Актуальность. Актуальной задачей фармацевтической науки является поиск новых лекарственных растений и эффективных препаратов на их основе, в частности, за счет увеличения номенклатуры путем использования интродуцируемых или акклиматизированных ценных видов лекарственных растений, или применения других морфологических частей изученных растений. Одной из таких перспективных культур, обладающей общетонизирующими свойствами является эндемичное растение - лимонник китайский (SchisandrachinensisBaill.) На сегодняшний день в медицинской практике применяют только настойку семян и настойку плодов (на 95% этиловом спирте), выпускаемые промышленностью [2]. Вследствие этого, расширение ассортиментного состава препаратов лимонника в более удобной лекарственной форме с максимальным выходом биологически активных веществ является актуальным.
Цель исследования: Целью нашей работы явилось проведение сравнительной оценки количественного содержания лигнановв экстрактах из листьев лимонника китайского, интродуцированного на территории Республики Башкортостан.
Материалы и методы: Объектом исследования служили листья лимонника китайского, выращенного в Республике Башкортостан. Образцы сырья хранили в сухом, чистом, хорошо вентилируемом помещении, без прямого попадания солнечных лучей [1].
Для качественного обнаружения лигнанов в растительном сырье использовали тонкослойную хроматографию и УФ-спектрометрию [3]. Количественное определение проводили
спектрофотометрическим методом в пересчете на гамма-схизандрин в полученных экстрактах.
Первый экстракт получали с использованием полярного растворителя. Для этого навеску измельченного сырья заливали полярным экстрагентом (70% этиловый спирт) в соотношении сырье:экстрагент – 1 : 10 и настаивали в течение одного часа. Затем проводили экстракцию при
температуре 80±5°С (на водяной бане) при периодическом перемешивании в течении 30 минут. Смесь охлаждали, отжимали через капроновое сито, затем извлечение фильтровали через бумажный фильтр (раствор А1).
Второе экстрактполучалив двухфазной системес использованием двух несмешивающихся растворителей (полярная фаза - спирт этиловый 70%, неполярная фаза - масло подсолнечное рафинированное). В колбу помещали измельченное растительное сырье в соотношении 1:10, в начале заливали раствором полярной фазы, затем заливали неполярным растворителем и экстрагировали на водяной бане с обратным холодильником при температуре 80±5°С в течении 30 минут при периодическом перемешивании. Смесь охлаждали до 40-45°С, фильтровали через капроновое сито и производили разделение двух фаз, с помощью делительной воронки выделили неполярную фазу (раствор А2).
Для определения количественного содержания лигнанов в экстракте №1, 0,5 мл водно-спиртового извлечения помещали в мерную колбу на 25 мл и довели до 70% этиловым спиртом, содержимое колбы тщательно перемешивали (раствор Б1). Оптическую плотность раствора Бизмеряли на спектрофотометре при длине волны 254 нм в кювете с толщиной слоя 10 мм относительно растворителя – спирт этиловый 70%.
Для определения количественного содержания лигнанов в экстракте №2, 0,5 г масляного экстракта (раствор А2), помещали в мерную колбу на 200 мл и довели до метки петролейным эфиром, содержимое колбы тщательно перемешивали в течение 10 минут (раствор Б2). Оптическую плотность раствора Б2измерялина спектрофотометре при длине волны 254 нм в кювете с толщиной слоя 10 мм относительно растворителя – петролейный эфир.
Результаты и их обсуждение. Проведенные тонкослойная хроматография и УФ-спектрометрия подтвердили наличие лигнанов в листьях лимонника. Результаты количественного содержания суммы лигнанов в пересчете на гамма-схизандрин в листьях лимонника китайского приведены в таблицах 1 и 2.
Таблица 1 - Содержание лигнанов в пересчете на γ-схизандрин в экстрактах, полученных при экстрагировании полярным растворителем
|
Проба |
А (оптическая плотность) при длине волны 254 нм |
Содержание, % |
|
1 |
0,318 |
4,16 |
|
2 |
0,295 |
3,86 |
|
3 |
0,309 |
4,04 |
В результате проведенных исследований оказалось, что содержание лигнанов в пересчете на γ- схизандрин в экстрактах, полученных при экстрагировании полярным растворителем соответствует 4,02±0,20%.
Таблица 2. Содержание лигнанов в пересчете на γ-схизандрин в экстрактах, полученных экстрагированием в двух несмешивающихся жидкостях
|
Проба |
A (оптическая плотность) при длине волны 254 нм |
Содержание, % |
|
1 |
0,513 |
5,37 |
|
2 |
0,500 |
5,23 |
|
3 |
0,507 |
5,31 |
В результате проведенных исследований оказалось, что содержание лигнанов в пересчете на γ- схизандрин в экстрактах, полученных двухфазным экстрагированием соответствует 5,30± 0,265%
Заключение и выводы. Таким образом, оказалось, что наибольший выход лигнанов наблюдается в экстрактахлистьев лимонника китайского, полученных методом двухфазного экстрагирования.
Список литературы
- Государственная Фармакопея XI издания: Вып. 1. Общие методы анализа. – М.: Медицина, 1987. – 296 с.
- Государственная Фармакопея XIV издания, том IV, ФС.2.5.0081.18 «Лимонника китайского плоды» и ФС.2.5.0082.18 «Лимонника китайского семена», 2018г.
- Фитохимический анализ: учеб.пособ. по фармакогнозии для студ., обуч. по спец. 060108.65-фармация / Башкирский гос. мед. ун-т; сост.: Н.В. Кудашкина, С.Р. Хасанова, С.А. Мещерякова. - Уфа: Изд-во БГМУ, 2006. - 224 с.