Резюме
В работе рассматривается вопрос определения качественного и количественного содержания флавоноидов в липофильном экстракте, полученном из соцветий бархатцев прямостоячих высокорослой формы сорта «Гавайи». Липофильный экстракт получен с использованием масла кукурузного рафинированного дезодорированного. В составе экстракта были определены патулетин и патулетрин методом тонкослойной хроматографии. Количественное содержание суммы флавоноидов составило до 0,7120±0,0060 % в пересчете на патулетин. Липофильный экстракт из соцветий бархатцев прямостоячих является перспективным лекарственным средством для получения новых фитопрепаратов.
Ключевые слова: бархатцы прямостоячие, липофильный экстракт, флавоноиды, тонкослойная хроматография, количественное содержание
Одной из важнейших задач современной фармации является расширение сырьевой базы для получения новых лекарственных средств природного происхождения.
Перспективным растительным сырьем для получения фитопрепаратов с ранозаживляющим, противовоспалительным, антиоксидантным и гастропротекторным действием являются растения рода бархатцы (Tagetes L.) семейства Asteraceae.
Род бархатцы насчитывает около 56 видов и более 600 форм и сортов одно- и многолетних, преимущественно травянистых растений, распространенных по всему миру. Многочисленные исследования доказывают, что растения рода Tagetes L. накапливают широкий спектр биологически активных веществ: каротиноиды, флавоноиды, эфирное масло, аминокислоты, органические кислоты, витамины и др. [1]. В народной медицине бархатцы известны как средство для лечения заболеваний почек, желудочно-кишечного тракта, кожи. Листья бархатцев рекомендуется применять при фурункулах и карбункулах, а также в качестве глистогонного средства, сок бархатцев - при ревматизме, простуде, бронхите [2-6]. Современные исследования показали, что экстракты бархатцев и индивидуальные соединения, полученные из них при экстракции, проявляют антибактериальную, антимикробную, антиоксидантную, ранозаживляющую, гастро- и гепатопротекторную активность [1, 4, 7, 8].
Разработка методик извлечения экстрактов из сырья растений рода Tagetes L. и исследование их состава способствует расширению сырьевой базы для получения новых перспективных фитопрепаратов.
Целью нашей работы было определение содержания флавоноидов в липофильном экстракте бархатцев прямостоячих высокорослой формы сорта «Гаваи» (Tagetes erecta plena L. var. «Hawaji»).
Материалы и методы. Растительное сырье бархатцев прямостоячих высокорослой формы сорта «Гаваи» заготавливали из культивированных растений в различных регионах Украины во время вегетации в 2012-2014 г.г. Сырье подготовлено к анализу и получению экстракта согласно действующим требованиям.
Липофильный экстракт бархатцев прямостоячих получали путем экстрагирования растительного сырья маслом кукурузным рафинированным дезодорированным [9].
Качественное определение флавоноидов в полученном экстракте проводили методом тонкослойной хроматографии в системе н-бутанол-уксусная кислота-вода (4:1:5). Флавоноиды идентифицировали по флуоресценции в УФ-свете и расположению пятен.
Определение количественного содержания флавоноидов в исследуемом экстракте проводили следующим образом:
1,5 мл (точная навеска) исследуемого экстракта вносили в мерную колбу объемом 50 мл, добавляли петролейный эфир и встряхивали до полного смешивания. Доводили раствор тем же растворителем до метки (раствор 1).
5 мл раствора 1 переносили в мерную колбу объемом 25 мл и доводили тем же растворителем до метки (раствор 2)
Определяли оптическую плотность раствора 2 при помощи спектрофотометра Specord-200 Analytic Jena UV-vis при длине волны 269 нм в кювете с толщиной слоя 10 мм. В качестве компенсационного раствора использовали петролейный эфир, в качестве раствора сравнения - РСО патулетина.
Содержание флавоноидов (%) в пересчете на патулетин рассчитывали по формуле:
X= ,
где А1 - оптическая плотность исследуемого раствора;
А0 - оптическая плотность РСО патулетина;
m1 - навеска сырья, г;
m0 - навеска РСО патулетина, г.
