Определение примесей в субстанции 3-циклогексиламинометилтиазоло[3,2-а]бензимидазола методом вэжх

Резюме

Синтезирована новая биологически активная субстанция. Для контроля технологических примесей в хлористоводородной соли 3-циклогексиламинометилтиазоло[3,2-а]бензимидазола наиболее актуальна высокоэффективная жидкостная хроматография. Анализ произведен в обращенно-фазовой системе с использованием сорбента Discovery и подвижной фазы: ацетонитрил - раствор фосфорной кислоты (6:4). Хроматографические исследования субстанции в виде основания и хлористоводородной соли проводили при аналитической длине волны 269 нм, которая установлена на основании изучения УФ спектров синтезированных соединений. При указанных условиях найдены времена удерживания: субстанции - 12 мин, идентифицированной примеси - 32 мин, не идентифицированных примесей – 16 мин и 4 мин. Разработанная методика может быть рекомендована для установления чистоты субстанции, определения ее состава и количества.

Ключевые слова: синтез, субстанция, тиазоло[3,2-а]бензимидазол, примеси, ВЭЖХ.

Поиску новых оригинальных отечественных лекарственных средств для лечения и профилактики различных заболеваний на данном этапе развития фармацевтической индустрии уделяется особое внимание. Производные тиазоло[3,2-а]бензимидазола - перспективные биологически активные соединения с широким спектром фармакологических свойств [1, 2].

Дигидрохлорид 3-циклогексиламинометилтиазоло[3,2-а]бензимидазола – новая биологически активная субстанция, проявляющая иммунотропные и антиагрегантные свойства [3]. Перспективность применения в медицинской практике новой биологически активной субстанции влечет за собой необходимость исследования контроля качества субстанции при ее производстве. В фармацевтических субстанциях примеси контролируются (исходные вещества, промежуточные продукты, продукты побочных реакций) в основном хроматографическими методами.

Синтез субстанции - дигидрохлорид 3-циклогексиламинометилтиазоло[3,2-а]бензимидазола является многостадийным. Исходным соединением служит 3-хлорметилтиазоло[3,2-а]бензими- дазол (рис. 1), который синтезирован в две стадии [4]. Далее при взаимодействии хлорметильного производного (1) с циклогексиламином получено основание субстанции (2). Хлористоводородную соль (3) субстанции получали обработкой соединения (2) сухим хлористым водородом в этилацетате. Наиболее вероятной технологической примесью в полученной субстанции может быть ключевое исходное соединение (1).

Цель настоящего исследования ― разработка методики определения примесей в биологически активной субстанции. Самым информативным и точным методом определения технологических примесей в фармацевтических субстанциях является метод высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ). В нашем исследовании предлагается метод ВЭЖХ в обращенно-фазовом варианте. Использованы колонки, заполненные сорбентом Discovery® С18. В качестве подвижной фазы применяли смесь ацетонитрила и раствора фосфорной кислоты. Скорость потока подвижной фазы – 1,0 мл/мин. Режим элюирования – изократический. Перед каждым анализом проб колонка промывалась элюентом в течение 20 мин. Метод детектирования - УФ-спектрофотометрический.

Хроматографические исследования субстанции в виде основания и хлористоводородной соли проводили при аналитической длине волны 269 нм, которая установлена на основании изучения УФ спектров синтезированных соединений (рис. 2). В качестве эталона сравнения возможной примеси использовали синтезированное нами соединение, структура и индивидуальность которого доказана с помощью ИК, масс-, ЯМР 1Н спектроскопии. По результатам хроматографирования в разных условиях оптимальным составом подвижной фазы установлена смесь ацетонитрила и 0,125% водного раствора фосфорной кислоты в объемном соотношении 6:4. На полученных хроматограммах анализируемых образцов (рис. 3) кроме пика 3- циклогексиламинометилтиазоло[3,2-а]бензимидазола (1) с абсолютным временем удерживания 12,7 мин и площадью около 100%, присутствует примесь – 3-хлорметилтиазоло[3,2- а]бензимидазола (3) с абсолютным временем удерживания 32,0 мин, площадью 0,25% и 0,044%. Также наблюдаются не идентифицированные пики посторонних примесей (2) с временами удерживания 4,8 мин, площадью 0,16% и 16,5 мин, площадью 0,013% которые могут быть отнесены уже к другим исходным или промежуточным продуктам синтеза.

36

Таким образом, предлагаемая методика для определения посторонних и родственных примесей в биологически активной субстанции после проведения валидации может быть рекомендована для определения чистоты субстанции, а также проведения качественного и количественного анаиза.

Литература

  1. Dawood, K.М., Recent advansces on the synthesis of azoles, azines and azepines fused to benimidazole / K. М. Dawood, N. M. Elwan, B. F. Abdel-Wahab. // Arkivoc. - 2011, (I), P. 111-195.
  2. Synthesis of New Thiazolo[3,2-a]benzimidazole Derivatives. Ahmad M. Farag and Hatem A. AbdelAziz ", Saarbrucken, Germany, LAP Lambert Academic Publishing, -2012, 200 р.
  3. Дианов В. М. Дигидрохлорид 3-циклогексиламинометилтиазоло[3,2-а]бензимидазола, проявляющий иммунотропную и антиагрегационную активность: пат. 2405788 Рос. Федерация / Дианов В. М., Сибиряк С. В., Алехин Е. К. - Заявл. 14.07.2009; опубл. 10.12.2010. Бюл. № 34.
  4. Синтез и иммунотропная активность производных тиазоло[3,2-а]бензимидазола / В. М. Дианов, С. В. Сибиряк, Ю. В. Строкин и др. // Химико-фармацевтический журнал. - 1991. - Т. 25, № 1. - С. 40-42.
Теги: Синтез
Год: 2021
Город: Шымкент
Категория: Медицина