Цитокиновый профиль при полипозном риносинусите

Полипозный риносинусит - хроническое воспалительное заболевание слизистой оболочки полости носа и околоносовых пазух, характеризующееся образованием и рецидивирующим ростом полипов, состоящих преимущественно из отечной ткани, инфильтрированной эозинофилами [1].

Международные совещательные комитеты, изданные руководства, монографии подчеркивают полиэтиологичность этого заболевания и сложный патогенез. Появился целый ряд новых способов диагностики, позволяющих при правильной и своевременной постановке диагноза успешно лечить этот недуг [2].

Актуальность работы связана с высокой распространенностью полипозного риносинусита, которая в разных странах мира колеблется. По данным мультицентровых исследований, проведенных по программе ISAAC в 56 странах мира, этот показатель доходит до 40% (von Mutius E., Weiland S.K., Keil U., 1999). Особую озабоченность вызывает тот факт, что при несвоевременном выявлении и лечении полипозный риносинусит может трансформироваться в более тяжелое заболевание - бронхиальную астму [3].

Цель работы:

  1. Изучить состояние иммунного статуса больных с полипозным риносинуситом (содержание субпопуляций Т-лимфоцитов: CD3+, CD4+, CD8+, CD16+, CD72+ -лимфоцитов, концентрации иммуноглобулинов класса М, класса G класса A и класса Е (IgM, IgG, IgA, 1ĝЕ) и циркулирующих иммунных комплексов (ЦИК) в сыворотке крови).
  2. Изучить содержание цитокина IL-4 в сыворотке крови, а также его концентрации в смывах с мазков-отпечатков со слизистой носа при полипозном риносинусите.

Научная новизна:

Нами доказана атопическая природа полипозного риносинусита с помощью ряда клинико-иммунологических данных. А наиболее информативным из них является повышение содержания «атопического» цитокина ИЛ-4 в секретах носа. Самый частый вопрос, который задают лечащие врачи: «Для чего необходимо изучать уровни цитокинов?». В совокупности с лабораторными, инструментальными методами обследования, количественное определение уровня IL-4 имеет важное значение при оценке иммунного статуса организма. В крови здоровых людей IL-4 практически не определяется.

Количества цитокинов могут быть использованы в определении дестабилизации клинического течения широкого круга заболеваний человека, развитии различных осложнений [4].

Наиболее оптимальным является применение диагностических иммуноферментных тест-систем для оценки цитокинового статуса как на местном, так и на системном уровне при различных патологиях. К тому же иммуноферментные методы высокоспецифичны, просты и быстры в исполнении и являются существенным дополнением к пониманию патогенеза заболеваний [5]. В настоящее время считается доказанным, что ИЛ-4 является «атопическим» и при атопических аллергических заболеваниях повышается его уровень. Предполагается, что основная часть ИЛ-4, продуцируется тучными клетками, эозинофилами, базофилами и связана с клетками шокового органа, в частности, со слизистой оболочкой полости носа.

Для взятия отпечатков с поверхности слизистой оболочки носа для определения локального ИЛ-4 у больных с полипозным риносинуситом, также как и при аллергическом рините, использовали обычную фильтровальную бумагу размером 1 см² (отрезанную ножницами), которую прикладывали на предварительно очищенную физиологическим раствором слизистую оболочку переднего конца нижней носовой раковины. Время аппликации составляло в среднем 15 секунд. После этого пропитанную фильтровальную бумагу полностью с помощью пинцета погружали в эпендорф с 0,1мл 0,9% раствора натрия хлорида. Время экспозиции равнялось 1 часу. Затем фильтровальную бумагу удаляли из эпендорфа пинцетом и пробирку-эпендорф с полученным раствором цитокинов замораживали при температуре минус 35ºС. Перед постановкой анализа исследуемые образцы были извлечены из холодильника и прогреты при температуре 18-25ºС в течение 30 мин. Растворы из флаконов отбирали только одноразовыми индивидуальными наконечниками для пипеток.

Определение локального ИЛ-4 проводилось методом твердофазного иммуноферментного анализа с помощью специального набора фирмы "Вектор-Бест" (Новосибирск).

Принцип метода основан на твердофазном «сэндвич»-варианте иммуноферментного анализа. Специфическими реагентами набора являются моноклональные антитела к IL-4, сорбированные на поверхности лунок разборного полистирольного планшета.

После сбора анамнеза приступали к изучению объективного состояния ЛОР-органов 43 пациентам с полипозным риносинуситом. Осмотр ЛОР-органов осуществлялся эндоскопически, неоднократно, как до оперативного лечения, так и после операции. Этим пациентам провели исследование иммунного статуса, в который входит также исследование цитокинового профиля на примере ИЛ-4.

