Результаты скрининга показали важность двухэтапного исследования в целевых группах риска с целью выявления вирусного гепатита В и С.
По данным ВОЗ примерно треть населения планеты (2 миллиарда человек) имеют маркеры текущей или перенесенной инфекции вирусного гепатита В ( ВГВ). В мире вирусом гепатита С ( ВГС) инфицировано 170 млн. человек (около 3 % популяции), и ежегодно становятся инфицированными от 3 до 4 млн. человек [1,2,3]. Вирусные гепатиты остаются одной из актуальных проблем здравоохранения в мире, в том числе и в Казахстане. Республика Казахстан относится к региону с высокой эндемичностью распространения вирусных гепатитов. Ежегодно регистрируются от 13 до 30 тысяч больных. Для решения программы развития здравоохранения Республики Казахстан «Саламатты Қазақстан» на 2011 -2015 годы, проводится усиление профилактических мероприятий, скрининговых исследований, совершенствование диагностики, лечения и реабилитации основных социально значимых заболеваний и травм. Наиболее широко в диагностике ВГВ и ВГС используется определение НВsAg и AntiHCV методом иммунноферментного анализа ( ИФА)[4,5]. В неактивную фазу вирусного гепатита размножение вируса не происходит, вирус не выявляется в крови, и только современная вирусологическая диагностика методом ПЦР позволяет выявить заболевание на ранней стадии. ДНК-ВГВ (дезоксирибонуклеиновая кислота вируса гепатита В) и РНК-ВГС (рибонуклеиновая кислота вируса гепатита С) представляют собой фрагменты вирусных частиц[6,7].
Цель исследования: выявить распространенность ВГВ и ВГС среди целевых групп риска у взрослых по данным центра лабораторных технологии города Астаны методом твердофазного ИФА, и дальнейшая верификация методом ПЦР. Материалы и методы: С 01.01.12 года проводится скрининг целевых групп риска на маркеры вирусного гепатита В и С взрослого населения на базе центра лабораторных технологий (ЦЛТ) г. Астаны и представлены для обсуждения результаты исследовании за I квартал 2012 года. К целевым группам
злокачественными новообразованиями, находящихся на гемодиализе, имеющих в анамнезе оперативные вмешательства, переливание крови и ее компонентов, а также медицинских работников с повышенным риском инфицирования вирусными гепатитами В и С. Скрининг
проводится в 2 этапа. Первый этаписследование сыворотки на маркеры гепатита В и С методом твердофазового иммуноферментного анализа , второй этап включает в себя анализ на определение нуклеиновых кислот вируса гепатита В и С методом ПЦР. Материалом исследования явилась сыворотка крови. Проведено 2000 иммунологических исследований на наличие маркеров гепатитов В и С методом твердофазового ИФА с применением тест системы « ИммуноКомб-КДТ II HBsAg 90» и «ИммуноКомб-КДТ II Anti HCV» КАЗ-ДИА-ТЕСТ. а верификацию гепатитов В и С (выявленных 268 лиц) иммуноферментным анализом проводили методом ПЦР исследовании на амплификаторе СFX 96 Real-Time System. Использовали наборы реагентов «РеалБест ДНК/РНК ВГВ/ВГС», предназначенные для выявления ДНК/РНК вируса гепатита В и С.
относятся взрослые с заболеваниями крови,
Результаты исследования: Из 2000 иммунологических исследований маркеры гепатита В и С обнаружены в 268 случаях, что составило 13,4%, из них: маркер гепатита В обнаружен в 4,4%, а маркер гепатита С в 9% случаев (I-этап). Методом ПЦР исследовано 268 сывороток ( у лиц с наличием маркеров гепатита В и С), при этом выявлено ДНК-ВГВ и РНК-ВГС в 150 случаях, что составляет 56%(II-этап). Следовательно, в 118 случаях(44%) (у лиц с наличием маркеров гепатита В и С) не подтвердились методом ПЦР. Выявленные 150 случаев вирусных гепатитов В и С ПЦР методом распределились следующим образом: у 78 случаев обнаружнены ДНК-ВГВ, что составляет 29,1%, и у 72 случаев РНК-ВГС (26,9%). То есть произошло незначительное перераспределение ДНК-ВГВ, по сравнению с РНК-ВГС. Также отметим, что из 88 положительных маркеров HBsAg (то есть ВГВ) выявлено 78 образцов с ДНК-ВГВ, что составляет 88 %, а из 180 положительных маркеров AntiHCV выявлено 72 образца с РНК-ВГС, что составляет 40 % . Следовательно, маркеры HBsAg являются более специфичными , чем маркеры AntiHCV (таблица 1).
