Полифенольные соединения соцветий перспективных видов рода cirsium l.

Резюме

В работе проведено изучение химического состава соцветий перспективных видов рода бодяк (Cirsium L.): обыкновенного (Cirsium vulgare (Savi) Ten.) и полевого (Cirsium arvense (L.) Scop. Род Cirsium L. семейства астровых (Asteraceae) в современной мировой флоре насчитывает до 300 видов многолетних травянистых растений. Они широко распространены по территории Европы, Северной Африки, Северной и Центральной Америки. В странах СНГ идентифицировано более 30 основних видов. Перспективными для изучения и дальнейшего использования в медицинской практике являються бодяк обыкновенный (Cirsium vulgare (Savi) Ten.) и бодяк полевой (Cirsium arvense (L.) Scop.). Настой травы растений и филогенетично близких к ним видов используют в научной и народной медицине многих стран в качестве еффективных противовоспалительных и противоопухолевых лекарстивенных средств. Изучение химического состава соцветий растений методом ВЭЖХ, стандартизация растительного сырья, имеет теоретическое и практическое значение для его внедрения в медицинскую практику.

Ключевые слова: соцветия, бодяк, высокоэффективная жидкостная хроматография, флавоноиды, гидроксикоричные кислоты.

Введение. Фитохимическими исследованиями, проведеннями в разных странах установлено, что биологическая активность лекарственных средств из растительного сырья видов рода Cirsium L. связана с накопленим биологически активных флавоноидов и гидроксикоричных кислот [ 9, 11, 12, 13 ]. Известно, что производные бензо-ү-пирона проявляют широкую и разноплановую биологическую активность: противовоспалительную, антиоксидантную, антитоксическую, смазмолитическую, Р-витаминную, противовирусную, репаративную, противомикробную и др. В видах рода Cirsium L. были идентификованы производные флавонов (лютеолина, апигенина), которые проявляют противовоспалительное, мочегонное и спазмолитическое действие и флавонолов (рутина, кверцетина, кемпферола, кверцетагетина) з вираженною Р-витаминной, противовоспалительной, гипоазотемичной и мочегонной активностью [3,4,10]. Гидроксикоричные кислоты обачно накапливаются в растениях совместно с флавоноидами. Структура этих соединений объединяет карбоксильные, фенольне и гидроксильные группы, объединенные с ароматическим кольцом.Соединения проявляют выраженную противовоспалительную и ранозаживляющую активность [12].

Бодяк обыкновенный (Cirsium vulgare (Savi) Ten.) известен как типичное сорное растение, произрастающее по полям, огородам, лесным полянам, вдоль дорог, в кустарниках. Это двулетнее хорошо развитое растение, высотой 70-120 см, с мощным стержневым корнем и прямостоячим разветвленным стеблем. Листья жесткие, выемчатые, перисто раздельные, колючие, снизу серовато опушены волосками. Соцветия типичные для астровых корзинки, собранные в метелки: колючие, одиночне, крупные, пурпурове, сотоящие из трубчатых цветков. Размножается семенами и корневыми побегами. Цветет в июне - августе. Плод семянка, семена обратно - яйцевидные, черно - бурого цвета [ 4, 6, 7, 8, 12 ].

Бодяк полевой (Cirsium arvense (L.) Scop.). известен как часто встречающееся сорное растение, произрастающее на полях, огородах, лесных полянах, вдоль дорог, в кустарниках. Это

двулетнее хорошо развитое растение, высотой 90-160 см. Имеет прямой, разветвленный стебель, повсеместно покрытый волосками. Листья цельнокрайние, зубчатые, с мощными колючками по краям, перисто рассеченные. Корневая система стержневая, мощно развитая. Размножается семенами и корневыми побегами. Цветет в июле - сентябре. Образует типичные для астровых соцветия корзинки, собранные в метелки з яркими розовими цветками. Плод семянка, семена обратно - яйцевидные, черно - бурого цвета [ 4, 6, 7, 8 ].

Для применения в современной народной и научной медицине многих стран преимущественно готовят настои из соцветий или травы растений (1:10), которые применяют в качестве противовоспалительных, противоопухолевых и ранозаживляющих средств при лечении ран, фурункулов, геморроидальных шишек [ 9, 10, 13 ] .

При этом следует отметить, что до настоящего времени соцветия Cirsium vulgare (Savi) Ten. и Cirsium arvense (L.) Scop. следует отнести к недостаточно изученным по содержанию основных биологически активных соединений. Комплексных исследований с применением современных методов анализа также не проводилось.

Цель исследования в изучении химического состава соцветий Cirsium vulgare (Savi) Ten. и Cirsium arvense (L.) Scop. методом ВЭЖХ.

