Другие статьи

Цель нашей работы - изучение аминокислотного и минерального состава травы чертополоха поникшего
2010

Слово «этика» произошло от греческого «ethos», что в переводе означает обычай, нрав. Нравы и обычаи наших предков и составляли их нравственность, общепринятые нормы поведения.
2010

Артериальная гипертензия (АГ) является важнейшей медико-социальной проблемой. У 30% взрослого населения развитых стран мира определяется повышенный уровень артериального давления (АД) и у 12-15 % - наблюдается стойкая артериальная гипертензия
2010

Целью нашего исследования явилось определение эффективности применения препарата «Гинолакт» для лечения ВД у беременных.
2010

Целью нашего исследования явилось изучение эффективности и безопасности препарата лазолван 30мг у амбулаторных больных с ХОБЛ.
2010

Деформирующий остеоартроз (ДОА) в настоящее время является наиболее распространенным дегенеративно-дистрофическим заболеванием суставов, которым страдают не менее 20% населения земного шара.
2010

Целью работы явилась оценка анальгетической эффективности препарата Кетанов (кеторолак трометамин), у хирургических больных в послеоперационном периоде и возможности уменьшения использования наркотических анальгетиков.
2010

Для более объективного подтверждения мембранно-стабилизирующего влияния карбамезапина и ламиктала нами оценивались перекисная и механическая стойкости эритроцитов у больных эпилепсией
2010

Нами было проведено клинико-нейропсихологическое обследование 250 больных с ХИСФ (работающих в фосфорном производстве Каратау-Жамбылской биогеохимической провинции)
2010


C использованием разработанных алгоритмов и моделей был произведен анализ ситуации в системе здравоохранения биогеохимической провинции. Рассчитаны интегрированные показатели здоровья
2010

Специфические особенности Каратау-Жамбылской биогеохимической провинции связаны с производством фосфорных минеральных удобрений.
2010

Исследование условий культивирования культуры клеток peganumharmalal. с целью получения алкалоидов

Введение

В целях совершенствования использования ресурсов лекарственных растений Южного региона, необходимо применить меры к внедрению современных технологий, ориентированных на выпуск экологически чистой продукции с высокими потребительскими качествами. Одной из таких технологий является использование культур клеток и тканей растений invitro.

Алкалоидоносные растения широко распространены по территории Казахстана и могут служить сырьевой базой для получения лекарственных средств и фитопрепаратов самого различного назначения.

Преимуществом создаваемых клеточных культур по сравнению с традиционным растительным сырьем (дикорастущим или выращиваемые на плантациях растения) является: получение продукта независимо от внешних климатических, почвенных условий и возможность культивирования клеток растений, оптимизация и стандартизация условий выращивания.

В последние годы культивирование клеток и тканей растений находит все более широкое применение в биотехнологии, однако технологии получения каллуса гармалы обыкновенной, обладающей способностью продуцировать биологически активные вещества (БАВ), которые могут быть использованы в медицине и фармацевтической промышленности, на настоящее время практически не изучены.

В связи с этим большое практическое значение имеет получение алкалоидов из клеточной ткани PeganumharmalaL.

Гармалаобыкновенная (PeganumharmalaL.) - многолетнее травянистое растение из семейства

Парнолистниковые, широко распространена во всех республиках Средней Азии и в южном Казахстане, часто встречается также в сухих степях в южных районах европейской части СНГ и на Кавказе. Источник ценных биологически активных веществ, в том числе фармакологически значимых алкалоидов. Из суммы алкалоидов сначала выделены в чистом виде гармалин, гармин (банистерин), гармалол и L-пеганин (вазицин), а в последние годы - пегамин, пеганол, дезоксипеганин (всего 17 оснований). Алкалоиды гармалывоздействуют на сердечно-сосудистую систему, органы дыхания и пищеварения, на чувствительность нервных окончаний, тонус мускулатуры. Поэтому благодаря своей физиологической активности многие алкалоиды, будучи сильными ядами, находят применение в медицине.

Целью данной работы является изучение влияния условий культивирования культуры

клетокРедапитһагтаІа L. нанакопление алкалоидов.

Материалы и методы исследования

При выполнении работы объектами исследования служили интактное растениеPeganumharmalaL., собранное в полузасушливых степях ЮКО, и инициированная из него каллусная ткань, выращенная на модифицированной питательной среде MurashigeandSkoog. Для стерилизации эксплантов применяли растворы диацида, 0,1 % раствор KMnO4, 70 % раствор этанола + 10 % раствор гипохлорита натрия (1:1), 10 % раствор пероксида водород и 96% этиловый спирт. Стерилизацию проводили в чашках Петри, после чего семена помещали для проращивания в стерильные чашки Петри на стерильную фильтровальную бумагу в небольшое количество стерильной дистиллированной воды в термостат при температуре 28 - 300С. Использовали питательные среды со стандартным минеральным составом по Мурасиге-Скуга, Уайта и Гамборга, куда вводили культуру invitro. Для оценки роста каллусной культуры применяли весовой метод, взвешивая на аналитических весах извлеченный из пробирки пинцетом каллус. Измерения производились каждые 4 дня. Изъятие ткани для анализа проводили на 40-е сутки культивирования. Жизнеспособность культуры определяли соотношением количества жизнеспособных клеток к общему количеству в миллилитре суспензии. Жизнеспособные или живые культуры характеризуются наличием клеток с ядрами и движением цитоплазмы при окрашивании препаратов красителем метиловым синим.

