Видовая особенность накопления биологически активных соединений У Е.EQUISETINA

В казахстанской научной литературе имеется лишь несколько примеров углубленного изучения лекарственных растений с целью создания новых фармпрепаратов. Для организации производства отечественных препаратов Казахстан располагает достаточным синтетическим и природным ресурсом сырья.

В связи с этим практический интерес представляют работы по выявлению и пополнению сведений о химическом и биохимическом составе ценных технических растений флоры Казахстана в свете последних достижений биохимии, биоорганической химии и химии природных соединений.

С целью комплексного использования растительного сырья, нами исследован компонентный состав экстрактов из вегетативных побегов Е.equisetina с использованием  ГЖХ  с масс-селективным детектором (МСД).

Разделение на хроматографических колонках показало, что у образца из хребта Джунгарский Алатау, ущ. Теректы на хроматограмме идентифицируется 200 компонентов. Идентификация по мировой библиотеке химических  соединений показала наличие в них большого количества фенольных, гетероциклических соединений. В результате хроматографического анализа были идентифицированы следующие соединения (рисунок 1).

  Общая обзорная хроматограмма эстракта вегетативных побегов Е. equisetina (70% этанол)

Рисунок-1. Общая обзорная хроматограмма эстракта вегетативных побегов Е. equisetina (70% этанол)

Помимо этого в экстракте вегетативных побегов Е. equisetina были идентифицированы – эфедрина, псевдоэфедрина, метилэфедрина, d-allose, 2-butanone, 4- (4-hydroxyphenyl), benzenepropanol, 4-hydroxy-à-methyl (рисунок 2).

Общая хроматограмма эстракта вегетативных побегов Е. equisetina. 

Рисунок-2. Общая хроматограмма эстракта вегетативных побегов Е. equisetina.

Известно, что образование фенольных соединений одна из характерных особенностей растительной клетки. Изучение качественного состава фенольных соединений Е. equisetina с применением метода двумерной бумажной хроматографии и газожидкостной хроматографии в экстракте определены простейшие дифенол (пирокатехин) и трифенолы (пиррогаллол, флороглюцин) и оксикоричные спирты, которые является мономерами при образовании дубильных веществ, лигнина и меланина (рисунок 3). 

 Общая хроматограмма фенольных соединений из вегетативных побегов E.equisetina

Рисунок-3. Общая хроматограмма фенольных соединений из вегетативных побегов E.equisetina

Интересен факт идентификации цис- и транс-фенилакриловых кислот, возможно они вероятные предшественники фенилалкилпропановых соединений. По предположениям   японских   ученых      транс-фенилакриловая   кислота    является биосинтетической единицей при синтезе эфедриновых алкалоидов из фенилаланина.

Экспериментальная часть

При изучении химического состава определяли содержание полезных веществ в E.equisetina. Качественный состав экстрактов из E.equisetina определяли методом газовой хроматографии с использованием масс-селективного детектора (МСД). Для этого высушенные соцветия и стебли измельчали и экстрагировали горячим этанолом. Брали навеску 200-500мг, добавляли 5-10 мл этилового спирта, перемешивали. Затем встряхивали на шейкере 30-40 минут, обрабатывали 10-15 минут на ультразвуковой бане и центрифугировали.

Хроматографировали при следующих параметрах: Температура инжектора = 280 oС

Объем (нанесения) вкола - 1 мкл ,Сплит = 6:1 Температура интерфейса МСД = 300 oС

Поток газа-носителя (гелий) = 1,5 мл/мин, Режим: Constant flow Колонка: DB-5MS, 0.25мм*30м*0,25мкм фирмы Agilent Температурный режим термостата колонок:

7 oС/мин 80 oС -->320 oС (5 минут). Время анализа 39, 29 минут.

Поиск веществ осуществляется автоматически путем сравнивания спектра интегрированного пика хроматограммы образца с библиотечным спектром.

Использованное оборудование: Газовый хроматограф: Agilent 6890N и масс- селективный детектор: Agilent MSD 5973. Использованное программное обеспечение: Программа ChemStation©Agilent Technologies; Библиотека спектров: NIST Mass Spectral Database.

Таким образом, нами проведен качественный анализ состава биологически активных  соединений,    используя     электронную     библиотеку     (NASK)     масс      спектрометрических хроматограмм по программе CHEMSTION.

В результате этих работ идентифицированы ванилин, витамин Е, метилпарабен, фитол, гамма-ситостерол, Д-аллоза и монотерпен d-лимонен. также азотсодержащие, трициклическое и различнозамещенные фенольные соединения, всего 38, ранее описанных в литературе, но которые впервые  выявлены в  растениях рода Ephedra L..

 

 Литература

  1. Gao Li – hong, Liu Hong – lai, Chai Shui- hong, Coi Xifeng, Liu li-li, Wu Yu- //Yaoxue xueboa – Acta Pherue. Sin. – 2002. - Vol. 37, № 5. – С. 355-358.
  1. Pergamon Press Ltd. Printed in England Effect of amino acids on ephedrine production in Ephedra gerardiana callus cultures. //Phytochemistry. – 1979. - Vol. 18. – Р. 484-485.
  2. Иващенко А.А. Эфедра хвощевая в Таласском Алатау. //Тр. Ин-та ботаники АН КазССР. - 1973. - Т. III. - C. 151-166.
  3. Губанов И.А., Синицын Г.С. Биологические и экологические особенности эфедры хвощевой //В кн. Лекарственные растения Казахстана. - Алма-Ата: Наука Каз ССР, 1966. - Т. 22. - С. 21-32
  4. Taketo O., Masayuki M. and Setsuko S. Molecular Characterization of the Phenylalanine Ammonia-Lyase from Ephedra sinica. //Graduate School of Natural Science and Technology, Kanazawa University; Kakumamachi, Kanazawa. – 2008. – Р. 920-1192.
  5. Кожамжарова Л.С., Сарсенбаев К.Н., Барамысова Г.Т., Джиембаев Б.Ж. Морфологические и биохимические особенности популяций эфедры хвощевой, произрастающих в различных регионах Казахстана //Хим. ж. Казахстана. –2006. –№2. - C. 172-177
  1. Кожамжарова Л.С., Сарсенбаев К.Н., Барамысова Г.Т., Джиембаев Б.Ж. Эфедра Казахстана: морфологические и биохимические, экологические особенности//Исследование, разработка и применение высоких технологий  в промышленности: Сб. тр. Третьей междунар. научно-практ. конф. - Санкт- Петербург, 2007. – Т. 9. - С. 205.
  1. Барамысова Г.Т., Кожамжарова Л.С., Сарсенбаев К.Н., Жусупбекова Н.С. Особенности накопления биологически активных соединений в различных популяциях эфедры //Химия, Технология и Медицинские аспекты природных соединений: мат. II Междунар. научн. конф. – Алматы, 2007. – С. 223
Фамилия автора: Кожамжарова Л. С., Унербекова А. А., Тастанбеков Қ. Т.
Теги: Биология
Год: 2012
Город: Алматы
Яндекс.Метрика