Результаты и обсуждение. Получен экстракт представляет собой густую маслянистую жидкость оранжевого цвета с характерным вкусом и запахом. В экстракте по величинам Rf определено присутствие флавоноидов патулетина и патулетрина. Определение количественное содержание флавоноидов в исследуемом экстракте было проведено методом спектрофотометрии. Результаты приведены на рис. 1. Метрологические характеристики результатов исследований приведены в табл. 1.
33
Рис. 1. УФ-спектр флавоноидов в липофильном экстракте из соцветий бархатцев прямостоячих высокорослой формы сорта «Гавайи»
Таким образом, липофильный экстракт из соцветий бархатцев прямостоячих высокорослой формы сорта «Гавайи» содержит значительные количества флавоноидов, что обуславливает широкий спектр его биологической активности и делает перспективным его использование для получения новых фитопрепаратов с ранозаживляющим, гастропротекторным, антиоксидантным и противовоспалительным действием.
Выводы
- Разработана методика получения липофильного экстракта бархатцев прямостоячих высокорослой формы сорта «Гавайи».
- Проведено качественное и количественное определение флавоноидов в составе липофильного экстракта. Содержание суммы флавоноидов составляет до 0,7120±0,0060 % в пересчете на патулетин.
- Липофильный экстракт, полученный из соцветий бархатцев прямостоячих высокорослой формы сорта «Гавайи» является перспективным лекарственным средством для получения новых фитопрепаратов.
Литература
- Phytochemicals and Their Biological Activities of Plants in Tagetes L. [Текст] / XU Li-wei[et al.] // Chibese Herbal Medicines. - 2012. - № 4(2). - P. 103-117.
- An Alternative to Synthetic Acid base Indicator - Tagetes erecta Linn [Текст] / A. Elumalai [et al.] // Asian Journal Research Chem. - 2012. - № 5 (2). - P. 218-220.
- Antinociceptive and Anti-Inflammatory Effects of Solvent Extracts of Tagetes erectus Linn (Asteraceae) [Текст] / N. V. Shinde [et al.] // Tropical Journal of Pharmaceutical Research. - 2009. - № 8 (4). - P. 325-329.
- Gopi G. A Concise Review on Tagetes erecta [Текст] / G. Gopi, A. Elumalai, P. Jayasri // International Journal of Phytopharmacy Research. - 2012. - Vol.3, № 1. - P. 16-19.
- Guterrez R. M. P. Antioxidant activity of Tagetes erecta essential oil [Текст] / R. M. P. Gutierrez, H. H. Luna, S. H. Garrido // Journal of the Chilean Chemical Society. - 2006. - Vol. 51, № 2. - P. 883-886.
- Kiranmai M. Anti Bacterial Potential of Different Extracts of Tagetes erecta Linn [Текст] / M. Kiranmai, M. Ibrahim // International Journal of Pharmacy. - 2012. - № 2 (1). - P. 90-96.
- Antibacterial and Antifungal Activities of Different Parts of Tagetes patula: Preparation of Patuletin Derivatives [Текст] / S. Faizi [et al.] // Pharmaceutical Biology. - 2008. - Vol. 46, № 5. - P. 309-320.
- Kiranmai M. Combined Wound Healing Activity of Gymnema sylvestere and Tagetes erecta Linn [Текст] / M. Kiranmai, S. M. Kazim, M. Ibrahim // International Journal of Pharmaceutical Applications. - 2011. - Vol 2, is. 2. - P. 135-140.
- Пат. 103390 Украіна МПК7 А 61 К 35/78, А 61 К 47/44, А 61 Р 17/02. Спосіб отримання ліпофільного екстракту з рослинноі сировини, що мае ранозагоюючу та протизапальну активність [Текст] / О. О. Малюгіна, О. В. Мазулін, Г. П. Смойловська, І. Ф. Беленічев (Украіна). - № u 2015 06718; заяв. 07.07.2015; опубл. 10.12.2015, Бюл. № 23. - 4 с.