Результаты и обсуждение

Как показали результаты предварительных опытов, наилучшим материалом для введения в культуру іпуіігоявляются молодые побеги и проростки, полученные из семян. Для стерилизации семян и эксплантов наиболее приемлемым оказалось стерилизация 96 %-й этиловым спиртом и 0,1 %-й раствором KMnO4 в течение 1 мин. и 20 мин. соответственно. При этом достигался наиболее высокий процент живых, незаряженных эксплантов.

Растения, культивируемые на среде с минеральным составом по MurashigeandSkoog, показали наиболее высокий процент жизнеспособности, чем на средах Uata и Гамборга.Каллусная ткань была получена в результате каллусогенеза из молодых побегов на среде Мурасиге-Скуга (МС), содержащей нафтилуксусную кислоту (НУК) и 6-бензиламинпурин (БАП) в составе 0,4- 0,8 мг/л и 0,2 -0,4 мг/л при пониженной концентрации сахарозы.

Динамика роста каллусной ткани в зависимости от продолжительности культивирования приведена на рисунке 1.

Из рисунка 1 видно, что оптимальное время культивирования для накопления массы каллусной ткани Peganumharmala L. на среде MurashigeandSkoog составило 30 суток. Известно, что большое влияние на накопление продуктов вторичного метаболизма в условиях invitro оказывает способ культивирования растительной ткани. Для выяснения влияния способов культивирования на процессы роста клеточной ткани Peganumharmala L. была исследована динамика роста при поверхностном культивировании на агаре и инертном носителе с периодическимомыванием ткани питательной средой.Выбор пенополиуретана в качестве инертного носителя для выращивания тканей Peganumharmala L. был обусловлен существенными преимуществами этого материала. Это дешевизна, удобство манипулирования, возможность многократного использования носителя. Пористость этого материала обусловливает хороший доступ веществ питательной среды к клеткам.На рисунке 2 приведена динамика роста каллусной ткани Peganumharmala L. при культивировании на пенополиуретановых подложках и агаре.

По структуре каллусная ткань на пенополиуретане не отличалась от каллусной ткани получаемой на агаре. На пенополиуретане наблюдался более интенсивный рост, чем на агаре, и масса каллусной ткани на пенополиуретане превышала в два раза по сравнению с агаром, уже начиная на 12-е сутки культивирования. На 30-е сутки масса каллусной ткани полученной на пенополиуретане составила более 11 г/л, тогда как на агаре масса каллуса за этот же период культивирования достигала более 7 г/л.

Пенополиуретановые пластины можно рассматривать как химически нейтральную поддерживающую основу, позволяющую отказаться от использования агара, что удешевляет процесс.

На рисунке 3 представлена динамика накопления алкалоидов в культуре клеток Peganumharmala L. в зависимости от способа культивирования.

Установлено, что при выращивании каллусной ткани на пенополиуретановых подложках накопление алкалоидов происходило раньше, чем при культивировании на агаре. На 30-е сутки содержание алкалоидов в каллусной ткани культивированной на пенополиуретане составляло 1,2 раза больше, чем на агаре. Для применения в фармацевтической промышленности с практической точки зрения представляет интерес каллусная ткань, культивируемая на пенополиуретане, с использованием модифицированной питательной среды MurashigeandSkoog.

В следующей серии экспериментов определяли содержание алкалоидов в каллусной ткани Peganumharmala L. Было обнаружено, что между интенсивностью роста каллусной ткани и синтезом алкалоидов существует прямая зависимость. На рисунке 4 приведено содержание алкалоидов в каллусной ткани Peganumharmala L.b зависимости от продолжительности культивирования.

Из рисунка 4 видно, что оптимальное время культивирования для Peganumharmala L. с целью получения наибольшего количество алкалоидов (4,20 %) составляет также 30 сут.

Выводы. Таким образом, на основании результатов, полученных при проведении экспериментов, были сделаны следующие выводы:

  1. Наилучшим материалом для введения в культуру іпуіігоявляются молодые побеги и проростки, полученные из семянРедапитНагтаІаЬ.
  2. Модифицированная питательная среда с минеральной основой по MurashigeandSkoog наилучшим образом обеспечивает процессы жизнедеятельности эксплантов Peganumharmala L. и накопление биологически активных веществ в каллусной ткани.
  3. Установлено, что гормональный состав среды влияет на накопление клеточной биомассы Peganumharmala L. и количество алкалоидов в ней.
  4. Наибольшее количество алкалоидов (4,20 %) содержится в каллусной ткани, выращенной при продолжительности культивирования 30 сут.

