Аннотация
В статье приводятся результаты морфолого-анатомического исследования растительного сбора. Новый растительный сбор разработан на основе местного сырья для лечения атеросклероза. Сбор включает: траву клевера лугового, траву хвоща полевого, траву череды трехраздельной, плоды шиповника и плоды боярышника. Установлены анатомо-диагностические признаки сбора, необходимые для его идентификации.
Ключевые слова: антисклеротический сбор, атеросклероз, лекарственные растения, микроскопический анализ, морфология.
Цель исследования. В настоящее время лекарственные средства растительного происхождения востребованы на фармацевтическом рынке, с каждым годом расширяются их ассортимент и перспективы использования их в медицинской практике.
Одним из наиболее распространенных заболеваний среди населения мира, в том числе и нашей республики, являются атеросклероз. Проблема атеросклероза (АС) является одной из самых актуальных в современной медицине в связи с его широкой распространенностью, продолжительностью латентного периода течения и выраженностью неблагоприятных исходов. Согласно, статистическим расчетам пропорция смертности в 1990 к 2020 году в мире от сердечно-сосудистых заболеваний (ССЗ), среди которых ведущее место занимает атеросклероз продолжает возрастать от 28 % до 31,5% [1, 2].
Выявление и изучение новых перспективных лекарственных растений отечественной флоры с целью создания на их основе эффективных, импортозамещающих лекарственных средств представляет актуальную проблему фармацевтической науки. В этом отношении актуальным является разработка антисклеротических лекарственных средств на основе местного сырья [3].
В настоящем сообщении приводятся результаты морфолого-анатомического исследования антисклеротического сбора, с целью выявления диагностических признаков, необходимых для их идентификации.
Исследования выполнены совместно с сотрудниками Ташкентского ботанического сада им. академика Ф. Н. Русанова института «Генофонда растительного и животного мира» Академии наук Республики Узбекистан в лаборатории «Анатомии и цитоэмбриологии».
Материалы и методы. Объектом исследования являлись серийные образцы растительного сбора, включающие сырьё местных лекарственных растений – траву клевера лугового, траву хвоща полевого, траву череды трехраздельной, плоды шиповника и плоды боярышника.
Материал собран ботанически достоверных растений в пределах их естественного ареала, руководствуясь Инструкциями по сбору и сушке лекарственных растений [4].
В соответствии с указаниями ГФ XІ подлинность сбора устанавливали на основании изучения внешних и анатомо-диагностических признаков.
На первом этапе был проведен анализ внешних признаков рекомендуемого антисклеротического сбора. С этой целью небольшое количество сбора раскладывали на глянцевой бумаге и внимательно рассматривали в различных ракурсах невооруженным глазом и под лупой с десятикратным увеличением.
Сбор представляет собой смесь неоднородных частиц (кусочков листьев, стеблей, цветков и плодов) от светло серо-зеленого, красно-фиолетового цвета с фиалетовыми и желтоватыми вкраплениями, проходящих сквозь сито с отверстиями диаметром 7 мм. Запах специфический. Вкус водного извлечения слегка пряный, кисло-вяжущий.
При изучении сбора под лупой были четко диагностированы отдельные компоненты сбора по специфическим видовым и групповым признакам.
Микроскопический анализ [5] проводили в соответствии со статьями «Методы анализа лекарственного растительного сырья», «Техника микроскопического и микрохимического исследования лекарственного растительного сырья» ГФ XI. Препараты, приготовленные ручным способом, окрашивали метиленовой синью последующим заклеиванием в глицерин-желатину [6].
Готовые препараты изучали под микроскопом Motic B1-220A-3. Объекты фиксировали цифровым фотоаппаратом Canon A123. Снимки обрабатывали на компьютере в программе «Photoshop CS5».
