Актуальность. Безопасность сахароснижающей терапии у пациентов с сахарным диабетом (СД) 2 типа является одной из наиболее широко обсуждаемых проблем современной диабетологии. Хронические состояния при СД 2 типа, такие как нарушения функции почек и печени, сердечно-сосудистые осложнения могут значительно ограничить возможность назначения ряда сахароснижающих препаратов. Особенно это касается вопроса о сердечно-сосудистой безопасности диабетиков, поскольку большинство из них уже имеют данную патологию.
В последнее время антидиабетические препараты ингибиторы дипептидилпептидазы 4-го типа (ДПП-4) приобрели определенный авторитет в качестве препаратов второго уровня для подавляющего числа пациентов с СД 2 типа или при ограничениях применения препаратов первой линии (производные сульфонилмочевины и диметилбигуанида) из-за побочных эффектов. К таким препаратам относятся: алоглиптин (несина), линаглиптин (тражента), саксаглиптин (онглиза) и ситаглиптин (янувия) [2, 4, 7].
Саксаглиптин – современный мощный и эффективный ингибитор ДПП-4, применяемый в качестве монотерапии, двойной или тройной комбинации с другими сахароснижающими препаратами [1, 3, 6]. Вместе с тем, согласно данным сайтов FDA и patientsville.com в период 2010-2017 гг. во многих странах зарегистрирован ряд случаев отравлений ингибиторами ДПП-4, в том числе и саксаглиптином [5]. Среди основных причин острых отравлений отмечают побочные действия саксаглиптина при лечении в терапевтических дозах. Летальные отравления саксаглиптином прежде всего обусловлены случайной или суицидальной передозировкой в комбинации с другими пероральными сахароснижающими препаратами.
Цельработы. Изучить особенности хроматографического поведения саксаглиптина в условиях ТСХ-скрининга лекарственных средств при отравлении неизвестным веществом.
Материалы и методы. Исследование проводили на хроматографических пластинках Merck silica gel 60 F254 (Германия), рекомендованные для судебно-токсикологических исследований Международной ассоциацией судебных токсикологов TIAFT, и пластинках Sorbfil ПТСХ-ІІ-В (РФ), которые обычно применяют в подобных случаях в странах СНГ, размером 10х10 см. Перед элюированием образцов хроматографические пластинки предварительно отмывали метанолом и активировали при температуре 110-120 °С в течение 0,5 часа.
В качестве подвижных фаз использовали следующие системы растворителей: 1) метанол- 25 % раствор аммиака (100:1,5); 2) хлороформ-метанол (90:10); 3) ацетон; 4) метанол; 5) метанол-н-бутанол (60 : 40); 6) хлороформ-этанол (90:10); 7) хлороформ-циклогексан-уксусная кислота (40:40:20); 8) этилацетат- метанол-25% раствор аммиака (85: 10: 5); 9) хлороформ-ацетон (80: 20); 10) этилацетат [8, 9].
Для подтверждения пригодности используемых хроматографических систем исследования проводили в присутствии кофеина. Для визуализации зон адсорбции саксаглиптина в тонком слое использовали реактив Драгендорфа в модификации Мунье, а для идентификации кофеина – последовательную обработку тонкого слоя реактивом Драгендорфа и серной кислотой.
Перед элюированием стандартную хроматографическую камеру предварительно насыщали парами соответствующих элюентов в течение 1 часа. На линию старта предварительно активированной хроматографической пластинки стеклянным капилляром наносили по 5 мкл (5 мкг) исследуемых растворов саксаглиптина и кофеина. Пластинку помещали в камеру с соответствующей смесью растворителей и элюировали. Когда фронт растворителей проходил 10 см от линии старта, пластинку вынимали из камеры, высушивали на воздухе, просматривают в УФ-свете при длине волны 254 нм и обрабатывали соответствующими реагентами.
Результаты и их обсуждение. В результате проведенных исследований установлено, что саксаглиптин проявляет удовлетворительную хроматографическую подвижность практически во всех используемых системах растворителей.
Вместе с тем, при хроматографировании токсиканта в системах растворителей 2, 3, 5-10 его адсорбция происходит во второй, четвертой и пятой хроматографических зонах, где в соответствии с данными источника [9] локализуются токсикологически значимые лекарственные средства: производные барбитуровой и салициловой кислот, 1,4-бензодиазепина и пиразолона-5.
Наиболее приемлемыми для ТСХ-скрининга на саксаглиптин при судебно-токсикологических исследованиях являются системы 1 и 4. Адсорбция исследуемых образцов саксаглиптина в данных условиях происходит в свободной от перечисленных выше токсикантов хроматографической зоне (между четвертой и пятой) со значения Rf для пластинок Merck 0,40-0,47 и Sorbfil 0,44-0,48 соответственно.
Выводы. Таким образом установлено, что условия ТСХ-скрининга лекарственных средств, применяемые при отравлении неизвестным веществом и рекомендованные TIAFT, являются вполне приемлемыми для судебно-токсикологических исследований для обнаружения и идентификации саксаглиптина в объектах химико-токсикологического анализа.
Список литературы
- Aschner, P. J. The role for saxagliptin within the management of type 2 diabetes mellitus: an update from the 2010 European Association for the Study of Diabetes (EASD) 46th annual meeting and the American Diabetes Association (ADA) 70th scientific session / P.J. Aschner // Diabetol. Metab. Syndr. – 2010. – Vol. 2. – P. 69.
- Barnett, A. H. Dipeptidyl peptidase-4 inhibitors in triple oral therapy regimens in patients with type 2 diabetes mellitus / A.H. Barnett, B. Charbonnel, R.G. Moses, S. Kalra // Curr. Med. Res. Opin. – 2015. – Vol. 31, N 10. – P. 1919-1931.
- Chen, X. W. Clinical pharmacology of dipeptidyl peptidase 4 inhibitors indicated for the treatment of type 2 diabetes mellitus / X. W. Chen, Z. X. He, Z. W. Zhou // Clin. Exp. Pharmacol. Physiol. – 2015. – Vol. 42, N 10. – P. 999-1024.
- Craddy, P. Comparative Effectiveness of Dipeptidylpepti-dase-4 inhibitors in type 2 diabetes: A systematic review and mixed treatment comparison / P. Craddy, H.-J. Palin, K. I. Johnson // Diabetes Ther. – 2014. –Vol. 5(1). – P. 1-41.
- Side_effects – [Electronic resource]. – 2017. – Access: http: // patientsville.com/medication/ saxagliptin_ side_ effects.htm
- Sheen, A. J. Efficacy and safety of saxagliptin in combination with metformin compared with sitagliptin in combination with metformin in adult patients with type 2 diabetes mellitus / A. J. Sheen, C.J. Charpentier, A.H. Ostgren, I. Gause-Nilsson // Diab. Metab. Res. Rev. – 2010. – Vol. 26 (7). – P. 540-549.
- Umpierrez G. E., Meneghini L. Reshaping diabetes care: the fundamental role of dipeptidyl peptidase-4 inhibitors and glucagon-like peptide-1 receptor agonists in clinical practice // Endocr. Pract. – 2013. – Vol. 19 (4). – P. 718–728.
- Карташов, В. А. Химико-токсикологический анализ. Выделение токсических веществ из биологических объектов. – Майкоп: ООО «Качество», 2008. – 188 с.
- ТСХ-скрининг токсикологически значимых соединений, изолируемых экстракцией и сорбцией / Г. В. Раменская, Г. М. Родионова, Н. И. Кузнецова [и др.]; под ред. А. П. Арзамасцева. – М.: ГЭОТАР-Медиа, 2010. – 240 с.