Таблица1. Показатели иммуноферментных исследовании ВГВ и ВГС в целевых группах риска взрослого населения г.Астаны
Группа риска (лица имеющ. в анамнезе |
Кол. иссл. на ИФА |
Кол-во выявленных на ИФА |
Кол. иссл. на ПЦР |
Кол-во выявленных на ПЦР |
||||
ВГВ + ВГС/ % |
ВГВ/ % |
ВГС/% |
ДНК-ВГВ, РНК-ВГС/ % |
ДНКВГВ/ % |
РНКВГС/ % |
|||
оперативн вмешател.. |
1063 |
146 / 13,7 |
54 / 5 |
92 / 8,7 |
146 |
89 / 61 |
54/ 37 |
35/ 24 |
Переливан крови(или ихкомпон). |
104 |
25/ 24 |
8 / 7,7 |
17 / 16,6 |
25 |
14 / 56 |
6 / 24 |
8 / 32 |
на гемо-диализе |
23 |
14 / 60,8 |
3 / 11 |
11 / 47,8 |
14 |
10 / 71,4 |
3 / 21,4 |
7 / 50 |
заболеван.крови |
8 |
5 / 62,5 |
3 / 37,5 |
2 / 25 |
5 |
3 / 60 |
2 / 40 |
1 / 20 |
злокачеств новообраз. |
204 |
21 / 10,3 |
2 / 1 |
19 / 9,3 |
21 |
16 / 76,2 |
5 / 23,8 |
11 / 52,4 |
Медицин. работники |
598 |
57 / 9,5 |
18 / 3 |
39 / 6,5 |
57 |
18 / 31,6 |
8 / 14,1 |
10/ 17,5 |
Всего |
2000 |
268/ 13,4 |
88 / 4,4 |
180/ 9 |
268 |
150 / 56 |
78/ 29,1 |
72/ 26,9 |
Анализ целевых групп методом ИФА исследования (1этап) показало, что наиболее часто подвержены инфицированию гепатитом В и С лица переливавшим кровь или их компоненты, находящимся на гемодиализе, и лица с заболеваниями крови, частота их инфицирования составило 24-62,5%% случаев. А у лиц имеющие в анамнезе оперативные вмешательства, злокачественные новообразования и медицинские работники частота инфицирования составило 9,5-13,7%% случаев.
Из таблицы видно, что распределение вирусного гепатита В и С в исследуемых группах неравномерно, при чем ВГС встречается в 2-3 раза чаще, по сравнению с ВГВ. А у лиц со злокачественным новообразованием ВГС в 9 раз чаще встречается , чем ВГВ. Из вышесказанного следует, что лицам переливавшим кровь или их компоненты, находящимся на гемодиализе, с заболеваниями крови чаще подвержены вирусным гепатитам В и С, а также выявлено перераспределение и увеличение ВГС, чем ВГВ.
Группы риска с наличием маркеров гепатита В и С исследовали методом ПЦР, при этом у исследуемых наличие ДНК-ВГВ, РНКВГС составило 56-76%% случаев, а у медицинских работников составило 31,6%. Оценивая результаты исследования РНК-ВГС среди групп выявили, что у лиц переливавшим кровь, находящимся на гемодиализе и со злокачественными новообразованиями частота инфицирования составило 3252,4%%, у лиц перенесших операцию, заболеваниями крови и медицинские работники частота инфицирования составило 17,524%%. Процент инфицирования ДНК-ВГВ у лиц перенесшие операции и заболеваниями крови составил 37-40%%, а у остальных групп 14,1-24%%. Таким образом, метод ПЦР выявлял ДНК-ВГВ и РНК-ВГС более 50% у исследуемых групп. РНК-ВГС чаще встречается у лиц переливавшим кровь, находящимся на гемодиализе и со злокачественными новообразованиями, а ДНК-ВГВ у лиц перенесшие операции и заболевания крови. Результаты полученных исследовании показали нам о целесообразности проведения в два этапа скрининга по выявлению вирусного гепатита В и С в целевых группах риска .
Список литературы
- Centers for Disease Control and Prevention. Guidelines for Viral Hepatitis Surveillance and Case Management. Atlanta, GA : 2005 2.Koziel MJ, Siddiqui A. Hepatitis B virus and hepatitis delta virus. In: Mandell GL , Bennet JE, Dolin R, Principles and Practice of Infectious Deseases.
- Perrillo RP, Aach RD. The clinical course and chronic sequelae of hepatitis B virus infection. Seminars in liver desease 1981;15-25
- Clinical and Laboratory Standards Institute. Protection of laboratory Workers from Occupationally Acquired Infections: Approved GuidelineThird edition. Wayne ,PA: Clinical and Laboratory Standards Institute; 2005
- Sehulster LM,Hollinger FB, Dreesman GR, immunological and biophysical Alteration of Hepatitis B virus Antygens by sodium Hypochlorite Disinfection, 1981, 42
- Гуморальный вирусспецифический иммунитет у пациентов с естественным течением хронического гепатита С/Л.И. Николаева//Гепатит С (Российский консенсус).2000,26-27 сентября.-С.106-108.
- Таточенко В. К., Озерецковский Н. А. и др., Иммунопрофилактика-2003. Справочник — 6-е изд. Москва, Серебряные нити, 2003. — 176 с.