Трава клевера лугового. Цельное сырье. Стебель тонкий, приподнимающийся, густо покрытый отстоящими волосками (опушение более сильное в узлах), бороздчатый, олиственный. Прилистники широко ланцетные, на верхушке резко переходящие в тонкие острые, редко пушистые, бесцветные, с зеленоватыми жилками, густо разветвленными по краю. Листья на длинных черешках (у нижных 10-20 см дл.). Листочки 15-36 мм дл. и 9-28 мм шир., обратно яйцевидные или эллиптические, на верхушке округло - выемчатые, суженные к основанию, пушистые, по краю ресничатые, более густо опушенные с нижней стороны, почти цельнокрайние. Головки шаровидно-яйцевидные, 2,5-3,5 см шир., расположены обычно по 1 на конце стебля и боковых ветвях, на коротких цветоносах, у основания которых расположены два сросшиеся широкояйцевидных прилистника двух верхних сближенных листьев, обвертывающих у основания цветочную головку. Цветы сидячие на шаровидно-яйцевидном соцветии. Чашечка трубчато-колокольчатая, 7 мм дл., более-менее правильная, с 5 шиповидными зубцами (4 из них равные трубке чашечки; один зубец в два раза длиннее, около 7 мм дл.), опушенными отстоящими волосками. Венчик красно-розовый. Флаг 15 мм дл., 4 мм шир., с треугольно - лопатчатой пластинкой, выемкой на верхушке, с длинным ноготком, равным пластинке или длиннее ее. Крылья 3 мм дл., слегка превышают лодочку, которая на 1мм короче крыльев. Удалив чашечку можно увидеть, что лепестки основаниями полностью срослись друг с другом (тычиночной трубкой), и свободны только их отгибы. Бобы односемянные, эллиптические, или продолговатояйцевидные, 2,5-3 мм дл. Семена желтые или коричневые, гладкие, округлые, слегка выемчатые, 1,5-2 мм дл.
Измельченное сырье. При рассмотрении микропрепарата измельченных листа с поверхности должны быть видны клетки эпидермиса с прямыми стенками на верхней стороне листа и клетки эпидермиса с извилистыми стенками на нижней стороне листа. На обеих сторонах встречаются одноклеточные волоски, преобладающие на нижней стороне листа. У основания волосков четко выделяются 10 – 12 примыкающих клеток, образующих розетку. Устьица окружены 4 клетками (аномоцитного типа), редкие, преобладающие на нижней стороне листа. В мезофилле листа видны крупные жилки. Клетки эпидермиса чашечки цветка с обеих сторон слегка вытянуты. В клетках паренхимы содержатся многочисленные призматические кристаллы оксалата кальция, образующие кристаллоносную обкладку сосудов (рис. 1. а, б, в, г, е).
Трава хвоща полевого. Цельное сырье. Цельные и измельченные стебли длиной до 20-30 см, жесткие, членистые, бороздчатые, с 6 – 18 продольными ребрышками, почти от основания мутовчато-
ветвистые, с полыми междоузлиями и утолщениями в узлах.
Ветви неразветвленные, членистые, косо вверх направленные, 4–5-гранные, без полости. Влагалища стеблей цилиндрические, длиной 4-8 мм, с треугольно-ланцетными, темно-коричневыми, белоокаймленны- ми по краю зубцами, спаянными по 2-3. Влагалища веточек зеленые с 4-5 коричневатыми длинно оттянутыми зубчиками. При обрывании ветвей на стебле удерживаются только первые короткие членики. Цвет серовато-зеленый. Запах слабый. Вкус водного извлечения слегка кисловатый.
