Выделение вторичных метаболитов из растения астрагал Турчанинова

АННОТАЦиЯ

В продолжение исследований биологически активных веществ растений рода астрагал, произрастающих на Юге Казахстана, нами выделены два индивидуальных вещества из растения астрагала турчанинова. Методом тонкослойной хроматографии(ТСХ) предварительно было установлено наличие тритерпеновых соединений в надземной части растения. Веществом 1 по результатам сравнительного анализа данных спектров ЯМР ¹Н и ¹³С оказалось тритерпеноид олеананового ряда - олеаноловая кислота. Из надземной части растения также выделено соединение 4-(2,2,3-триметил-5-оксоциклопентилиден)-бутановая кислота.

Ключевые слова: Astragalus turczaninowii, экстракция, тритерпеноиды , фитохимия

Введение. В настоящее время лекарственные средства растительного происхождения находят широкое применение в медицине. Возрастающая популярность и эффективность во многом объясняется содержанием в них биологически активных веществ, которые воздействуют на организм человека комплексно, легко включаются в обменные процессы и практически не проявляют негативных побочных реакций при длительном применении. Поэтому научноисследовательские работы по выявлению перспективных для фармацевтической промышленности и медицины растений имеет большое практическое значение.

Одним из перспективных в качестве объектов научных исследований растений, которые с древнейших времен применяются в традиционной медицине востока, являются различные виды астрагалов. Астрагалы одно из уникальных растений, проявляющие лечебные свойства и издавна применяется в народной медицине как тонизирующие, мочегонные, сердечнососудистые, кровоостанавливающие средства. Исследования показали, что эти растения содержат различные биологические активные соединения как флаваноиды, тритерпеновые гликозиды, алкалоиды, полисахариды [1,2]. По литературным данным, произрастающие на территории Казахстана растения рода Астрагалы до сих пор остаются не до конца изученными.

Цель исследования: выделение индивидуальных биологически активных веществ (БАВ) из растения астрагал турчанинова, идентификация известных веществ и установление структуры новых соединений.

Методы и материалы. Объектами исследования послужили образцы сырья надземной части астрагала турчанинова (Astragalus turczaninowii), собранные в период с 2013 по 2014 гг., выращенные в Арыском районе, село Кожатогай, Южно-Казахстанской области, в научно - исследовательском объекте «Бактыолен» «Юго-Западного научно-исследовательского института животноводство и растениводства» РК. Заготовка растения производилась на территории Южного Казахстана. Образцы сырья были собраны фазе массового цветения растения в период с конца мая по июнь.

Для обнаружения основных групп биологически активных веществ в растительном сырье использовались пробирочные реакции: на флавоноиды, сапонины, дубильные вещества, гликозиды [3-5].

Для тонкослойной хроматографии использовали силикагель, содержащий 10% гипса, просеянный через сито с размером отверстий 0.05 мм и на пластинках Silufol, а для колоночной хроматографии - силикагель марки «КСК» с размером частиц 0.1 - 0.08 мм и 0.16 - 0.1 мм.

ИК-спектры снимали на Фурье-спектрометре «ИнфраЛЮМ ФТ-08» методом НПВО. ЯМР- спектры веществ сняты на спектрометре JNM-ECA 400 “Jeol” (Кокшетауский Государственный университет им. Ш.Уалиханова, Лаборатория инженерного профиля, г. Кокшетау) в дейтеропиридине при температуре 30^оС с тетраметилсиланом в качестве внутреннего эталона.

Тритерпеновые соединения обнаруживали на ТСХ 20%-ным метанольным раствором фосфорно-вольфрамовой кислоты с последующим нагреванием в сушильном шкафу при температуре 120^оС в течение 5-10 мин.

Результаты и обсуждение. Высушенная надземная часть массой 176,15 г экстрагировали бензолом на аппарате Сокслета. Получили 7,95 г бензольного экстракта (выход 4,5%).

Бензольный экстракт из надземной части Astragalus turczaninowii массой 7,95 г была помещена на колонку с силикагелем для проведения колоночной хроматографии. Элюировали системой 50:1 (хлороформ - метанол). Из начальных фракции-1 до кольца путём переосаждения получили вещество 1 тритерпеноидной природы. Анализ спектральных данных ЯМР ¹Н и ¹³С позволил сделать вывод, что вещество 1 является тритерпеноидом олеананового ряда - олеаноловой кислотой (С30Н48О3).

Дополнительно из бензольного экстракта надземной части Astragalus turczaninowii колоночной хроматографией при элюировании гексаном выделено вещество 2.

В протонном спектре вещества 2 проявляются высокоинтенсивные синглетные сигналы метильных групп (Н-6’, Н-7’, Н-8’) в области сильного поля (0,02 и 0,85 м.д.). Также в данной части спектра при 1,09-1,14 м.д. резонируют в виде дублета протоны СН₂-группы замещенного пятичленного цикла. Для метиновой группы указанного фрагмента характерно проявление триплетного сигнала при 2,26-2,29 м.д.

Триплетный сигнал с центром 4,04 м.д. отвечает протону sp²-ru6pugu3oeaHHoro атома углерода (Н-4). Для спектра ЯМР, снятого на ядрах ¹³С, свойственно проявление сигналов метильных групп в положениях 2’, 2’ и 3’ циклопентанового кольца в сильнопольной части (14,08, 22,68, 25,04 м.д.). Химические сдвиги сигналов метиленовых групп (С-2 и С-3) составляют 25,98 и 28,68 м.д.

В диапазоне 29,25-29,47 м.д. проявляются атомы углерода циклического фрагмента (С-1’, С2’, С-5’). Сигналы С-1 и С-5 под влиянием атома кислорода резонируют в слабом поле (173,98 и 64,38 м.д.). Сигналы с 34,43 и 31,92 м.д. отвечают атомам углерода C-1’ и С-4 в состоянии sp²- гибридизации.

Таким образом, на основании данных спектров ЯМР ¹Н и ¹³С для вещества 2 было установлено строение 4-(2,2,3-триметил-5-оксоциклопентилиден)-бутановая кислота.

Вывод. Из бензольного экстракта надземной части астрагала турчанинова выделены два соединения, строения которых были установлены на основании спектров ЯМР ¹Н и ¹³С.

ЛИТЕРАТУРА

1. Степашкина К.Т. Астрагал и его применение в клинической практике. Киев: Госмедиздат, 1959.
2. Мамедова Р. П., Исаев М. И. Тритерпеноиды растений Astragalus // Химия природ. соедин. - 2004. - С. 257-293.
3. Музычкина Р.А., Корулькин Д.Ю., Абилов Ж.А. Качественный и количественный анализ основных групп БАВ в лекарственном растительном сырье и фитопрепаратах. -Алматы, 2004. - 48с.
4. Биологический активные вещества лекарственных растений МЗ РСФСР./ В.П.Георгиевский (и др.) Новосибирск: Наука, 1999. - 333c.
5. Георгиевский, В. П. Биологически активные вещества лекарственных растений / В. П. Георгиевский, Н.Ф. Комиссаренко, С.Е. Дмитрук. - Новосибирск: Наука, 1990. - 144с.