошибки.

Выводы: Проведена валидация методик идентификации, количественного определения аскорбиновой кислоты в лекарственной форме по показателям “Специфичность”, “Правильность”. Методика соответствует валидационной характеристике “Специфичность”, “Правильность”. Поскольку t =0,94 << (95%, f) =2,31, что позволяет считать результаты выборки свободными от систематической ошибки.

Литература

  1. Лекарственные растения и лекарственное растительное сырье, Содержащие витамины, поли-сахариды, жирные масла /Учебно-методическое пособие для самостоятельной работы студентов фармацевтического факультета//Издательско-полиграфический центр Воронежского государственного университета. – 2008. - 88 с.
  2. Оценка правильности количественного определения кислоты аскорбиновой в плодах шиповника тремя колориметрическими методами / Е.В. Зыкова, Г.П. Дудченко, В.Г. Зайцев, Е.В. Денежко, О.В. Островский // Разработка, исследование и маркетинг новой фармацевтической продукции: сб. науч. тр.– Пятигорск, 2008. – Вып. 63. – С. 254-255.
  3. Валидация аналитических методик для производителей., Москва, Издательство “ Литерра”, 2008.- С.70.
  4. ОСТ 42-510-98 “ Правила производства и контроля качества лекарственных средств GMP».
  5. Ж.И.Аладышева, В.В.Береговых, А.П.Мешковский,Л.М.Левин./Основные принципы проведения валидации на фармацевтическом производстве., Москва- С.73.
Год: 2019
Город: Шымкент
Категория: Медицина