Измельченное сырье. При рассмотрении микропрепаратов должны быть видны: фрагменты ветвей, стеблей, влагалищ и зубцов, чаще в продольном и реже в поперечном сечении: клетки эпидермиса с сильно
удлиненными, прямыми или слегка извилистыми, утолщенными, пористыми стенками или с удлиненными, сильноизвилистыми, пористыми стенками; на коротких стенках (стыках) клеток эпидермиса, соответствующих гребням, видны выросты, с поверхности имеющие вид спаренных кружочков, при рассмотрении сбоку они закругленные или зубчатые с ясно выраженной перегородкой; поверхность большинства клеток с мелкими сосочковидными выростами; фрагменты эпидермиса со слегка погружен-ными устьицами,
имеющими характерную лучистую складчатость кутикулы; на некоторых кусочках устьица частично
разрушены или вместо них видны овальные отверстия; на кусочках ветвей продольного сечения, соответствующих наружной поверхности, видны эпидермис с зубчатыми и сосочковидными выростами и
устьица с лучистой складчатостью; на кусочках ветвей продольного сечения, соответствующих внутренней части, видна рыхлая сердцевина с клетками, содержащими хлорофилл, по краям видны зубчатые и мелкие сосочковидные выросты или выпуклые с лучистой складчатостью устьица; части влагалищ и зубцов с
центральной жилкой, над которой располагаются парами по всей длине жилки, устьица с лучистой
складчатостью; на верхушках зубцов иногда видны крупные устьица; на кусочках продольного сечения
стебля группы сосудов ксилемы с различным утолщением стенок (спиралевидным, кольчатым, сетчатым, реже пористым) (рис.2. а, б, в, г, д).
Трава череда трехраздельная. Цельное сырье. Цельные и частично измельченные олиственные стебли, листья и цветочные корзинки. Листья супротивные, на коротких, сросшихся основаниями черешках,
срединные 3-, 5-раздельные, с ланцетовидными пальчатыми долями, верхушечные цельные, широколанцетные, длиной до 15 см, край неровно- и крупнозубчатый. Стебли округлоовальные, продольнобороздчатые, толщиной до 0,8 см. Соцветия – корзинки диаметром 0,6 – 1,5 см. Наружные листочки обвертки в количестве 3 – 8, зеленые, удлиненно-ланцетовидные, коротко-заостренные, к основанию
суженные, по краям шиповидно-реснитчатые, равные или в 2 раза превышающие по размеру корзинку. Внутренние листочки обвертки более короткие, удлиненно-овальные, по
краю пленчатые, коричневато-желтые. Цветки мелкие, трубчатые. Цвет листьев зеленый или коричневатозеленый, стеблей – зеленый или зеленовато-фиолетовый, цветков – грязновато-желтый.
Измельченное сырье. При рассмотрении микропрепаратов должны быть видны фрагменты клеток эпидермиса листа с извилистыми стенками и аномоцитными устьицами; встречаются остатки гусеницеобразных и толстостенных волосков с крупной клеткой вытянутой формы у основания, иногда с коричневым содержимым внутри; фрагменты эпидермиса с секреторными ходами, заполненными коричневым содержимым; фрагменты пленчатого прицветного листа со слегка извилистыми и четковидноутолщенными клеточными стенками (простые поры); фрагменты стебля и черешка; фрагменты эпидермиса лепестков венчика трубчатых цветков со спиральными сосудами и вкраплениями шиповатой пыльцы округло-многогранной формы; фрагменты семянок и их остей с остатками одноклеточных, толстостенных волосков (рис.3. а, б, в, г, д, е).
4 5
Плоды шиповни ка Федченко. Цельное сырье. Цельные, очищенные от чашелистиков и плодоножек цинарродии разнообразной формы: от шаровидной, яйцевидной или овальной до сильно вытянутой веретеновидной; длина плодов – 0,7 - 3 см, диаметр 0,6 - 1,7 см. На верхушке плода имеется небольшое круглое отверстие или пятиугольная площадка. Плоды состоят из разросшегося мясистого, при созревании сочного цветоложа (гипантия) и заключенных в его полости многочисленных плодиков – орешков. Стенки высушенных плодов твердые, хрупкие, наружная поверхность блестящая, реже матовая, более или менее морщинистая. Внутри плоды обильно выстланы длинными, очень жесткими щетинистыми волосками. Орешки мелкие, продолговатые, со слабо выраженными гранями. Цвет плодов от оранжевокрасного до коричневато-красного, орешков – светло-желтый, иногда коричневатый. Запах отсутствует. Вкус водного извлечения кисловато-сладкий, слегка вяжущий.
