Резюме
Хлорамфеникол является антибиотиком широкого спектра действия, обладающим высокой активностью в отношении группы кишечных бактерий. Совершенствование аналитических методов исследований хлорамфеникола является одной из наиболее актуальных задач, стоящих перед фармацевтами. В результате проведенных исследований методом Рамановской спектроскопии разработан метод определения хлорамфеникола в мягкой лекарственной форме.
Ключевые слова: Рамановская спектроскопия, хлорамфеникол, синтамицин, линимент, колебаниe
Хлорамфеникол (синтамицин) (ХФ) - антибиотик широкого спектра действия, активный против грамположительных и грамотрицательных бактерий, который был выделен из Streptomyces venezuelae в 1947 году. Его структура была выяснена в 1949 году, и он стал первым антибиотиком, который был синтезирован химическими методами [1]. Известно, среди ряда веществ, которые могут контаминировать продовольственное сырье и пищевые продукты, важное место занимают ветеринарные препараты, используемые как для лечения, так и в качестве стимуляторов роста животных. Наиболее сильнодействующими лекарственными препаратами, используемыми в ветеринарной практике, являются антибиотики. Кроме того, наличие этих антибиотиков может затруднить бактериологические исследования качества продуктов животного происхождения.
В настоящее время для определения ХФ используются ряд методов анализа, такие как спектрофотометрический, высокоэффективная жидкостная хроматография [2-3], объемные и микробиологические методы.
Существующие методы анализа недостаточно специфичны и воспроизводимы, а также не дают возможность обнаружить остаток ХФ. При производстве лекарственных препаратов важно использование методик анализа, которые отличаются своей экспрессивностью и воспроизводимостью. Применение таких методов анализа для определения остатков ХФ в пищевых продуктах животного происхождения обеспечит безопасность потребителей [4]. На сегодняшний день ХФ применяются в виде линимента синтамицина, при гнойных ранах и ожогах, копытной гнили у овец.
Цель исследования. Использование Рамановской спектроскопии для определения ХФ в линименте синтамицина и внедрение его в практику контрольно-аналитических лаборатории фармацевтического производства.
Материалы и методы исследования. В качестве объектов анализа были выбраны линимент синтамицина, которого активным фармацевтическим ингредиентом является хлорамфениколом, и его стандартный образец.
Анализы проводились на приборе Рамановского спектрометра фирмы "Enhanced Spectroscopy", марки"R-532". Параметры прибора: спектральный диапазон от 100 до 6000 см-1, спектральное разрешение 5-8 см-1, входная щель 20-30 мкм, голографическая дифракционная решетка 1800 линий/мм, а также одномодовый лазер мощностью 30 МВт с длиной волны 532 нм.
Результаты и их обсуждение. Были проведены анализа линимента синтамицина, стандартного образца ХФ, а также основы линимента - масло касторового. В результате проведенных работ были получены спектры комбинационного рассеяния света исследуемых образцов, которые представлены на рисунках 1-3. Из рисунка 1 видно, характерные пики хлорамфеникола расположены на 1105, 1346, 1597 см-1 в спектре комбинационного рассеяния. Наличие связи ν C-N может быть продемонстрировано колебаниями при относительно высоких интенсивностях на 1105 см-1. Видно, что ν-NO2 sym находится на уровне 1346 см-1, а ν -С(О)NH- функциональная группа на уровне 1598 см-1.
Кроме того, также можно видеть, в Рамановском спектре соединения отметили полосу комбинационного рассеяния при 1683 см-1 характерную для ν С=О связи. Бензольный фрагмент представлен полосами деформационных колебаний С-Н связи при 1244 см-1 и валентных колебаний при 3003 см-1. Рамановская полоса при 754 см-1 подтвердилось наличием валентных колебаний связи ν C-Cl, а в области 843 см-1на уровне связи ν N-O.
Мягкие лекарственные формы были проанализированы с помощью спектроскопии комбинационного рассеяния. Результаты исследований показали, что в спектрах Рамана образца препарата линимента синтамицина интенсивность валентных колебаний рассеяния света С-O- карбонильной и амидной групп значительно уменьшилась [4]. При этом колебания высокочастотных длин волн на уровне 3000 см-1 не обнаружены.
Вывод: Впервые с помощью Рамановской спектроскопии были проанализированы мягкие лекарственные формы. Получен и проанализирован спектр комбинационного рассеяния линимента синтамицина, согласно которому характерные пики соответствуют функциональным группам в структуре хлорамфеникола. Данное исследование показывает, что Pамановский спектр линимента аналогичен стандартному образцу.
Литература
- Emilio Meaurio, Eva Sanchez-Rexach, Amaia Butron, Jose-Ramon Sarasua. The conformation of chloramphenicol in the ordered and disordered phases// Spectrochimica Acta Part A: Molecular and Biomolecular Spectroscopy 211 (2019). -383–392 p. www.elsevier.com/locate/saa.
- ГУ НИИ питания РАМН (В.А.Тутельян, С.А.Хотимченко, С.А. Шевелева, В.К. Кирничная, Т.В.Киселева, Н.Г.Орлова, Н.Р.Ефимочкина, Н.В.Барбер), Московским государственным университетом им. М.В.Ломоносова (А.М.Егоров, А.Ю.Колосова, Ж.В.Самсонова). МУК 4.1.191204 Определение остаточных количеств левомицетина (Хлорамфеникола, Хлормецитина) в продуктах животного происхождения методом высокоэффективной жидкостной хроматографии и иммуноферментного анализа. Дата введения 2004-05-01.
- Т.С.Уланова, Т.Д. Карнажицкая, Е.О. Пшеничникова, Э.А. Нахиева. Pазработка методики определения хлорамфеникола в мясных продуктах// Анализ риска здоровью. № 4. 2013 г. с. 82-90
- Wei Ji, Weirong Yao. Rapid surface enhanced Raman scattering detection method for chloramphenicol residues// Spectrochimica Acta Part A: Molecular and Biomolecular Spectroscopy 144 (2015). -125–130 p. www.elsevier.com/locate/saa.