Аннотация
Растения – сложнейшая система, как с точки зрения химического состава, так и с точки зрения функций организма. Все вещества растений делят на два типа - первичного и вторичного синтеза. К веществам первичного синтеза относятся: белки, углеводы, липиды, витамины, ферменты, органические кислоты. Образование, накопление и природа вторичных веществ в различных растениях, к числу которых принадлежат и сапонины, зависит от многочисленных внешних факторов, меняющихся в онтогенезе.
Ключевые слова. Тритерпеновые сапонины, растительное сырье, фотоколориметр, качественное и количественное определение.
Терапевтическая ценность лекарственных растений определяется природой входящих в их состав БАВ, их количественным содержанием, природой сопутствующих веществ. Сапогликозиды (тритерпеноидные и стероидные) обладают гемолитической и поверхностной активностью. Впервые проведено фитохимическое исследование надземной части Astragalus alopeciasна наличие сапонинов, собранной на юге Казахстана.
Цель. Качественное и количественное определение содержания тритерпеновых сапонинов в растении Astragalus alopecias.
Материалы и методы. Наличие тритерпеновых соединений определяли в водных извлечениях с помощью реакции пенообразования. При встряхивании пробирок с 5 мл раствора кислоты хлороводородной 5,1 моль/л и 5 мл раствора гидроксида натрия 0,1 моль/л с равным количеством водного извлечения наблюдали, что в пробирке с кислотой образуется более обильная и стойкая пена, чем в пробирке со щелочью. В результате установили, что в надземной части Astragalus alopecias присутствуют сапонины преимущественно тритерпеновойструктуры [1,2]. Для подтверждения наличия тритерпеновых соединений бутанольную фракцию спирто-водного извлечения хроматографировали в тонком слое сорбента на пластинках«Силуфол» в системе растворителей: хлороформ-этилацетат (9:1) с последующим проявлением 20 % раствором кислоты серной. При этом на хроматографической пластинке обнаружились три пятна малинового цвета, отнесенные к тритерпеновым соединениям (Rf ~ 0,21; Rf ~ 0,46; Rf ~ 0,56).
Определение содержания тритерпеновых соединений проводили фотоэлектроколориметрическим методом, основанным на реакции с концентрированной кислотой серной с последующим измерением оптической плотности [2]. 5,0 г сырья (т.н.) помещали в колбу вместимостью 100 мл и прибавляли 50 мл воды. Экстрагировали на кипящей водяной бане с обратным холодильником в течение двух часов. Полученные извлечения фильтровали в мерные колбы на 50 мл и доводили водой очищенной до метки. 5 мл извлечения помещали в колбу, прибавляли 3 мл смеси концентрированной кислоты хлороводородной и воды в соотношении 1:1, нагревали на кипящей водяной бане с обратным холодильником в течение 30 минут. Полученные растворы охлаждали под струей холодной воды и сливали в делительные воронки; колбы, в которых проводили гидролиз, ополаскивали 5 мл воды и добавляли смыв в делительные воронки, сюда же вносили 20 мл смеси хлороформ-спирт этиловый 96 % (5:1) и взбалтывали в течение 10 минут. Хлороформные извлечения фильтровали через фильтры с 5 г безводного сульфата натрия в стеклянные колонки с 2 г оксида алюминия. Операцию повторяли 3 раза, используя каждый раз по 20 мл смеси хлороформ-спирт этиловый. Хлороформные элюаты упаривали на кипящей водяной бане досуха. Сухие остатки переносили в мерные колбы_на 25 мл спиртом этиловым 70 % и доводили тем же растворителем до метки. К 5 мл полученных растворов прибавляли 5 мл концентрированной серной кислоты, перемешивали. Через 30 минут измеряли оптическую плотность на фотоэлектроколориметре при длине волны 490 нм, используя вкачестве раствора сравнения воду.
Количественное содержание тритерпеновых соединений рассчитывали по формуле:
D* V *100
= 22,9 * a * (100 - W ) ;
где: D- оптическая плотность исследуемого раствора;
а - навеска сырья; V - разведение; W - влажность сырья; 22,9 - удельный показатель поглощения олеаноловой кислоты.
0,797 *25*100
Х= 22,9*5 (10-4)
= 0,181%
В результате проведенных исследований установили, что количественное содержание тритерпеновых сапонинов в Astragalus alopecias составляет 0,181 %.
Выводы:
1. Качественными реакциями и хроматографией в тонком слое сорбента доказано наличие сапонинов преимущественно тритерпеновой группы.
2. Фотоколориметрическим методом было определено количественное содержание тритерпеновых сапонинов, которое составило 0,181%
Список литературы
- 1. Лосева И.В. Сырьевая база лекарственных растений Казахстана и ее рациональное использование. – Учебно-методическое пособие. – Караганда. – 2008. – 110 с.
- 2. Музычкина Р.А., Корулькин Д.Ю., Абилов Ж.А. Качественный и количественный анализ основных групп БАВ в лекарственном растительном сырье и фитопрепаратах. –Алматы, 2004. – 48с.