Изучение некоторых вопросов изолирования из биологического материала новой биологически активной субстанции

Цикламетазол (3-циклогексиламинометилтиазоло[3,2-а]бензимидазола дигидрохло-рид), обладающий иммунокорректными антиагрегатным свойствами [1] ,[2], синтезирован на кафедре фармацевтической химии БГМУ (г. Уфа). В настоящее время на лекарственное средство идет подготовка нормативной документации и выполняются доклинические испытания. ЛД50 Цикламетазола для крыс составляет 280 мг\кг, летальная доза для человека, очевидно, может составить 90-180 мг\кг. Его применение в перспективном будущем с учетом относительно высокой токсичности обуславливает необходимость изучения этого соединения в химико-токсикологическом отношении.

Цель настоящего исследования - разработка методики изолирования биологически активной субстанции из биологического материала и ее количественная оценка.

Таблица 1-Результаты определения нейтрального красного в биологическом материале

Проба

D исследуемого раствора

Выделено нейтрального красного

Метрологическая характеристика

Мг

%

1.

0,29

0,0680

68,09

x̅ = ± 71,76

2.

0,30

0,0726

72,64

S = ± 1,963

3.

0,31

0,0726

72,64

S x = ± 0,82

4.

0,28

0,0727

72,78

Δ x̅ = ± 2,29

5.

0,30

0,0726

72,64

È = ± 3,19

В качестве модельного вещества для решения вопроса об экстрагируемости азотсодержащих веществ основного характера (таковым является Цикламетазол) в своей работе мы использовали нейтральный красный (Neutralrot, толуиленоый красный).

Таблица 2 - Результаты определения Цикламетазола в биологическом материале

Проба

D исследуемого раствора

Выделено Цикламетазола

Метрологическая характеристика

   

Мг

%

 

1.

0,47

0,0690

69,09

X̅ = ± 66,75

2.

0,39

0,0666

66,64

S = ± 1,963

3.

0,43

0,0657

65,74

S x = ± 1,12

4.

0,45

0,0683

68,30

Δ x̅ = ± 1,99

5.

0,35

0,0640

64,01

È = ± 2,98

Для проведения эксперимента с целью установления эффективности экстрагирования выбранной методики нами произведена затравка куриной печени (10г) нейтральным красным (0,1г), смесь выдержали при комнатной температуре в течение 5 суток. После чего измельченную печень настаивали на воде, подкисленной серной кислотой (pH=1-2) в течение двух часов, троекратно. Водные вытяжки процеживали и объединяли. Далее экстрагировали хлороформом три раза, предварительно обработав водное извлечение

25% раствором аммиака (pH=10-12). Хлороформные вытяжки объединяли и производили очистку центрифугированием при 8000 т\об в течение 3 мин. Количественную оценку эффективности экстракционной методики производили спектрофотометрическим методом.

По аналогичной методике нами выполнена пробоподготовка Цикламетазола. Результаты исследования приведены в таблице 2. Таким образом, разработанная нами методика изолирования из печеночной ткани новой биологически активной субстанции относительно не трудозатратна и достаточно эффективна.

 

Список литературы

  1. [1] Дианов В. М. Дигидрохлорид 3-циклогексиламинометилтиазоло[3,2-a]-бензимидазола, проявляющий иммунотропную и антиагрегационную активность: пат. 2405788 Рос. Федерация / Дианов В. М. Сибиряк С.
  2. В.., Алехин Е. К. - Заявл. 14.07.2009; опубл. 10.12.2010, Бюл №34
  3. [2] Дианов В. М. Новый синтетический иммуномодулятор из класса тиазолоазолов / В. М. Дианов, Е. К. Алехин, Д. А. Еникеев, М. Х. Зелеев, Д. М. Галимов, Р. Х. Алмаев, Г. Х. Ахтямова // Аллергология и иммунология. - 2011 - Т. 12, №1: Материалы XVI Международного конгресса по реабилитации в медицине и иммунореабилитации (30 апреля - 3 мая 2011 г., Париж (франция)). - с. 160.
Год: 2018
Город: Шымкент
Категория: Медицина