Материалы и методы. Объектом иссследований были соцветия Cirsium vulgare (Savi) Ten. и Cirsium arvense (L.) Scop., заготовленые в период цветения (июнь - сентябрь 2013-2015 гг.), в соответствии с требованиями ДФ У 1.2.[ 2 ]. Сушка проведена у сушильном шкафе “Termolab СНОЛ 24/350” (Украина) при температуре не более 40⁰С в течение 12 час. Для идентификации флавоноидов и гидроксикоричных кислот применяли метод ВЭЖХ на хроматографе в соцветиях Cirsium vulgare (Savi) Ten. и Cirsium arvense (L.) Scop. применяли метод ВЭЖХ хроматографе “ Shimadzu LC-20 Prominence” с УФ-детектором (Японія). Хроматографическая колонка Phenomenex Luna C18(2) (l=250 мм), с внутренним диаметром (d=4,6 мм) и раз мером частиц 5 мкм. Температура колонки - 35⁰С; длина волны детектирования - 330 нм; скорость потока подвижной фазы - 1 мл/мин.; объем пробы - 5 мкл. Подвижная фаза: Элюент А: 0,1% раствор трифторуксусной кислоты в воде очищенной; элюент Б: 0,1% раствор трифторуксусной кислоты в ацетонитриле. Идентификацию компонентов проводили по времени удерживания и соответствия УФ - спектров TIQHCCTTILT1KJ TiCTTrCCTTJQAT—ГТРтРПТ'Ш Г 1 1 TTfA TTATLrCTJTJLTC TTQТІТІТ.ТС TTTAC TTCTQTl TCTILT TIQ IATTC 1 9

1. Кафтаровая кислота 2. Протокатехова кислота 3. Хлорогенова кислота 4. Неохлорогеновая кислота 5. п-оксибензойная кислота; 6. Кофейная кислота 7. Сиреневая кислота; 8. п-кумаровая кислота 9.Рутин10.Гиперозид 11.Апигенін-7-О-в-О-глюкопиранозид 12. Кемпферол-3-О- метиловийэфир;13.Кверцетин;14.Линарин;15.Лютеолин-5-О-в-О-глюкопиранозид;16. Лютеолин -7-О-в-Отлюкопира нозид 17.Гиспидулин-7-О-неогесперидозид 18.Лютеолин;19. Пектолинарин; 20. Апигенин; 21. Акацетин ; 22 Кемпферол.

1. Кафтаровая кислота 2. Протокатеховая кислота; 3. Хлорогеновая кислота 4. Неохлорогеновая кислота 5. Кофейная кислота 6. Рутин 7. Гиперозид 8. Апигенин-7-О-в-О-глюкопиранозид 9. Кверцетин-3-глюкозид; 10.Кемпферол-3-О-метиловий эфир11Кемпферол-3-О-в—О-глюкопирано- зид 12. Кверцетин 13. Линарин 14. Лютеолин-5-О-в-О-глюкопиранозид; 15.Лютеолин-7-О-в-О- глюкопиранозид; 16. Гиспидулин-7-О-в—О-глюкопиранозид 17. Лютеолин 18. Пектолинарин 19. Апигенин 20. Акацетин 21. Кемпферол.

Результаты и обсуждение. Полученные результаты, в сравнении со стандартними образцами, свидетельствуют о накоплении в период цветения в соцветиях Cirsium vulgare (Savi) Ten. 14 флавоноидов и 8 гидроксикоричних кислот. Основними идентифицированными соединениями были:линарин, лютеолин-7-О-в—О-глюкопиранозид, апигенин-7-О-в—О-глюкопиранозид, апигенин, кемпферол-3-О-метиловий эфир, гиперозид, лютеолин, рутин, кверцетин, лютеолин-5- O—e—D-глюкопиранозид, гиспидулин-7-О-в—О-глюкопиранозид, хлорогеновая кислота.

В соцветиях Cirsium arvense (L.) Scop. установлено накопление 16 флавоноидов и 5 гидроксикоричных кислот. Основными идентифицированными соединениями были: линарин, апигенин, лютеолин, лютеолин-7-О-в—О-глюкопиранозид, кемпферол, гиспидулин-7-O-e—D- глюкопиранозид, кемпферол-3-О-метиловий эфир, кемпферол-З-О-в^-глюкопиранозид, кверце- тин-3-О-в^-глюкопиранозид,лютеолин-5-О-в^-глюкопиранозид,гиперозид, рутин, хлорогеновая кислота.

Впервые нами в исследуемых объектах были идентифицированы: линарин, кемпферол-3-О- метиловий эфир, гиспидулин-7-О-в^-глюко-пиранозид, кемпферол-З-О-в^-глюкопиранозид, кверцетин-З-О-в^-глюко-пиранозид, лютеолин-5-О-в^-глюкопиранозид, кафтаровая, п- кумаровая, кофейная, п-оксибензойная, сиреневая, протокатеховая и неохлорогеновая кислоты.

В преобладающих концентрациях присутствовали флавоноиды, производные лютеолина.

