Пиразол и его производные обладают широким спектром биологической активности. В настоящее время в медицине применяются целекоксиб и метамизол-натрия, обладающие противовоспалительным и болеутоляющим действием [1]. Кроме того, среди соединений, содержащих в своей структуре пиразольный цикл, найдены вещества с противомикробной (антибактериальной, противовирусной, антипротозойной и противогрибковой), противоопухолевой, противодиабетической и противопаркинсонической активностью [2]. Поэтому синтез новых производных пиразола, содержащих тиетановый цикл, и поиск среди них биологически активных веществ с целью создания на их основе новых лекарственных препаратов является актуальным.
На кафедре фармацевтической химии Башкирского государственного медицинского университета проводятся систематические исследования по изучению реакций азотсодержащих гетероциклов с 2- хлорметилтиираном и синтезу новых тиетанилазолов. В продолжение исследований нами были синтезированы новые тиетанилпиразолы, содержащие в положении 5-алкокси- или амино-группу, и изучены их антиагрегационная, антикоагуляционная и антиоксидантная активности в исследованиях in vitro.
Новые 5-алкокси- и 5-аминотиетанилпиразолы синтезированы в ходе реакции нуклеофильного замещения при взаимодействии 5-бромтиетанилпиразолов с алкоголятами натрия или аминами в спирте (Схема 1).
Схема 1
Оценку влияния синтезированных веществ на агрегацию тромбоцитов проводили по методу Born (Born G. G. V. Nature (London).-1962 .-V.194.) на агрегометре “АТ02” (НПФ "Медтех", Россия). В качестве индукторов агрегации использовали аденозиндифосфат (АДФ) и коллаген. В ходе исследования регистрировали максимальную амплитуду агрегации, скорость агрегации, время достижения максимальной амплитуды и дезагрегацию в присутствии изучаемых соединений при агрегации тромбоцитов, индуцированной АДФ. При коллаген-индуцированной агрегации тромбоцитов оценивали латентный период, во время которого происходит активация фосфолипазы С (что приводит к образованию вторичных посредников, вследствие чего развивается секреция тромбоцитарных гранул и синтез тромбоксана А2).
В ходе проведенных исследований установлено, что все тестируемые соединения обладают антиагрегационной активностью, степень выраженности которой у некоторых производных тиетанилпиразола превосходила значения, полученные для препаратов сравнения (пентоксифиллина и ацетилсалициловой кислоты).
Определение антикоагуляционной активности синтезированных соединений проводили с использованием клоттинговых тестов на оптическом двухканальном автоматизированном анализаторе свертывания крови АСКа 2-01-"Астра" (НПЦ ”Астра”, Россия). В ходе исследований определяли активированное парциальное тромбопластиновое время (АПТВ), протромбиновое время (ПВ) и концентрацию фибриногена по A. Clauss.
В результате проведенных исследований у тестируемых веществ выявлено наличие различной степени выраженности влияния на плазменный компонент системы гемостаза, проявляющееся изменением показателя внутреннего пути свертывания крови – АПТВ. Следует отметить отсутствие действия синтезированных тиетанилпиразолов на показатель концентрации фибриногена и ПВ.
Антиоксидантные свойства соединений оценивали в простых модельных системах, имитирующих наиболее распространенные реакции свободно-радикального окисления в организме и в средах, в которых инициировалось образование активных форм кислорода и реакции перекисного окисления липидов. Регистрацию свечения проводили на хемилюминомере «ХЛМ-003» (Россия). Антиоксидантная активность определялась по степени угнетения хемилюминесценции и пересчитывалась в процентах от контроля. В качестве препарата сравнения была выбрана аскорбиновая кислота. Для выявления активных форм кислорода использовали люминол (5-амино-2,3-дегидро-4-фталазиндион), который окисляется и образует электронно-возбужденные карбонильные хромофоры с высоким квантовым выходом, в результате чего резко повышается интенсивность свечения, связанного с образованием активных форм кислорода.
В ходе проведенных исследований установлено, что все тестируемые соединения обладают антиоксидантной активностью, степень выраженности которой у некоторых производных тиетанилпиразола превосходила значения, полученные для препарата сравнения (аскорбиновой кислоты).
На основании полученных результатов исследований in vitro можно заключить, что среди новые тиетанилпиразолов, содержащих в положении 5 алкокси- или амино-группу, найдены перспективные в плане создания на их основе новых лекарственных препаратов соединения, обладающие антиагрегационной, антикоагуляционной и антиоксидантной активностью.
Список литературы
1. Министерство здравоохранения РФ. URL: https://grls.rosminzdrav.ru/grls.aspx (Дата обращения 19.11.2020).
2. Synthesis and Pharmacological Activities of Pyrazole Derivatives: A Review.
Karrouchi K, Radi S, Ramli Y, et al. // Molecules. 2018. V 23, №1. P. 134.