Особое место в контроле качества занимает стандартизация новых биологически активных соединений, которые перспективны как потенциальные лекарственные средства.
Одним из основных показателей качества активных фармацевтических ингредиентов (АФИ) является показатель «остаточные количества органических растворителей». Содержание остаточных количеств органических растворителей должно контролироваться во всех действующих и вспомогательных веществах лекарственных препаратов. Это обусловлено тем, что в процессе производства субстанций и лекарственных препаратов (ЛП) используют различные органические растворители, остаточные количества которых, как правило, присутствуют и в конечном продукте. В связи с тем, что многие из органических растворителей имеют токсические свойства, содержание их в лекарствах подлежит обязательной регламентации, что отражено в монографиях фармакопеи.ГФУ содержит статью «Остаточные количества органических растворителей», в которой регламентируется данный показатель для субстанций и ЛП, в процессе производства которых используют органические растворители. Данная монография устанавливает пределы предельного содержания органических растворителей, которые чаще всего применяются в процессе синтеза биологически активных веществ. Для производителей АФИ обязательным является включение этого показателя контроля качества в спецификацию методик контроля качества ЛП, либо обоснование в случае отсутствие данного показателя.
Методы контроля качества АФИ проводили согласно рекомендаций, приведенных в ГФУ [1-4], раздел «СУБСТАНЦИИ^» Определение остаточных количеств органических растворителей проводили методом газовой хроматографии.
Объектом исследования является субстанция, которая обладает противогрибковым действием - 3- (три-фторо-ацетил)имидазо [1,2-а ]пиримидин.
В спецификацию проекта методик контроля качества на субстанцию внесен показатель качества «Остаточные количества органических растворителей». Заключительной стадией синтеза субстанции 3- (трифтороацетил)имидазо[1,2-а ]пиримидина является дополнительная очистка, перекристаллизацией из 2-пропанола, поэтому в данном тесте целесообразно контролировать лишь 2-пропанол. В соответствии с требованиями общей статьи ГФУ 2-пропанол относится к растворителям 3 класса (малотоксичные растворители), нормирование концентрации которого должно быть меньше 0.5% (5000 ррм). С учетом требований статьи ГФУ для определения количества остаточных органических растворителей был предложен метод газовой хроматографии. В проект методик контроля качества методика была внесена в следующей редакции:
«Испытание проводят методом газовой хроматографии в соответствии с требованиями ГФУ 2.4.24, 5.4, 2.2.28.
Испытуемый раствор. Около 1 г (точная навеска) субстанции помещают в мерную колбу вместимостью 10 мл, добавляют 8 мл диметилформамида Р, перемешивают до полного растворения. Доводят объем раствора диметилформамидом Р до метки и перемешивают. Срок годности испытуемого раствора - 7 часов.
Раствор сравнения (а). В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 50 мл диметилформамиду Р, добавляют около 5,0 г 2-пропанола Р и перемешивают, доводят объем раствора диметилформамидом Р до метки и снова перемешивают.
Раствор сравнения (b). 1 мл раствора сравнения (а) переносят в мерную колбу вместимостью 10 мл, доводят объем раствора диметилформамидом Р до метки и перемешивают.
Раствор сравнения (c). 5 мл раствора сравнения (b) переносят в мерную колбу вместимостью 100 мл, доводят объем раствора диметилформамидом Р до метки и перемешивают. Срок годности раствора сравнения (c) - 3 суток.
В качестве бланк-раствора используют тот же диметилформамид.
Условия хроматографии: детектор ПИД (пламенно-ионизационный); колонка кварцевая капиллярная размером 30 м х 0,53 мм, с толщиной слоя 1 мкм или аналогичная; температура колонки - 40 ° С (4 мин), прирост температуры 15 ° С/мин до 120 ° С (выдержка 1 мин), 15 °С/мин до 170 °С (выдержка 10 мин); температура инжектора - 200 °С; температура детектора - 250 °С; газ-носитель - азот; скорость газа-носителя - 5 мл/мин; деление потока 1: 5; объем пробы, вводимой: 1 мкл.
Проверка пригодности хроматографической системы. Хроматографують раствор сравнения (c) 3 раза.
Хроматографическая система считается пригодной, если выполняются следующие условия: относительное стандартное отклонение площадей пика 2-пропанола должно быть не более 10%; отношение сигнал/шум для пика 2-пропанола должно быть не менее 9.
Хроматографують бланк-раствор (диметилформамида).
Последовательно хроматографирують равные объемы бланк-раствора, раствора сравнения (с) и испытуемого раствора по 2 раза.
Содержание 2-пропанол в субстанции (Х), в процентах, вычисляют по формуле:
S S • m-1-5-10-100 _ S • m0
X ——,
S -m -100-10-100 S -m -20
где S - средняя площадь пика 2-пропанола, рассчитанная по хроматограммам испытуемого раствора; S0 - средняя площадь пика 2-пропанола, рассчитанная по хроматограммам раствора сравнения (c); m - масса навески субстанции, в граммах; m0 - масса навески 2-пропанола, взятая для приготовления раствора сравнения (a), в граммах.
Содержание 2-пропанола в субстанции должно быть не более 0,5% (5000 ррм).
Результаты испытания считаются достоверными, если выполняются требования теста "Проверка пригодности хроматографической системы». С целью выполнения требований теста допускается корректировка условий хроматографии.
Таким образом, в работе представлена методика определения остаточных количеств органических растворителей для впервые синтезированного вещества с выраженной противогрибковой активностью, а именно субстанции 3-(трифтороацетил)имидазо[1,2-а ]пиримидина.
Список литературы
- Государственная Фармакопея Украины / Государственное предприятие «Научно-экспертный фармакопейный центр». - 1-е изд. - Харьков: РІРЕГ, 2001. - Дополнение 1. - 2004. - 520 с.
- 2. Государственная Фармакопея Украины / Государственное предприятие «Научно-экспертный фармакопейный центр». - 1-е изд. - Харьков: РІРЕГ, 2001. - Дополнение 2. - Харьков: Государственное предприятие «Научно-экспертный фармакопейный центр», 2008. - 620 с.
- Государственная Фармакопея Украины / Государственное предприятие «Украинский научный фармакопейный центр качества лекарственных средств». - 1-е изд. - Дополнение 3: Пер. с укр. - Харьков: Государственное предприятие «Украинский научный фармакопейный центр качества лекарственных средств». - 2010. - 288 с.
- Государственная Фармакопея Украины / Государственное предприятие «Украинский научный фармакопейный центр качества лекарственных средств». - 1-е изд. - Харьков: РІРЕГ, 2001. - Дополнение 4. - Харьков: Государственное предприятие «Украинский научный фармакопейный центр качества лекарственных средств». - 2011. - 540 с.