АННОТАЦИЯ
При проведении первичного скрининга тритерпеновых гликозидов циклоартанового ряда на цитотоксичность Циклоорбикозид С, выделенный из надземной части растения Astragalus orbiculatus, показал наибольшую активность при подавлении клеток рака гортани. Таким образом, было выявлено, что Циклоорбикозид С представляет интерес для дальнейших углубленных исследований на противоопухолевую активность.
Ключевые слова: Astragalus orbiculatus, Циклоорбикозид С, циклоартановые тритерпеноиды, цитотоксичность, HeLa, HEp-2
Флора Узбекистана богата растениями, которые содержат фармакологически ценные метаболиты и к настоящему времени изучены и внедрены в практическое применение различные виды растений. Установлено, что растения рода Astragalus являются перспективными источниками биологически активных веществ. Астрагал содержит алкалоиды, флаваноиды, тритерпеновые сапонины, витамины С, А, микро- и макроэлементы. Среди природных соединений особое место занимают тритерпеноиды циклоартанового ряда, которые привлекают внимание химиков и фармакологов разнообразием структур, химической полифункциональностью, высокой
физиологической активностью и перспективными возможностями создания на их основе лекарственных средств. Источниками циклоартановых гликозидов являются растения рода Astragalus (Leguminosae). Этот род прдставлен 239 видами во флоре Узбекистана [1], а в мировой флоре - более 2000 видов. Astragalus orbiculatus Ledeb. (Leguminosae) - Род астрагал - самый крупный в семействе бобовых.
Это многолетнее растение в виде травы. Цветет и плодоносит в мае-июне в долинах рек, обычно на больших массивах. солончаковых почвах, в равнинно-пустынной и подгорно-равнинной области, реже в области предгорий. В Узбекистане растение встречается в Ферганской, Ташкентской, Самаркандской, Кашкадарьинской, Сурхандарьинской областях и Каракалпакстане.
По химической структуре циклоартановые метилстероиды Astragalus orbiculatus Ledeb. занимают особое место, так как только из данного вида растения выделены соединения циклоартанового ряда с эпоксидной связью в структурах (1-8)[2], ранее вещества с близкой структурой были выявлены в растениях рода Cimicifuga. Также впервые из растениий рода Astragalus изолированы и доказаны структуры соединений с ланостановым скелетом [2].
В лаборатории химии гликозидов ИХРВ АН РУзбекистан исследовано около 46 видов растения рода Astragalus, среди которых и Aorbiculatus.
Среди выделенных и установленных химических структур: генины - Циклоорбигенины А(1), Дигидроциклоорбигенин А(2), Циклоорбигенин(3), Циклоорбигенин В(4). Гликозиды -
Циклоорбикозиды А(5), В(6), С(7) и G(8). Основными гликозидами по содержанию в надземной части растения являются Циклоорбикозиды А и G. Циклоорбикозиды С и G являются бисдесмозидными гликозидами. Установлена химическая структура для соединений ланостанового ряда - Орбигенин и его ксилопиранозид - Орбикозид. Надземная часть растения Aorbiculatus в виде травы содержит в своем составе 12 соединений циклоартанового ряда, в корнях растения обнаружен только Циклоорбикозид А[3].
Циклоартановые соединения обладают широким спектром физиологической активности. Растения, содержащие циклоартановые тритерпеноиды и их гликозиды, широко применялись в традиционной медицине при различных заболеваниях. Отдельные представители рассматриваемого класса обладают гиполиподемическим [4], гипотензивным, диуритическим, противовоспалительным [5], седативным, анальгетическим, иммуностимулирующим, кардиотоническим действиями. Препараты на основе биологически активных веществ Astragalus sieversianus Pall. обладают гипохолестеринимической активностью, способствуя нормализации липидного обмена и улучшая сердечную деятельность [5].
Среди циклоартановых гликозидов растений рода Astragalus выявлены индукторы интерферона. Ряд соединений проявляет противовирусную и противоопухолевую активности. Множество работ посвящено антиатеросклеротическим и антихолестеринемическим свойствам циклоартанов, защищенных патентами. В Институте химии растительных веществ изучено действие циклосиверсиозида F из Apterocephalus на систему свёртывания крови, а также выявлена активность Циклоорбикозида G из Aorbiculatus на метаболические процессы в миокарде крыс [6].
