Нитрозирование и комплексообразование ряда флавоноидов и гидроксикоричных кислот с хлоридом алюминия

Введение. Определения суммы флавоноидов посредством комплексообразования с ионом алюминия является распространенным способом их оценки в ЛРС и фитопрепаратах. Стехиометрия комплексов с мультидентантнымилигандами различается для различных групп флавоноидов, положение максимумов полос поглощения и их интенсивность зависят от среды (кислой, нейтральной и основной) и от структуры содержащихся в ЛРС флавоноидов [1,2].Предприняты попытки на основе спектральных характеристик провести подразделение суммы флавоноидов на подгруппы после нитрозирования с последующим комплексо- образованиемс AlCl3[2, 3].

Цель исследования. Выяснение возможности раздельной оценки содержания конкретных групп флавоноидов спектрофотометрическим методом.

Материалы и методы.Стандартные образцы (СО): нарингенин, апигенин, лютеолин, кверцитин, дигидрокверцитин, рутин, морин, феруловая кислота, кофейная кислота. Реактивы: алюминия хлорид, натрия нитрит, натрия гидроксид, уксусная кислота, 96% этанол, диметилформамид.

Навески 5 мг СО растворяли в 1 мл ДМФА, добавляли 4 мл этанола (раствор А).

Нитрозирование:К 0,1 мл р-ра А добавляли 0,3 мл 5% р-ра NaNO2, затем добавляли 4,6 мл этанола.

Спектрофотометрия: Методика 1; К 0,1 мл р-ра А добавляли 5 мкл СН3СООН, 4,7 мл этанола и 0,2 мл 10% р-раА1С13. Методика 2; К 0,1 мл р-ра А добавляли 0,3 мл 5% р-раNaNO2 и 2,9 мл этанола, через 5 мин - 5 мклСН3СООН и 0,2 мл 10% р-раА1С13, затем - 1,5 мл 1М NaOH. В канале сравнения растворы СО заменяли на этанол.

Результаты и их обсуждение. В исследование включены флавоны - лютеолин, апигенин; флавонолы - морин, кверцетин и дигликозидкверцетина рутин; флаваноннарингенин; флаванонолдигидрокверцетин; гидроксикоричные кислоты - кофейная, феруловая. Результаты представлены в табл. 1.

Таблица 1 - Спектральная характеристика методов определения суммы флавоноидов

Вещество

^max, нм

/.,,,,,.после нитрозировани я, нм

Повышен ие А, раз

max

методика 1, нм

max

методик

а 2, нм

Сдвиг

^max, нм

Кверцетин

376

363

1,63

430

477

47

Рутин

368

357

3,25

409

531

122

 

267

268

1,38

     

Морин

393

364

1,40

423

-

-

 

266

268

1,24

     

Апигенин

342

348

4,02

389

389

0

 

269

269

2,49

     

Лютеолин

353

354

2,94

398

517

119

Дигидро-

329

341

2,21

413

507

94

кверцитин

290

291

1,41

     

Нарингенин

328

341

2,50

379

-

-

 

291

292

1,52

Кофейная

317

317

1,39 360 - -

кислота

289

287

1,41

Феруловая

314

314

1,34 338 - -

кислота

288

287

1,41

Вывод.Нитрозированиефлавоноидов и гидроксикоричных кислот приводит к увеличению интенсивности полос поглощения с небольшим батохромным сдвигом (для морина с гипсохромным сдвигом). Комплексообразование с хлоридом алюминия как непосредственно исследуемых образцов, так и их нитрозопроизводных, не является селективным для различных групп флавоноидов. Наиболее длинноволновые полосы поглощения (свыше 500 нм) наблюдаются для рутина (флавонол; но отсутствуют у кверцетина) лютеолина (флавон) и дигидрокверцитина (флаванонол).

Список литературы

  1. Fossen T. et al. Spectroscopic techniques applied to flavonoids //Flavonoids: chemistry, biochemistry and applications. - 2006. - С. 37-142.
  2. Pekal A. Evaluation of AluminiumComplexation Reaction for Flavonoid Content Assay / A. Pekal, K. Pyrzynska // Food Anal. Methods - 2014. - Т. 7 - № 9 - 1776-1782с.
  3. Mammen D. A critical evaluation on the reliability of two aluminum chloride chelation methods for quantification of flavonoids / D. Mammen, M. Daniel // Food Chem. - 2012. - Т. 135 - № 3 - 13651368с.
Год: 2016
Город: Шымкент
Категория: Медицина