Чертополох поникший (Carduus nutans L.) - многолетнее травянистое растение семейства Астровые (Asteraceae). Трава растения широко применяется в народной медицине как вяжущее, мочегонное, ранозаживляющее и противосудорожное средство. В русской народной медицине отвар травы чертополоха использовали как кровоостанавливающее средство, при нервных расстройствах, при гонорее, отвар соцветий и листьев применяли при золотухе. В народной медицине многих стран Запада и Востока отвар корней используют при лечении неврозов, бессонницы, эпилепсии. Аминокислоты и микроэлементы растений в комплексе с основными биологически активными соединениями также могут быть использованы для лечения и профилактики целого ряда заболеваний [1,2] .
Цель нашей работы - изучение аминокислотного и минерального состава травы чертополоха поникшего. Сырье - воздушно-сухая измельченная надземная часть растения, собранная в фазу массового цветения растения в июне-июле 2009 г. в Сайрамском районе Южно-Казахстанской области.
Экспериментальная часть. Для качественного исследования аминокислотного состава из сырья получали водное извлечение в соотношении 1:15. Для этого 1 г сырья заливали 15 мл воды, смесь нагревали на кипящей водяной бане в течение 20 мин в колбе с обратным холодильником. Извлечение охлаждали и процеживали через ватный тампон в колбу. Для проведения нингидриновой реакции к равному объему исследуемого водного извлечения добавляли свежеприготовленный 0,1 % водный раствор нингидрина, смесь осторожно нагревали, охлаждали, при охлаждении появлялось красно-фиолетовое окрашивание, что свидетельствовало о наличии аминокислот [3].
Другую часть водного извлечения упаривали в фарфоровой чашке на кипящей водяной бане до густого остатка, который растворялив небольшом объеме воды (5 мл) и наносили на хроматографическую бумагу в количестве 0,05 мл. Для хроматографического разделения аминокислот использовали восходящую хроматографию на бумаге Filtrak FN-4 в системе растворителей н-бутанол-уксусная кислота-вода (4:1:2). Стандартами служили растворы заменимых и незаменимых кислот в 0,1 н расторе хлороводородной кислоты. Для проявления аминокислот хроматограмму обрабатывали 0,1 % водным раствором нингидрина и прогревали в сушильном шкафу при температуре 100-105 °С в течение нескольких минут до появления красно-фиолетовых пятен. В листьях исследуемого растения обнаружено 11 аминокислот, в том числе 5 незаменимых (табл.1).
Таблица 1- АМИНОКИСЛОТЫ ТРАВЫ ЧЕРТОПОЛОХА ПОНИКШЕГО
Аминокислота |
Содержание, % |
Аргинин |
0,23 |
Аспарагиновая кислота |
0,15 |
Валин* |
0,1 |
Гистидин |
0,4 |
Глицин |
0,1 |
Глутаминовая кислота |
0,35 |
Лейцин* |
0,17 |
Изолейцин* |
0,09 |
Лизин* |
0,31 |
Серин |
0,3 |
Фенилаланин* |
0,09 |
Сумма аминокислот |
2,32 (0,79+1,53) |
* - незаменимые аминокислоты
Детальный количественный анализ содержания свободных и связанных аминокислот исследовали при помощи аминокислотного анализатора марки «Hitachi».
Общее содержание суммы аминокислот в траве чертополоха поникшего составило 2,32 %, из них доля незаменимых - 0,79 % (34,05 % от общего содержания), среди которых преобладал лизин (0,31 %). Процентное содержание заменимых аминокислот чуть больше (1,52 %) с преобладанием гистидина (0,4 %) и глутаминовой кислоты (0,35 %). Содержание минеральных элементов определяли методом эмиссионного спектрального анализа (табл.2).
Таблица 2 - СОДЕРЖАНИЕ МИНЕРАЛЬНЫХ ЭЛЕМЕНТОВ (В %) ЧЕРТОПОЛОХЕ ПОНИКШЕМ
Химический элемент |
Листья кузинии теневой |
Натрий |
0,2 |
Кальций |
0,9 |
Калий |
2,8 |
Цинк |
0,009 |
Марганец |
0,09 |
Фосфор |
0,3 |
Алюминий |
0,2 |
Кремний |
0,5 |
Железо |
0,08 |
Бор |
0,007 |
Никель |
0,0002 |
Магний |
0,68 |
Титан |
0,02 |
Медь |
0,003 |
Барий |
0,03 |
Селен |
0,0015 |
Определение проводили следующим образом: исследуемые пробы растительного сырья измельчали, сжигали в муфельной печи при температуре 450-500°С при доступе воздуха в течение 2 ч. Полученную золу после охлаждения в эксикаторе взвешивали на аналитических весах и анализировали на спектрографе ДФС-8-1 (Россия). Фотометрирование спектрограмм проводили с помощью атласа спектральных линий и спектров- стандартов с погрешностью не более 2% в пересчете на золу [4].
В результате использования вышеуказанной методики в исследуемом растительном сырье удалось определить количественное содержание 16 элементов. Трава чертополоха курчавого, кроме калия, магния, натрия, кальция содержат значительное количество фосфора, цинка, марганца и железа.
Результаты. В результате проведенного анализа аминокислотного состава в исследуемом сырье найдено 11 свободных аминокислот, из них 5 - незаменимых. Суммарное содержание свободных аминокислот в исследуемом виде составляет 2,32 %. Анализ минерального состава травы чертополоха курчавого показал наличие 16 минеральных элементов. Преобладающими являются калий, магний, натрий, кальций.
ЛИТЕРАТУРА
- Бендер К.И., Гоменюк Г.А., Фрейдман С.Л. Указатель по применению лекарственных растений в научной и народной медицине /Саратовский ун-т. - С., 1988. - С.84-92.
- Авцын А.П., Жаворонков А.А., Риш М.А., Строчкова Л.С. Микроэлементозы человека: этиология, классификация, органопатология. - М.: Медицина, 1991. - 496 с.
- Копытько Я.Ф., Костенникова З.П., Тимохина Е.А. // Фармация. - 1997. - №6. - С.31-34.
- Калинин С.А., Явнель А.А., Алексеева А.И. и др. Атлас спектральных линий для кварцевого спектрографа. - М., 1959. - 53 с.