Изучение химического состава соцветий и листьев carduus nutans l., carduus acanthoides l.

Резюме

В работе проведено изучение химического состава соцветий и листьев перспективных видов рода чертополох (Carduus L.): поникшего (Carduus nutans L.) и акантовидного (Carduus acanthoides L.). Виды рода Carduus L. относят к отделу Magnoliophyta (покрытосеменные), классу Magnoliopsida (двудольные), порядку Asterales (астроцветные), семейству Asteraceae (астровые). Род насчитывает до 120 видов, широко распространенных в странах Западной и Восточной Европы, Азии, Северной Африки. В странах СНГ насчитывают свыше 30 представителей. Растения достаточно обычные представители природных биоценозов. Постоянно встречаются по обочинам дорог, полей, на сухих склонах, пустырях, пастбищах, удобренных почвах. В народной медицины многих стран мира известны гепатопротекторные, противовоспалительные, антиоксидантные свойства настоев из видов рода Carduus L. Изучение химического состава соцветий и листьев методом ВЭЖХ, стандартизация растительного сырья, имеет теоретическое и практическое значение.

Ключевые слова: соцветия, лист, чертополох, высокоэффективная жидкостная хроматография, флавоноиды, гидроксикоричные кислоты.

В настоящее время патология печени занимает ведущее место среди заболеваний органов пищеварения. По данным ВОЗ в мире проживает более 2 млрд. больных з данной патологией. На Украине за последние 10 лет был зафиксирован рост заболеваний печени на 20,1%, хроническим гепатитом на 76,6%, в том числе на 68,8 % среди подростков, цирозом печени на 75,6 % [ 3 ]. Среди препаратов гепатопротекторного действия, наиболее многочисленна (до 52%) група растительного происхождения. Многовековым опытом народной медицины, было от обрано значительное количество растений и их сочетаний для лечения и профилактики данной патологии. Они имеют широкий спектр терапевтической активности, обладают минимальными побочнями проявлениями и противопоказаниями, относительно доступны по цене [ 3, 10, 11 ].

Установлено, что биологическая активность видов рода Carduus L. связана с накоплением в траве растений биологически активных флавоноидов и отдельных гидроксикоричных кислот, а также дубильных веществ, простих фенолов, органических и аминокислот, кумаринов, неорганических элементов [ 5, 6, 12, 13, 15 ].Наиболее распространенными видами рода являются: чертополох поникший (Carduus nutans L.) и ч. акантовидный (Carduus acanthoides L.). Оба вида образуют практически неограниченную сырьевую базу для заготовки и могут успешно культивироваться [ 8, 9, 14 ].

Вид Carduus nutans L. - это многолетнее растение с прямостоячим, умеренно колючим стеблем, высотой от 90 до 120 см. Листья перисто надрезанные, зубчатые, колючие, серого цвета. Их длина существенно снижается от основания к верхушке. Имеет характерные для астровых цветочные корзинки, очень колючие, крупные, шарообразные, поникшие, ярко-пурпурные, состоящие из трубчатих цветков. Плод обычная семянка, желто-коричневая, ребристая, длиной 8-10 мм, по краю з зубчатым ободком, который заканчивается хохолком. Период цветения наблюдается в июне-августе [ 5, 8, 9 ].

Вид Carduus acanthoides L. - это двухлетнее, неприхотливое растение с жестко колючим стеблем, высотой до 200 см. Листья вираженно членисто раздельные, зубчатые, колючие, характерного серого цвета. Их длина и площадь значительно снижается от основания к верхушке. Цветки многочисленные, пурпурные или бело-розовые, собраны в характерные для астровых одиночные корзинки на верхушке стебля и его многочисленных веток. Соцветия, типичные для астровых корзинки. Плод характерная семянка, желто-коричневая, ребристая, длиной 8-10 мм, по краю с зубчатым ободком, заканчивающимся хохолком. Период цветения наблюдается в июле- сентябре [ 5, 8, 9 ]. До настоящего времени системных фитохимических исследований Carduus nutans L. и C. acanthoides L. не проводилось.

Цель исследования в изучении химического состава соцветий и листьев Carduus nutans L., Carduus acanthoides L. методом ВЭЖХ.

Материалы и методы. Растительное сырье (соцветия с прилегающими листьями) было заготовлено в различных регионах Украины в период цветения 2013-2016 гг., в соответствии с требованиями ДФУ 1.2 [ 2 ]. Сушка проведена у сушильном шкафе “Termolab СНОЛ 24/350” (Украіна) (t=40⁰C) при температуре не более 40⁰С в течение 14 час.

Для идентификации флавоноидов и гидроксикоричных кислот применяли метод ВЭЖХ на хроматографе “Agilent 1260 Infinity HPLC System OpenLAB CDS Software”. Использовали хроматографическую колонку (l=150 мм), (d=2,1 мм), заполненную сорбентом “ZORBAX-SB C18” (30 мм x 4,6 мм; d=1,8 мкм). В качестве подвижных фаз применяли: А: H2O, 0,1% TFA; B: CH3CN, 0,1% TFA [ 1, 15 ]. Анализировали этанольные извлечения (1:100). Полученные данные представлены на рис. 1.,2.