В результате исследований токсичности лиофилизированных экстрактов из соцветий растений установлено, что при внутрижелудочковом введении крысам, их можно отнести к VI классу токсичности (LD50> 20000 мг/кг; относительно безопасные вещества). При этом не установлено аллергизирующего и местно раздражающего действия [ 5 ].

В дозе 100 мг/кг на модели токсического гепатита, вызванного дихлорэтаном, лиофилизированные экстракты проявляют вираженную гепатопротекторную и антиоксидантную активность. По основным показателям их биологическая активность не ниже, чем у референт- препарата “Карсил” АО «Софарма» (100 мг/кг). На модели каррагининового воспаления установлено достоверно выраженное противовоспалительное действие.

142

Выводы:

1. Методом ВЭЖХ установлен химический состав соцветий Cirsium vulgare (Savi) Ten., Cirsium arvense (L.) Scop., идентифицировано до 16 флавоноидов и 8 гидроксикоричных кислот.
2. Впервые предложен метод стандартизации травы растений по содержанию флавоноидов, производных лютеолина, с пересчетом на лютеолин-7-О-в-О-глюкопиранозид.
3. Растительное сырье Cirsium vulgare (Savi) Ten., Cirsium arvense (L.) Scop. перспективно для получения нетоксичных фитопрепаратов с вираженым гепатопротекторным и противовоспалительным действием.

Источники финансирования. Исследования выполнены в рамках бюджетной НИР на тему «Фармакогностическое и экологическое изучение видов родов: валериана, бархатцы, тысячелистник, полынь, горец, чебрец, душица, девясил, подорожник флоры Украины и получение лекарственных средств кровоостанавливающего, противовоспалительного и диурети-ческого действия» (№ государственной регистрации 0112U005645) кафедры фармакогнозии, фармацевтической химии и технологии лекарств факультета последипломного образования Запорожского государственного медицинского университета.

Литература

1. Аналитическая химия в создании, стандартизации и контроле качества лекарственных средств] / Под ред. член. - кор. НАН Украины В. П. Георгиевского. - Х.: НТМТ, 2011.- т. 2. - 474 с.
2. Державна Фармакопея Украіни. Доповнення 2. / Держ. п-во “Науково- експертний фармакопейний центр” . - 1-е вид. - Х. : РІРЕГ, 2004. - 617 с.
3. Доркина Е. Г. Изучение гепатозащитного действия природных флавоноидных соединений / Е. Г. Доркина // Экспериментальная и клиническая фармакология. - 2004. - С. 41 - 44.
4. Кортиков В. Н. Полная энциклопедия лекарственных растений / В. Н. Кортиков, А. В. Кортиков. - Ростов н/Д.: Изд-во дом “Проф - Пресс”, 2002. - 800 с.
5. Кукес В.Г.Методические указания по доклиническому изучению новых препаратов, разрабатываемых из природного сырья/Кукес В.Г.,Булоев В.М.,Колхир В.К.-М.:Минздрав РФ,- 2005. - 348 с.
6. Кьосев П. А. Лекарственные растения: самый полный справочник /П.А.Кьосев.М.:Эксмо - Пресс, 2011. - 939 с.
7. Определитель высших растений Украины [Текст] / Д. Н. Доброчаева [и др.] ; под ред. Ю. Н. Прокудина.- К. : Наук. Думка, 1987. - 548 с.
8. Черепанов С. К. Сосудистые растения России и сопредельных государств (в пределах бывшего СССР). Русское издание [Текст ] / С. К. Черепанов. - СПб., 1995. - 992 с.
9. Chemical Fingerprint and Quantitative Analysis of Cirsium setosum by LC /L.Yauhua, S. ei, L. Xiahua, W. Dongzhiw, Z. Xiaoli // Chromatographia. - 2009. - V. 70, № 1 - 2, p. 125 - 130.
10. In vitro antimicrobial activity of the Chemical Constituents of Cirsium arvense (L.) Scop. / Ul Zia, K. Haq, K. Shafiullah, C. Yongmei et al. // Journal of medical plant research. - 2013. - Vol. 7, № 25. - P. 1894 - 1898.
11. Jordon - Thaden I. E. Chemistry of Cirsium and Carduus: A role in ecological risk assessment for biological control of weeds /I. E. Jordon - Thaden, S. M. Louda // Biochemical systematic and Ecology. - Vol. 31, № 12. - P. 1353 - 1396.
12. Kozyra M. Phenolic acids in extracts obtained from the flowering herbs of Cirsium vulgare (savi) Ten. Growing in Poland /M. Kozyra, K. Glowniak // Acta Societatis Botanicorum Poloniae.- 2013.-Vol.82, № 4. - P. 325 - 329.
13. Nazaruk J. Components and antioxidant activity of fruits of Cirsium palustre and Cirsium rivulare /J. Nazaruk, A. Wajs - Bonikowska, R. Bonikowski // Chemistry of Natural Compounds. - 2012.- Vol.48, № 1. - P. 9 - 10.