Полипозный риносинусит - хроническое воспалительное заболевание слизистой оболочки полости носа и околоносовых пазух, характеризующееся образованием и рецидивирующим ростом полипов, состоящих преимущественно из отечной ткани, инфильтрированной эозинофилами [1].
Международные совещательные комитеты, изданные руководства, монографии подчеркивают полиэтиологичность этого заболевания и сложный патогенез. Появился целый ряд новых способов диагностики, позволяющих при правильной и своевременной постановке диагноза успешно лечить этот недуг [2].
Актуальность работы связана с высокой распространенностью полипозного риносинусита, которая в разных странах мира колеблется. По данным мультицентровых исследований, проведенных по программе ISAAC в 56 странах мира, этот показатель доходит до 40% (von Mutius E., Weiland S.K., Keil U., 1999). Особую озабоченность вызывает тот факт, что при несвоевременном выявлении и лечении полипозный риносинусит может трансформироваться в более тяжелое заболевание - бронхиальную астму [3].
Цель работы:
- Изучить состояние иммунного статуса больных с полипозным риносинуситом (содержание субпопуляций Т-лимфоцитов: CD3+, CD4+, CD8+, CD16+, CD72+ -лимфоцитов, концентрации иммуноглобулинов класса М, класса G класса A и класса Е (IgM, IgG, IgA, 1ĝЕ) и циркулирующих иммунных комплексов (ЦИК) в сыворотке крови).
- Изучить содержание цитокина IL-4 в сыворотке крови, а также его концентрации в смывах с мазков-отпечатков со слизистой носа при полипозном риносинусите.
Научная новизна:
Нами доказана атопическая природа полипозного риносинусита с помощью ряда клинико-иммунологических данных. А наиболее информативным из них является повышение содержания «атопического» цитокина ИЛ-4 в секретах носа. Самый частый вопрос, который задают лечащие врачи: «Для чего необходимо изучать уровни цитокинов?». В совокупности с лабораторными, инструментальными методами обследования, количественное определение уровня IL-4 имеет важное значение при оценке иммунного статуса организма. В крови здоровых людей IL-4 практически не определяется.
Количества цитокинов могут быть использованы в определении дестабилизации клинического течения широкого круга заболеваний человека, развитии различных осложнений [4].
Наиболее оптимальным является применение диагностических иммуноферментных тест-систем для оценки цитокинового статуса как на местном, так и на системном уровне при различных патологиях. К тому же иммуноферментные методы высокоспецифичны, просты и быстры в исполнении и являются существенным дополнением к пониманию патогенеза заболеваний [5]. В настоящее время считается доказанным, что ИЛ-4 является «атопическим» и при атопических аллергических заболеваниях повышается его уровень. Предполагается, что основная часть ИЛ-4, продуцируется тучными клетками, эозинофилами, базофилами и связана с клетками шокового органа, в частности, со слизистой оболочкой полости носа.
Для взятия отпечатков с поверхности слизистой оболочки носа для определения локального ИЛ-4 у больных с полипозным риносинуситом, также как и при аллергическом рините, использовали обычную фильтровальную бумагу размером 1 см² (отрезанную ножницами), которую прикладывали на предварительно очищенную физиологическим раствором слизистую оболочку переднего конца нижней носовой раковины. Время аппликации составляло в среднем 15 секунд. После этого пропитанную фильтровальную бумагу полностью с помощью пинцета погружали в эпендорф с 0,1мл 0,9% раствора натрия хлорида. Время экспозиции равнялось 1 часу. Затем фильтровальную бумагу удаляли из эпендорфа пинцетом и пробирку-эпендорф с полученным раствором цитокинов замораживали при температуре минус 35ºС. Перед постановкой анализа исследуемые образцы были извлечены из холодильника и прогреты при температуре 18-25ºС в течение 30 мин. Растворы из флаконов отбирали только одноразовыми индивидуальными наконечниками для пипеток.
Определение локального ИЛ-4 проводилось методом твердофазного иммуноферментного анализа с помощью специального набора фирмы "Вектор-Бест" (Новосибирск).
Принцип метода основан на твердофазном «сэндвич»-варианте иммуноферментного анализа. Специфическими реагентами набора являются моноклональные антитела к IL-4, сорбированные на поверхности лунок разборного полистирольного планшета.
После сбора анамнеза приступали к изучению объективного состояния ЛОР-органов 43 пациентам с полипозным риносинуситом. Осмотр ЛОР-органов осуществлялся эндоскопически, неоднократно, как до оперативного лечения, так и после операции. Этим пациентам провели исследование иммунного статуса, в который входит также исследование цитокинового профиля на примере ИЛ-4.