Результаты и обсуждение. В сравнении со стандартними образцами, было идентифицировано до 5 флавоноидов и 8 гидроксикоричных кислот (кемпферол-З-О-в-О-глюкопиранозид, кемпферол, апигенин-7-О-в-О-глюкопиранозид, лютеолин, апигенин, кафтаровая, катеховая, хлорогеновая, изохлорогеновая, неохлорогеновая, п-оксибензойная, кофейная, п-кумаровая кислоты).В преобладающих концентрациях присутствовали флавоноиды, производные апигенина. В результате предварительно проведенных исследований токсичности лиофилизированных экстрактов из травы растений установлено, что при внутрижелудочковом введении крысам, их можно отнести к VI классу токсичности (LD50> 15000 мг/кг; относительно безопасные вещества). Они не оказывают аллергизирующего и местно раздражающего действия [ 4, 7, 10, 11 ].

В дозе 100 мг/кг) на модели токсического гепатита, вызванного дихлорэтаном, проявляют вираженную гепатопротекторную активность.По основным показателям биологическая активность не ниже, чем у референт-препарата “Карсил” АО «Софарма» (100 мг/кг), с выраженным антиоксидантным действием и возобновлением детоксикационной функции печени крыс.

Выводы:

1. Методом ВЭЖХ установлен химический состав растительного сырья Carduus nutans L., Carduus acanthoides L., идентифицировано до 5 флавоноидов и 8 гидроксикоричных кислот.
2. Впервые предложен метод стандартизации травы растений по содержанию флавоноидов, производных апигенина, с пересчетом на апигенин-7-О-в-О-глюкопиранозид.
3. Трава Carduus nutans L., Carduus acanthoides L . перспективна для получения нетоксичных фитопрепаратов з вираженым гепатозащитным, гепатопротекторным и антиоксидантным действием.

Источники финансирования. Исследования выполнены в рамках бюджетной НИР на тему «Фармакогностическое и экологическое изучение видов родов: валериана, бархатцы, тысячелистник, полынь, горец, чебрец, душица, девясил, подорожник флоры Украины и получение лекарственных средств кровоостанавливающего, противовоспалительного и диуретического действия» (№ государственной регистрации 0112U005645) кафедры фармакогнозии, фармацевтической химии и технологии лекарств факультета последипломного образования Запорожского государственного медицинского университета.

Литература

1. Аналитическая химия в создании, стандартизации и контроле качества лекарственных средств / Под ред. член. - кор. НАН Украины В. П. Георгиевского. - Х.: НТМТ, 2011. - т. 2. - 474 с.
2. Державна Фармакопея Украіни. Доповнення 2. / Держ. п-во “Науково- експертний фармакопей- ний центр” . - 1-е вид. - Х. : РІРЕГ, 2004. - 617 с.
3. Доркина Е. Г. Изучение гепатозащитного действия природних флавоноидных соединений / Е. Г. Доркина // Экспериментальная и клиническая фармакология.-2004.-т.67, №6. - С. 41 - 44.
4. Иванова В. В. Изучение гепатопротективного действия растительного экстракта коры березы при экспериментальном гепатите, вызванном четыреххлористом углеродом /Иванова В.В., Лигостаева Ю.В., Потеряева О.Н. // Фундаментальные исследования. - 2013. - № 2-3. - С. 277-279
5. Кьосев П. А. Лекарственные растения: самый полный справочник / П. А. Кьосев. М.: Эксмо - Пресс, 2011. - 939 с.
6. Кортиков В.Н. Полная энциклопедия лекарственных растений / В. Н. Кортиков, А. В. Кортиков. - Ростов н/Д: Феникс, 2008. - 797 с.
7. Кукес В. Г. Методические указания по доклиническому изучению новых препаратов, разрабатываемых из природного сырья / Кукес В. Г., Булоев В.М., Колхир В. К. - М.: Минздрав РФ,-2005. - 348 с.
8. Определитель высших растений Украины /Д. Н. Доброчаева [и др.] ; под ред. Ю. Н. Прокудина.- К.: Наук. Думка, 1987. - 548 с.
9. Цвелев Н. Н. Определитель сосудистых растений Северо-Западной России / Н. Н. Цвелев. - СПб.: Изд - во СПУВА, 2000. -781 с.
10. Dimitrova-Dyalgerova I. Phenolic profile and in vitro antioxidant activity of endemic Bulgarian Carduus species / I. Dimitrova-Dyalgerova, I. Zheley, D. Mihaylova // Pharmacognosy Magazine. - 2015 - Vol. 11, N 4. - P. 575 - 579.
11. Hepatoprotective effects of Turkish folk remedies on experimental liver injuri /G. Aktay, D. Deliorman, E. Ergun [et al.] // Journal of Ethnopharmacology.- 2000. - Vol. 73, N 1-2.- P. 121 - 129.
12. Jordon - Thaden I. E. Chemistry of Cirsium and Carduus: A role in ecological risk assessment for biological control of weeds / I. E. Jordon - Thaden, S. M. Louda // Biochemical systematic and Ecology. - Vol. 31, № 12. - P. 1353 - 1396.
13. Kozyra M. The analysis of flavonoids in the flowering herbs of Carduus acanthoides L. /M. Kozyra, K. Glowinak, M. Roguszewska // Current Issues in Pharmacy and Medicinal Sciences. - 2013. - Vol. 26. - №1. - s. 10 - 15.
14. Rauschert E. S. J. Coexistence patterns of two invasive species, Carduus nutans and C. acanthoides, at three spatial scales / E. S. J. Rauschert, K. Shea, O. N. Bjornstad // Biol. Invasions . - 2012. - Vol. 14, N l. - Р. 151 - 164.
15. Simultaneous Determination of Bioactive Flavonoids in Some Selected Korean Thistles by Hight - Performance Liquid Chromatography /N. T. Ph. Thao, T. D. Cuong, T. M. Hung, J. H. Lee et al. //Arch Pharm. Res. - 2011. - Vol. 34,№ 3. - Р. 455 - 461.