Исследования гликозидов циклоартанового ряда продолжили, проверив на цитотоксическую активность. Из представленных гликозидов наибольшую цитотоксическую активность проявил гликозид - Циклоорбикозид С, изолированный из Astragalus orbiculatus, подавляющий в концентрациях 1-10 мкг/мл 31-53% клеток рака гортани.
Таблица - Ингибирующая активность гликозидов (Подавление роста клеток в процентах)
ТИП КЛЕТОК ГЛИКОЗИДЫ |
ПРОЦЕНТ ПОДАВЛЕНИЯ РОСТА КЛЕТОК, % |
|||||
HeLa |
НЕр-2 |
|||||
Концентрация веществ в мкг/мл |
||||||
100 |
10 |
1 |
100 |
10 |
1 |
|
Циклоалпиозид D |
10±0,01 |
0±0,07 |
0±0,02 |
19±0,03 |
15±0,09 |
8±0,03 |
Циклоалпиозид А |
38,5±0,7 |
2±0,02 |
0±0,02 |
37±0,5 |
25±1,7 |
24±4,2 |
Циклоарбикозид А |
87±2,3 |
8±0,07 |
1±0,01 |
90±11,3 |
11±0,2 |
7±0,9 |
Циклоалпиозид |
81,5±5,3 |
6±0,01 |
1±0,02 |
80,5±5,7 |
29±2,7 |
25±2,2 |
Циклоорбикозид С |
98±5,7 |
37±0,5 |
0±0,05 |
92±10,4 |
53±4,9 |
31±2,5 |
Cisplatin |
85±8,3 |
73±9,2 |
22±2,6 |
70±4,5 |
51±0,7 |
35±2,5 |
В этой связи данный гликозид представляет интерес для дальнейших исследований на противоопухолевую активность.
Материалы и методы
Для определения цитотоксической активности гликозидов были использованы верифицированные культуры раковых клеток карциномы шейки матки (HeLa) и гортани (НЕр-2), полученные из банка клеточных культур Института цитологии РАН. Первичный скрининг на цитотоксичность проводили методом МТТ-тестирования [7]. В качестве препарата сравнения использовали противоопухолевый препарат - «Cisplatin» (Индия) алкилирующего действия, производное платины-соль Пейроне - цис-дихлородиаминоплатина. В качестве контроля служили интактные клетки, в которые вносили только среду культивирования (см. табл.).
Таким образом, среди исследованных гликозидов циклоартанового ряда из растений рода Astragalus, наиболее перспективным оказался Циклоорбикозид С из A. orbiculatus, который рекомендован для дальнейших углубленных исследований на противоопухолевую активность.
ЛИТЕРАТУРА
- Коровин Е.П. Введенский А.И. Флора Узбекской ССР. 1955, том 3, с.502.
- Мамедова Р.П., Агзамова М.А., Исаев М.И. Тритерпеновые гликозиды Astragalus и их генины. LXY. Циклоартановые и ланостановые тритерпеноиды Astragalus orbiculatus. //ХПС, 2002. №4, С. 296-297.
- Исаев И.М., Мамедова Р.П., Агзамова М.А., Исаев М.И. Тритерпеновые гликозиды Astragalus и их генины. LXXY. Стерины и тритерпеноиды Astragalus orbiculatus. //ХПС, 2007. №3, С. 296-297.
- Муравьев И.А., Василенко Ю.К., Башаров А.А., Парфентьева Е.П., Скульте И.В. Гиполиподемические свойства препарата цимицелена, выделенного из Cimicifuga dahurica (Turcz.)Maxim.//Фармация. 1985, 4, C.38-41.
- Баженова Е.Д., Алиев Х.У. Султанов М.Б., К фармакологии новых сапонинов, выделенных из растений Средней Азии.// Фармакология природных соединений. 1979. Ташкент, 89-94.
- Царук А.В., Искендеров Д.А., Агзамова М.А., Хушбактова З.А., Сыров В.Н., Исаев М.И. Выделение и изучение вияния циклоартановых гликозидов циклоорбикозида G и циклосиверсиозида А на метаболические процессы в миокарде крыс. //Химико фармацевтический журнал. 2010.Т.44, №1, C.12-15. Москва.
- Mosmann Т.// J. Immunological Methods, USA, 1983 65, 69.