Измельченное сырье. При рассмотрении микропрепарата измельченных плодов должны быть видны фрагменты наружного эпидермиса гипантия в виде светло-желтых пластов, состоящие из многоугольных клеток с прямыми, неодинаково утолщенными стенками («окончатый тип») и редко встречающимися устьицами; обрывки мякоти гипантия из тонкостенных паренхимных клеток, содержащие оранжевокрасные хромопласты и многочисленные друзы оксалата кальция, многочисленные крупные одноклеточные волоски (или их обломки) двух типов: очень крупные прямые с толстыми стенками и узкой полостью и мелкие извилистые с широкой полостью; обрывки проводящих пучков со спиральными сосудами. Кроме того, видны фрагменты околоплодника орешка, состоящие из групп или пластов, реже одиночных каменистых клеток с сильно утолщенными пористыми оболочками (рис. 4. а, б, в, г, д, е).
Плоды кроваво-красного боярышника. Цельное сырье. Плоды шаровидные или короткоэллипсоидальной формы, твердые, морщинистые, длиной 7 до 10 мм, шириной 7-9 мм, сверху с кольцевой оторочкой, образованной ссохшимися чашелистиками. В мякоти плода находятся 3 — 4 деревянистых косточек, имеющих неправильную треугольную, овалеьную или сжатую с боков форму. Поверхность косточек ямчато-морщинистая или бороздчатая по спинке. Цвет плодов от темно-красный (коричневатокрасный). Запах отсутствует. Вкус водного извлечения сладковатый.
Измельченное сырье. При рассмотрении микропрепаратов должны быть видны фрагменты эпидермиса плода, состоящего из 4-6-угольных клеток с равномерно утолщенными стенками и желто-коричневым содержимым; фрагменты ткани с каменистыми клетками и одиночные каменистые клетки; фрагменты волосков или целые волоски двух типов: одноклеточные, слегка извилистые, на концах заостренные, толстостенные и одноклеточные, со вздутиями, притупленные у верхушки и расширенные у основания, с тонкими стенками и коричневатым содержимым; фрагменты мякоти плода, состоящей из клеток, содержащих хромопласты оранжево-красного или коричневато-желтого цвета, мелкие друзы и призматические кристаллы оксалата кальция; встречаются одиночные друзы и призматические кристаллы оксалата кальция (рис. 5. а, б, в, д, е, ж).
Результаты и обсуждение. При морфолого-анатомическом исследовании сбора внешние признаки и все диагностически значимые анатомические признаки, присущие его компонентам, проявляются полностью.
Выводы. В результате проведенного исследования установлены анатомо-диагностические признаки сбора, необходимые для стандартизации местного антисклеротического сбора.
Литература
- World Health Organization. Prevention of Cardiovascular Disease. Guidelines for assessment and management of cardiovascular risk. Geneva, 2007. – 35 p.
- Всемирный атлас профилактики сердечно-сосудистых заболеваний и борьбы с ними. Под ред.: Mendis S, Puska P, Norrving B. Всемирная организация здравоохранения, Женева, 2013. – 155 p.
- Khalilova Sh.R., Turdikulova Z.R. Medicinal plants in therapy of atherosclerosis and its complications // The proceedings of the International Scientific and Practical Conference «Planta+. Science, practice and education». February 19, 2021 Kyiv. – Pp.262-266.
- Халилова Ш.Р., Урманова Ф.Ф., Холматов Х.Х., Шамсувалиева Л. Морфолого-анатомическое исследование клевера лугового (Trifolium pratense L.), произрастающего в Узбекистане // Фармацевтический журнал. - Ташкент, 2012. - №3.-С.53-56.
- Государственная фармакопея СССР: Вып.2. Общие методы анализа / МЗ СССР. – 11-е изд. – М.: Медицина, 1987. - 336 с.
- Барыкина Р.П., Веселова Т.Д. и др. Справочник по ботанической микротехнике (основы и методы). Москва: Изд. МГУ, 2004. – С.6-68.