Эпилепсия – расстройство, которое характеризуется не только предрасположенностью к судорогам, но также нейробиологическими, когнитивными, психологическими и социальными коморбидностями [1]. В настоящий момент от эпилепсии по всему миру страдает более 70 миллионов пациентов, что делает ее одним из наиболее распространенных неврологических расстройств [2]. Особое значение приобрели фармакорезистентные формы эпилепсии, с трудом поддающиеся (либо вообще не поддающиеся) классическим методам медикаментозной коррекции, принятым при терапии данного типа заболеваний [3]. В связи с этим актуальными являются исследования по разработке и исследованию экспериментальных моделей фармакорезистивных форм эпилепсии [4].
Целью работы была разработка новой экспериментальной модели фармакорезистентной эпилеписии.
Материалы и методы. Для создания модели использовали белых беспородных мышей-самцов, массой 17-20 г, полученных из вивария ОНМедУ. Все исследования проводили согласно национальным и международным рекомендациям по гуманному обращению с лабораторными животными. Для формирования стойкого судорожного синдрома использовали транскорнеальную электрическую стимуляцию проямоугольноимпульсным электростимулятором “Astro-Med / Grass Technologies S48” (Artisan Technology Group, USA). Параметры стимуляции: частота тока – 60 Гц, сила тока – 3 мА, продолжительность – 3 сек. Процедуру электростимуляции проводили дважды в день, с интервалом 4 часа, ежедневно, на протяжении 18 дней, до момента формирования стойких судорожных припадков интенсивностью 5 баллов. Оценка интенсивности судорожных припадков проводилась по следующим критериям: 0 баллов – отсутствие каких-либо судорожных проявлений и реакции замирания; 1 балл – миоклонические вздрагивания нижней челюсти; 2 балла – миоклонические вздрагивания конечностей и головы; 3 балла – клонические судороги передних конечностей, 4 балла – клонические судороги передних конечностей с подъемом на задние конечности и падением на бок; 5 баллов –генерализованные судороги с немедленной потерей равновесия и падением. Все животные, подвергавшиеся элекстростимуляции, были разделены на 2 равные группы. Первая группа животных получала карбамазепин в дозе 5 мг/кг, перорально, один раз в день, ежедневно, в течение всего периода электростимуляции. Вторая группа (контрольная) получала плацебо, режим и способ введения аналогичный карбамазепину.
После формирования киндлинга, все животные выдерживались в течении 48 часов без электростимуляции. Далее обеим группам животных вводился ламотриджин, однократно, перорально, в дозировке 30 мг/кг. После введения животные выдерживались 30 минут, а затем подвергались электростимуляции. Развивающиеся судороги оценивали по приведенной выше пяти бальной шкале.
Результаты и обсуждения. Предложенная авторами методика позволяла добиться стойкого судорожного синдрома на 15-18 сутки электростимуляции, интенсивность судорог у всех животных составляла 5 баллов. Было показано, что использованная доза карбамазепина (5 мг/кг) была недостаточной для развития противосудорожного эффекта, который мог бы повлиять на формирования киндлинга, но в тоже время способствовала фармакологически значимому индуцированию ферментов семейства цитохромов Р450. Для группы предварительно получавшей карбамазепин среднее значение судорог составило 4,22±0,3 балла, что недостоверно отличалось от значений интенсивности судорожного синдрома не подвергшегося фармакокоррекции ламотриджином. В тоже время интенсивность киндлинга в контрольной группе составила 3,5±0,25 балла, что было достоверно ниже интенсивности судорог без противосудорожного агента.
В основе механизма развития фармакорезистентной эпилепсии данной модели лежит индукция печеночных ферментов системы цитохромов Р450 под действием карбамазепина, что приводит к усилению печеночного метаболизма ряда противоэпилептических препаратов, в том числе, использованного в эксперименте, ламотриджина. Следует отметить, что использованный для валидации модели ламотриджин, является стандартным препаратом выбора в случае эпилептических расстройств, что делает модель адекватной в случае оценки реальных клинических ситуаций.
Выводы. Разработана новая модель фармакорезистентной єпилепсии у мышей.
Литература
- Mula, M, Cock, H.R. (2015) More than seizures: improving the lives of people with refractory epilepsy. Eur J Neurol, 22, 24–30
- Thijs, R. D., Surges, R., O'Brien, T. J., & Sander, J. W. (2019). Epilepsy in adults. The Lancet, 393(10172), 689-701
- Sharma, A. K., Rani, E., Waheed, A., & Rajput, S. K. (2015). Pharmacoresistant epilepsy: a current update on non- conventional pharmacological and non-pharmacological interventions. Journal of epilepsy research, 5(1), 1
- Löscher, W. (2017). The search for new screening models of pharmacoresistant epilepsy: is induction of acute seizures in epileptic rodents a suitable approach?. Neurochemical research, 42(7), 1926-1938.