Таким образом, каллусная ткань гармалы является перспективным источником биологически активных веществ и представляет большой потенциал для их синтеза.

ЛИТЕРАТУРА

  1. Лазурьевский Г.В. Терентьева И.В. Алкалоиды и растения. - Кишинев: Штиинца, 1995. - 150 с.
  2. Гринкевич Н.И. Лекарственные растения.-М.: Высшаяшкола,1991.- 420 с.
  3. Murashige T., Skoog F. A revised medium for rapid growth and bioassays with tobacco tissue cultures // Physiol. plant.,1998. - V. 15.- №13.- Р. 473-497.
  4. Семенов С.М. Лабораторные среды для растительных эксплантов. - М.: Агропромиздат, 2005.-25с.
  5. Плынская Ж.А., Величко Н.А. Влияние регуляторов роста на процессы синтеза вторичных веществ в культуре invitroEphedramonosperma // Химия растительного сырья. - 2008, №4. - С. 125-127.
  • Теги: Время
  • Год: 2017
  • Город: Шымкент
  • Категория: Медицина

Разделы знаний

Архитектура

Научные статьи по Архитектуре

Биология

Научные статьи по биологии 

Военное дело

Научные статьи по военному делу

Востоковедение

Научные статьи по востоковедению

География

Научные статьи по географии

Журналистика

Научные статьи по журналистике

Инженерное дело

Научные статьи по инженерному делу

Информатика

Научные статьи по информатике

История

Научные статьи по истории, историографии, источниковедению, международным отношениям и пр.

Культурология

Научные статьи по культурологии

Литература

Литература. Литературоведение. Анализ произведений русской, казахской и зарубежной литературы. В данном разделе вы можете найти анализ рассказов Мухтара Ауэзова, описание творческой деятельности Уильяма Шекспира, анализ взглядов исследователей детского фольклора.  

Математика

Научные статьи о математике

Медицина

Научные статьи о медицине Казахстана

Международные отношения

Научные статьи посвященные международным отношениям

Педагогика

Научные статьи по педагогике, воспитанию, образованию

Политика

Научные статьи посвященные политике

Политология

Научные статьи по дисциплине Политология опубликованные в Казахстанских научных журналах

Психология

В разделе "Психология" вы найдете публикации, статьи и доклады по научной и практической психологии, опубликованные в научных журналах и сборниках статей Казахстана. В своих работах авторы делают обзоры теорий различных психологических направлений и школ, описывают результаты исследований, приводят примеры методик и техник диагностики, а также дают свои рекомендации в различных вопросах психологии человека. Этот раздел подойдет для тех, кто интересуется последними исследованиями в области научной психологии. Здесь вы найдете материалы по психологии личности, психологии разивития, социальной и возрастной психологии и другим отраслям психологии.  

Религиоведение

Научные статьи по дисциплине Религиоведение опубликованные в Казахстанских научных журналах

Сельское хозяйство

Научные статьи по дисциплине Сельское хозяйство опубликованные в Казахстанских научных журналах

Социология

Научные статьи по дисциплине Социология опубликованные в Казахстанских научных журналах

Технические науки

Научные статьи по техническим наукам опубликованные в Казахстанских научных журналах

Физика

Научные статьи по дисциплине Физика опубликованные в Казахстанских научных журналах

Физическая культура

Научные статьи по дисциплине Физическая культура опубликованные в Казахстанских научных журналах

Филология

Научные статьи по дисциплине Филология опубликованные в Казахстанских научных журналах

Философия

Научные статьи по дисциплине Философия опубликованные в Казахстанских научных журналах

Химия

Научные статьи по дисциплине Химия опубликованные в Казахстанских научных журналах

Экология

Данный раздел посвящен экологии человека. Здесь вы найдете статьи и доклады об экологических проблемах в Казахстане, охране природы и защите окружающей среды, опубликованные в научных журналах и сборниках статей Казахстана. Авторы рассматривают такие вопросы экологии, как последствия испытаний на Чернобыльском и Семипалатинском полигонах, "зеленая экономика", экологическая безопасность продуктов питания, питьевая вода и природные ресурсы Казахстана. Раздел будет полезен тем, кто интересуется современным состоянием экологии Казахстана, а также последними разработками ученых в данном направлении науки.  

Экономика

Научные статьи по экономике, менеджменту, маркетингу, бухгалтерскому учету, аудиту, оценке недвижимости и пр.

Этнология

Научные статьи по Этнологии опубликованные в Казахстане

Юриспруденция

Раздел посвящен государству и праву, юридической науке, современным проблемам международного права, обзору действующих законов Республики Казахстан Здесь опубликованы статьи из научных журналов и сборников по следующим темам: международное право, государственное право, уголовное право, гражданское право, а также основные тенденции развития национальной правовой системы.