Резюме
Определены некоторые валидационные параметры аналитической методики количественного определения суммы оксикоричных кислот в капсулах артишока колючего по следующим валидационным параметрам: точность, повторяемость, линейность, правильность, внутрилабора-торная воспроизводимость. Полученные результаты валидации свидетельствует о достоверности и объективности методики.
Ключевые слова: капсулы, сумма оксикоричных кислоты, точность, воспроизводимость, линейность, правильность, внутрилабораторная воспроизводимость.
Cynara scolymus L хорошо известное лекарственное растение эффективно используемое в лечении болезней печени, за счёт содержащихся в его экстрактах флавоноида лютеолина-7-О-глюкуронида и суммы оксикоричных кислот [1,3]. Биологическая активность экстрактов артишока колючего обусловлено содержанием в них большого количества разнообразных биологически активных соединений. Разработка новых методов анализа лекрственно-растительного сырья и препаратов на их основе, а также валдация разработанных аналитических методик весьма актуальна.
Валидация является обязательной и важной частью системы контроля качества в практике качественного производства лекарственных средств. Нормативные и методические документы в сфере GMP увязывают валидацию с критическими стадиями фармацевтического производства [2].
Целью исследования является определение некоторых валидационных параметров аналитических методик испытаний капсул на основе артишока колючего выращиваемого в Узбекистане.
Экспериментальная часть: Количественное определение проводили спектрофотометрическим методом. Проведены анализы определения повторяемости и точности применяемой методики. Также, определяли сроки хранения методом ускоренного хранения (табл. 1).
Таблица 1 - Результаты определения сроков хранения капсул на основе артишока колючего
|
Хранение (количество месяцев) |
Найденное количество суммы оксикоричных кислот, % |
|
Капсулы артишока колючего |
6,0 |
|
Через 23 дня |
5,99 |
|
Через 46 дней |
5,97 |
|
Через 92 дня |
5,96 |
|
Через 184 дня |
5,94 |
|
Метрологическая характеристика |
|
|
Среднее значение |
6,0 |
|
Стандартное отклонение |
0,0369 |
|
Относительная погрешность среднего результата |
0,76 |
Относительная погрешность методики - 0,76%. Полученное значение находятся в пределах допустимого и свидетельствуют о точности методики.
Линейность и диапазон применения рассчитали специфичный диапазон методики количественного определения оксикоричных кислот в объекте. Приготовлены испытуемые образцы с содержанием оксикоричных кислот в следующих концентрациях, % –80, 90, 100, 110 и 120 (табл. 2).
Таблица 2 - Линейная зависимость суммы оксикоричных кислот
|
Взятое количество порошка капсул, г |
Д |
Коэффициент корреляции |
|
0,0693 |
0,088 |
0,9968 |
|
0,0780 |
0,099 |
|
|
0,0867 |
0,111 |
|
|
0,0953 |
0,122 |
|
|
0,1040 |
0,133 |
В результате изучения линейности использованной методики, был выявлен линейный диапазон для суммы оксикоричных кислот, который является в пределах концентраций от 80 до 120%. Правильность аналитической методики определяет степень близости между известным истинным значением или принятой справочной величиной и значением, полученным по данной методике. Для определения правильности метода, были приготовлены растворы из капсул, содержащие сумму оксикоричных кислот в концентрации 80, 100 и 120% (табл. 3).
Таблица 3- Определение правильности метода
|
№ |
Содержание суммы оксикоричных кислот, г |
Найденное количество суммы оксикоричных кислот, мг |
Регенерация |
|
1 |
0,0216 |
21,5 |
99,5 |
|
2 |
0,0214 |
21,3 |
99,5 |
|
3 |
0,0218 |
21,9 |
100,4 |
|
4 |
0,0272 |
27,2 |
100,0 |
|
5 |
0,0269 |
27,1 |
100,7 |
|
6 |
0,0270 |
26,8 |
99,2 |
|
7 |
0,0322 |
32,2 |
100 |
|
8 |
0,0324 |
32,2 |
99,3 |
|
9 |
0,0325 |
32,3 |
99,4 |
|
10 |
Средний процент регенерации |
99,7 |
|
Из результатов таблицы видно, средний процент регенерации составляет 99,7%, что свидетельствует об удовлетворительной точности методики.
Для определения внутрилабораторной воспроизводимости в одной лаборатории в течение двух дней два разных химика аналитика готовили в одинаковых условиях 6 испытуемых растворов из капсул с содержанием оксикоричных кислот. Каждый раствор готовился независимо от другого раствора, сумму оксикоричных кислот определяли СФ методом (табл. 4).
Таблица 4 - Содержание суммы оксикоричных кислот капсул, мг
|
Номер пробы |
1 |
2 |
3 |
4 |
5 |
6 |
S |
F |
F (95%,5,5) |
|
Аналитик 1 |
27,1 |
27,4 |
27,0 |
27,5 |
27,1 |
26,9 |
0,2338 |
1,18 |
5,05 |
|
Аналитик 2 |
26,8 |
27.0 |
26,7 |
27,1 |
27,3 |
26,9 |
0,2147 |
58 |
Стандартные отклонения у двух химиков аналитиков статистически эквивалентны (F≤F(95% 5,5), что говорит о воспроизводимости методики.
Выводы. Определены некоторые валидационные параметры аналитической методики количественного определения суммы оксикоричных кислот в капсулах артишока колючего по следующим валидационным параметрам: точность, повторяемость, линейность, правильность, внутрилабораторная воспроизводимость. Выявленный линейный диапазон для суммы оксикоричных кислот в пределах концентраций от 80 до 120%, средний процент регенерации составил 99,7%, стандартные отклонения у двух химиков аналитиков статистически эквивалентны. Данные свидетельствует об удовлетворительной точности и воспроизводимости методики.
Литература
- Pereira C, Barros L, Carvalho AM, Santos-Buelga C, Ferreira IC. Infusions of artichoke and milk thistle represent a good source of phenolic acids and flavonoids.// Food Funct., 2015. – vol. 6, N 1. – pp. 56-62.
- Валидация аналитических методик для производителей лекарств. ВЭЖХ, ТСХ, титрования и ГЖХ. Типовое руководство предприятия по производству лекарственных средств. /Под ред. В.В.Береговых.- М.: Литера, 2008.132 с.
- Абдуллина С.Г., Агапова Н.М., Хазиев Р.Ш. Валидация методики определения содержания органических кислот в препарате «Холосас» //Фармация.- М., 2009.- №8.- С.28-30.