Резюме
Определены числовые показатели и установлен химический состав основных действующих веществ жидкого экстракта артишока колючего (Cуnara scolymus L.) выращиваемого в Узбекистане. Определение основных действующих веществ методом ВЭЖХ в экстракте показали высокое содержание хлорогеновой кислоты (5119,32 мкг/мл), цинарозида (2843,97 мкг/мл) и кофейной кислоты (344,26 мкг/мл). Сумма дубильных веществ в пересчете на танин определенная перманганатометрическим методом составило 2,36%.
Ключевые слова: Cуnara scolymus L., жидкий экстракт, хлорогеновая кислота, биологически активные вещества, сухой остаток.
Химическая природа биологически активных веществ артишока колючего и их биологическая активность интенсивно изучается во многих странах мира. Экстракты и настойки на основе артишока используется в медицинской практике в лечении метаболического синдрома и диспепсии, как гепатопротектор, понижает уровень холестерина в сыворотке крови, они обладает спазмалитическими свойствами и противовоспалительной активностью, улучшает пищеварение. Препараты из артишока назначают пациентам с атеросклерозом.
Большинство фенольных соединений экстрактов артишока содержат хлорогеновую кислоту.
Целью исследования является определение числовых показателей и изучение некоторых биологически активных веществ жидкого экстракта артишока колючего выращиваемого в Узбекистане.
Экспериментальная часть. Для характеристики числовых показателей жидкого экстракта на основе артишока колючего нами определены следующие показатели как описание, рН, тяжелые металлы, сухой остаток, плотность, содержание спирта согласно методикам ГФ [2].
Определение тяжелых металлов проводили для 1 мл препарата (табл.1).
Таблица 1 - Числовые показатели жидкого экстракта артишока колючего
|
№ |
Определяемые показатели |
Полученные результаты |
|
1 |
Описание |
Жидкость коричневого цвета с характерным запахом и горьковатым вкусом |
|
2 |
рН |
5,14 |
|
3 |
Тяжелые металлы |
Соответствует требованиям ГФ |
|
4 |
Сухой остаток, % |
14,24 |
|
5 |
Плотность, г/см3 |
1,076 |
|
6 |
Содержание спирта, % |
23,86 |
Количественное содержание некоторых биологически активных веществ (БАВ) в жидком экстракте разбавленным этиловым спиртом (v/v, 1:10) изучали методом методом обращено - фазной ВЭЖХ на приборе Agilent Technologies 1100 серии укомплектованного дегазатором G1379A, 4-х градиентным насосом 1311А и детектором VWD G1314. Колонка Agilent Zorbax Eclipse XDB-C8 (4,6х250 мм), предколонка 2,1x12,5 мм, размером частиц 5 мкм, подвижная фаза: раствор А- 10% ацетонитрил в 0,1% фосфорной кислоте (рН 2,2), раствор В- 50% ацетонитрила в 0,1% фосфорной кислоте (рН 2,2). Разделение проводили используя линейный градиент концентрации раствора В от 0 до 100% в течение 25мин. Скорость потока 1 мл/мин, температура колонки комнатная (20ºС), давление в стартовых условиях градиента не более 100 бар, детектирование пиков проводили при УФ 300 нм. Объем инъекции на колонку - 10 μl [3].
Таблица 3 - Количественный состав некоторых биологически активных веществ жидкого экстракта артишока колючего, установленный методом ВЭЖХ
|
№ |
Идентифицированные вещества |
Время удерживания, мин |
Площадь пика, mAU*s |
Содержание веществ,мкг/мл |
|
1 |
Хлорогеновая кислота |
7,452 |
66181,08 |
5119,32 |
|
2 |
Рибофлавин |
8,615 |
741,41 |
192,27 |
|
3 |
Кофейная кислота |
9,226 |
15647,42 |
344,26 |
|
4 |
Рутин |
10,228 |
559,15 |
81,21 |
|
5 |
Цинарозид |
11,112 |
24740,00 |
2843,97 |
|
6 |
Скутеларин |
12,108 |
2283,97 |
153,18 |
|
7 |
Салициловая кислота |
16,665 |
2598,46 |
303,91 |
|
8 |
Лютеолин |
16,750 |
444,22 |
22,43 |
|
9 |
Кверцетин |
17,111 |
381,11 |
31,57 |
|
10 |
Коричная кислота |
19,048 |
1887,93 |
55,09 |
Приготовление стандартных образцов проводили следующим образом; точную навеску стандартных образцов растворяли в соответствующем растворителе. Затем из равных объемов (200 мкл) исходных растворов готовили стандартную смесь. Для проверки или уточнения калибровки использовали стандартные растворы, полученные разведением исходных. Полученные результаты по определению основных БАВ приведены ниже (табл. 3 и рис. 1).
Таким образом, результаты количественного определения некоторых БАВ в жидком экстракте артишока колючего показали высокое содержание хлорогеновой кислоты (5119,32 мкг/мл), цинарозида (2843,97 мкг/мл) и кофейной кислоты (344,26 мкг/мл).
Также нами определены дубильные вещества методом перманганатометрии согласно ГФ (табл. 4).
Как видно из полученных данных, содержание дубильных веществ в жидком экстракте составило 2,36%.
Выводы. Таким образом, определены числовые показатели и установлено количественное содержание основных групп биологически активных веществ жидкого водно-спиртового экстракта артишока колючего ВЭЖХ и титриметрическим методами анализа. По результатам количественного определения основных действующих веществ методом ВЭЖХ в экстракте показали высокое содержание хлорогеновой кислоты (5119,32 мкг/мл), цинарозида (2843,97 мкг/мл) и кофейной кислоты (344,26 мкг/мл). Сумма дубильных веществ в пересчете на танин определенная перманганатометрическим методом составило 2,36%.
Литература
- Энциклопедия лекарственных растений: пер. /с испан., под ред. Жерара Шенюэ.- Испания: Ридерз Дайджест, 2004.- 351 с.
- High Performance Liquid Chromatography in Phytochemical Analysis /еdited by M.W. Hajnos, J. Sherma. - New York: Marcel Dekker, 2011. - 975 р.
- Государственная фармакопея СССР. Общие методы анализа. Лекарственное растительное сырье / МЗ СССР. - 11 изд. - М.: Медицина, 1990. - Вып. 2. – 398 с.