Таблица 1 - Лейкоцитарная формула крови у больных ПРС (М ± m)
|
Показатель |
ПРС (n=43) |
Контроль (n=22) |
|
Лейкоциты |
6,48±0,127 |
6,1 ± 0,35 |
|
Нейтрофилы п/я |
3,96±0,159 |
3,5 ± 0,17 |
|
Нейтрофилы с/я |
77,46±0,442* |
53 ± 1,21 |
|
Моноциты |
5,76±0,189 |
5,2 ± 0,09 |
|
Эозинофилы |
7,49±0,209* |
4 ± 1,45 |
|
Лимфоциты % |
30,32±0,477 |
30 ± 0,07 |
|
Лимфоциты абс. |
1,42±0,083 |
1,2 ± 0,64 |
|
(p<0,05)* |
||
Возможно, сегментоядерный нейтрофилез характерен для имеющего место воспалительного процесса со стороны ЛОР- органов, а увеличенное количество эозинофилов
Таблица 2 - Показатели иммунного статуса у больных ПРС (М ± m) раза) свидетельствует о сенсибилизированности организма больных.
|
Показатель |
(n=43) (%) |
Контроль (n=22) |
|
СД-3 Т-лимф. |
63,01±0,739 |
65,8 ± 2,91 |
|
СД-4 Т-хелп. |
38,40±0,470 |
39,6 ± 2,10 |
|
СД-8 Т-киллеры |
31,83±0,515 |
26,2 ± 2,33 |
|
СД-16 NK |
17,12 ± 0,26(%) |
18,5± 0,54(%) |
|
СД-4/СД-8 (ИРИ) |
1,2 |
1,5 |
|
СД-72 В-лимф. |
11,9 ± 1,7 |
10,4 ± 1,7 |
|
IgM, г/л |
1,69±0,076 |
0,9±0,1 |
|
IgG, г/л |
13,24±0,282 |
9,4±0,1 |
|
IgA, г/л |
3,0±0,091* |
4,8±0,2 |
|
IgE, МЕ/мл |
469,67±26,271* |
60,0 ± 35,5 |
|
ЦИК(ед.отн.плотн.) |
85,9 ± 6,2 * |
30,1 ± 2,7 |
|
IL-4 в сыворотке крови, пг/мл, (n=40) |
5,4 ± 0,7 * |
1,2 ± 0,5 |
|
IL-4 в секр., пг/мл, (n=23) |
6,1 ±1,5 * |
Отсутствует |
|
Спонтанный НСТ-тест |
18,91±0,469 |
23,73±0,510 |
|
Индуцированный НСТ-тест |
50,41±3,234 |
45,65±1,043 |
|
(p<0,05)* |
||
Как видно из таблицы резких изменений в содержании иммунокомпетентных клеток не наблюдалось. По-видимому, это связано с длительностью хронического воспалительного процесса. При этом наблюдается незначительное снижение содержания IgA в сыворотке крови. Причем, содержание IgE у них же повышено в 4,5 раза (p<0,05). Также было отмечено повышение уровней ЦИК почти в 3 раза (p<0,05). По-видимому, причиной этому служит присоединение бактериальных инфекций при полипозном риносинусите.
В результате проведенного исследования было выявлено повышение содержания IL-4 как в сыворотке крови, так и в смывах с мазков-отпечатков у больных с полипозным риносинуситом.
Повышение содержания концентрации IL-4 в сыворотке крови указывает на наличие атопического механизма гиперчувствительности. Фвеличение концентрации IL-4 в секретах со слизистой носа также указывает на гиперреактивность со стороны Th-2.
Таким образом, ИФА локального ИЛ-4 является не только физиологичным методом исследования, но и достаточно информативным при оценке и диагностике различных форм полипозного риносинусита (ПРС). Кроме этого дает возможность оценить характер гиперчувствительности при аллергической этиологии ПРС.
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
- Овчинников А.Я. Место, значение и роль воспалительных заболеваний слизистой оболочки полости носа и околоносовых пазух в возникновении, течении и лечении сочетанной патологии верхних и нижних дыхательных путей. : Дис… д-р.мед.наук..-Медицина и здравоохранение.- 76.02.2006.0458-С.110.
- Кудайбергенова С.Ф., Жайсакова Д.Е., Рамазанова Б.А., Ланкина М.В. Способ диагностики аллергического ринита: заявка № 5296 о выдаче инновац. патента РК на изобретение (№ гос. регистрации 2010 / 0332.1 от 30.03.2010).
- von Mutius E., Weiland S.K., Keil U. Die Internationale Studie zu Asthma und Allergien im Kindesalter (ISAAC): Forschungsstrategie, Methoden und Ausblick // Allergologie.- 1999.- 22, № 5.- С. 275-282.
- Кудайбергенова С.Ф. Диагностическая ценность исследования уровней ИЛ-4 при аллергических ринитах // Здоровье и болезнь, 2009.- №
- - С.103-105.
- Мокроносова М.А., Давудов Х.Ш., Смольникова Е.В., Мусалова Н.М. ИЛ-4 и ИЛ-8 у больных аллергическим и инфекционным ринитами // Рос. оториноларингол.- 2005, № 6.- С. 33-35.