Влияние фитопрепарата корня солодки надезинтоксикационную функции гепатоцитов

Введение; Введение водной суспензии желтого фосфора приводит к повышению активности АЛТ, АСТ, ЛАП и депрессии функций монооксигеназной системы гепатоцитов.[ Жакипбекова Г.С.2013]

.Для оценки функционального состояния монооксигеназной системы под влиянием фитопрепарата корня солодки на фоне ОФИ изучали интегральный показатель активности МОС гепатоцитов - гексеналовую пробу.

В механизме ингибирования монооксигеназ печени важная роль принадлежит активации свободнорадикальных процессов [Орманов Н.Ж. 1992], приводящих в частности к деструкции эндоплазматического ретикулума, с которым структурно-функционально связана эта ферментная система, а также структура самих ферментов.

Учитывая антирадикальные, антиоксидантные свойства фитопрепарата корня солодки при фосфорной интоксикации и активизирующее действие глицирризиновой кислоты на ферменты микросом печени крыс [Жакипбекова Г.С. 2015-2018] была предпринята попытка, изучить его влияние на скорость восстановления нарушенной функции монооксигеназной системы микросом печени при ОФИ. Выше было сказано, что ОФИ сопровождается не только активацией свободнорадикального процесса, но и депрессией МОС микросом гепатоцитов, что согласуется с данными Орманова Н.Ж. [1989].

Методика исследования: Для оценки функционального состояния монооксигеназной системы под влиянием фитопрепарата корня солодки на фоне ОФИ изучали активности N-деметилазы, скорость р-гидроксилирования анилина и содержания цитохрома Р450 и в5.

В надосадочной жидкости определяли активности N-деметилазы амидопирина по методу П.Попова. О скорости N-деметилирования амидопирина судили по количеству образовавшегося формальдегида.

Скорость р-гидроксилирования анилина определялась по количеству образовавшегося п- аминофенола.

Определение содержания цитохрома Р450 и в5 производили на регистрирующем спектрофотометре Specorduv-vis М-40 (ГДР) по методу OmuraT., SatoR. Дифференциальный спектр опытного образца цитохрома Р450 записывали после пропускания через него окиси углерода и последующего восстановления добавлением дитионита. Содержание цитохрома Р450 расчитывали по разнице абсорбции между 450 и 490нм с использованием коэффициента молярной экстинции91мм^-1 см^-1 и выражали в нмоль/мг в относительном весе печени. Во всех исследованиях концентрация белка определялась методом О.Н. Lowry[328].

Результаты исследования:Исходя из результатов собственных исследований видно что, введение фитопрепарата корня солодки в дозе 30 мг/кг массы в течение 13 дней существенно сокращает время гексеналового сна опытных животных. При 3-х дневном назначении на 13%, а после 6-и дневного введения отмечено наибольшее укорочение времени гексеналового сна, что составляло 38,81,1мин, по сравнению с животными с ОФИ 68,33,4 мин. Данный показатель после 13-ти дневного введения препарата уменьшился на 10,6%, по сравнению с опытными данными и достигал уровня интактных животных.

Поражение печени при воздействии различных промышленных токсикантов часто сопровождается подавлением активности цитохрома Р450 - показателя монооксигеназной системы [Орманова Н.Ж.1999: Шарманова Т.Ш,1999], участвующей в метаболизме как эндогенных субстратов (стероидных гормонов, желчных и жирных кислот), так и чужеродных ксенобиотиков, в том числе лекарственных препаратов [Орманова Н.Ж.1999].

Для подтверждения полученных данных в микросомах определяли содержание цитохромов Р450 и в5 и активность некоторых экзимов в них (таблица-1).

Содержание цитохрома Р450 в микросомах гепатоцитов при введении фитопрепарата в дозе 30 мг/кг массы повышалось на 7-ые и 14-е сутки исследования. После 6-ти дневного назначения препарата, уровень цитохрома составлял 0,430,02 нм/мг белка, против опытных групп 0,310,008 нм/мг белка. Рост составил 38% (P<0,001). При введении фитопрепарата в течение 13-ти дней обнаруживается достоверное увеличение количественного содержания цитохрома Р450 на 9% по сравнению с нелеченными животными. Существенное изменение содержания цитохрома в5 отмечено только после 13-ти дневного введения препарата, когда повышенный уровень снизился на 29% (Р<0,001) и достиг величин интактных животных.

Таблица 1 - Влияние фитопрепарата корня солодкив дозе 30мг/кг массы на некоторые показатели микросомального окисления печени крыс при ОФИ

Способность фитопрепарата корня солодки в дозе 30мг/кг массы ускорять восстанавление сниженной функций МОС гепатоцитов при поражении печени желтым фосфором проявилось в условиях целого организма. Об этом свидетельствует повышение -демитилазной и р-гидролазной активности МОС гепатоцитов. Увеличение активности -демитилаз и р-гидролазы происходит после 6-ти дневного введения препарата. Наиболее выраженное повышение функциональной активности энзимовотмечено на 7-е сутки исследования, при этом -демитилирование и р-гидроксилирование субстратов усилилось на 20% и 50% по сравнению с ОФИ и приближается к уровню интактных животных. После 13-дневного введения фитопрепарата данные приближаются к интактным данным.

Таким образом, фитопрепарат корня солодки в дозе 30мг/кг массы оказывает гепатопротекторное действие, которое прежде всего обусловлено антирадикальными, антиоксидантными свойствами и является одним из индукторов МОС гепатоцитов на фоне ОФИ. Однако, не смотря на длительность приема препарата в дозе 30мг/кг массы в течение 13-ти дней, полностью еще не нормализовало состояние системы ПОЛ–АОС в клетках печени.

Литература

1. .Жакипбекова Г.С., Орманов Н.Ж. Влияние фитопрепарата из корня солодки на функциональное состояние гепатоцитов при воздействии желтого фосфора //Труды научной конференции «История и современность» ЮКГУ им. М. Ауезова Шымкент 2000г. С.335-338.
2. .Жакипбекова Г.С.,Орманов Н.Ж.Фитокоррекции окислительного гемостаза при воздествии фосфора и свинца- Шымкент,2019г. с.157
3. . Попов Н. Определение на пирамидовата N-деметилаза в черния зроб на ольхове // Экспер. мед. –1973. – Т.12.– №3. – С. 130-135.
4. .Nash T. The colorimetric estimation of formoldehyde by means of the Hantach reaction // Biochem. S. – 1957. –V.55, – P.416-421.
5. .Арчаков А.И., Девиченский В.М., Карузина И.И. Влияние концентрации буфера на скорость реакции транспорта электронов в микросомах печени // Биохимия. –1986. – Т.33. – вып.3. – С. 479-487.
6. .Omura T., Sato R. The carbon monooxide binding pigment of liver microsomes J. Eviclence for its hemoprotein narure // S. Biol. Chem. –1964. –V.239. – №7. – P.2370-2378.
7. .Lowry О.Н., Rosebrough N. J., Farr A.L., Randall R.S.Рrotein measurement with the folin phenol. readent //Bioll. Chem. –1951. –V.193. – №1. – P.265-275.