Таблица 1 - Лейкоцитарная формула крови у больных ПРС (М ± m)

Показатель

ПРС (n=43)

Контроль (n=22)

Лейкоциты

6,48±0,127

6,1 ± 0,35

Нейтрофилы п/я

3,96±0,159

3,5 ± 0,17

Нейтрофилы с/я

77,46±0,442*

53 ± 1,21

Моноциты

5,76±0,189

5,2 ± 0,09

Эозинофилы

7,49±0,209*

4 ± 1,45

Лимфоциты %

30,32±0,477

30 ± 0,07

Лимфоциты абс.

1,42±0,083

1,2 ± 0,64

(p<0,05)*

Возможно, сегментоядерный нейтрофилез характерен для имеющего место воспалительного процесса со стороны ЛОР- органов, а увеличенное количество эозинофилов

Таблица 2 - Показатели иммунного статуса у больных ПРС (М ± m) раза) свидетельствует о сенсибилизированности организма больных.

Показатель

(n=43) (%)

Контроль (n=22)

СД-3 Т-лимф.

63,01±0,739

65,8 ± 2,91

СД-4 Т-хелп.

38,40±0,470

39,6 ± 2,10

СД-8 Т-киллеры

31,83±0,515

26,2 ± 2,33

СД-16 NK

17,12 ± 0,26(%)

18,5± 0,54(%)

СД-4/СД-8 (ИРИ)

1,2

1,5

СД-72 В-лимф.

11,9 ± 1,7

10,4 ± 1,7

IgM, г/л

1,69±0,076

0,9±0,1

IgG, г/л

13,24±0,282

9,4±0,1

IgA, г/л

3,0±0,091*

4,8±0,2

IgE, МЕ/мл

469,67±26,271*

60,0 ± 35,5

ЦИК(ед.отн.плотн.)

85,9 ± 6,2 *

30,1 ± 2,7

IL-4 в сыворотке крови, пг/мл, (n=40)

5,4 ± 0,7 *

1,2 ± 0,5

IL-4 в секр., пг/мл, (n=23)

6,1 ±1,5 *

Отсутствует

Спонтанный НСТ-тест

18,91±0,469

23,73±0,510

Индуцированный НСТ-тест

50,41±3,234

45,65±1,043

(p<0,05)*

Как видно из таблицы резких изменений в содержании иммунокомпетентных клеток не наблюдалось. По-видимому, это связано с длительностью хронического воспалительного процесса. При этом наблюдается незначительное снижение содержания IgA в сыворотке крови. Причем, содержание IgE у них же повышено в 4,5 раза (p<0,05). Также было отмечено повышение уровней ЦИК почти в 3 раза (p<0,05). По-видимому, причиной этому служит присоединение бактериальных инфекций при полипозном риносинусите.

В результате проведенного исследования было выявлено повышение содержания IL-4 как в сыворотке крови, так и в смывах с мазков-отпечатков у больных с полипозным риносинуситом.

Повышение содержания концентрации IL-4 в сыворотке крови указывает на наличие атопического механизма гиперчувствительности. Фвеличение концентрации IL-4 в секретах со слизистой носа также указывает на гиперреактивность со стороны Th-2.

Таким образом, ИФА локального ИЛ-4 является не только физиологичным методом исследования, но и достаточно информативным при оценке и диагностике различных форм полипозного риносинусита (ПРС). Кроме этого дает возможность оценить характер гиперчувствительности при аллергической этиологии ПРС.

 

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

  1. Овчинников А.Я. Место, значение и роль воспалительных заболеваний слизистой оболочки полости носа и околоносовых пазух в возникновении, течении и лечении сочетанной патологии верхних и нижних дыхательных путей. : Дис… д-р.мед.наук..-Медицина и здравоохранение.- 76.02.2006.0458-С.110.
  2. Кудайбергенова С.Ф., Жайсакова Д.Е., Рамазанова Б.А., Ланкина М.В. Способ диагностики аллергического ринита: заявка № 5296 о выдаче инновац. патента РК на изобретение (№ гос. регистрации 2010 / 0332.1 от 30.03.2010).
  3. von Mutius E., Weiland S.K., Keil U. Die Internationale Studie zu Asthma und Allergien im Kindesalter (ISAAC): Forschungsstrategie, Methoden und Ausblick // Allergologie.- 1999.- 22, № 5.- С. 275-282.
  4. Кудайбергенова С.Ф. Диагностическая ценность исследования уровней ИЛ-4 при аллергических ринитах // Здоровье и болезнь, 2009.- №
  5. - С.103-105.
  6. Мокроносова М.А., Давудов Х.Ш., Смольникова Е.В., Мусалова Н.М. ИЛ-4 и ИЛ-8 у больных аллергическим и инфекционным ринитами // Рос. оториноларингол.- 2005, № 6.- С. 33-35.
Год: 2013
Город: Алматы
Категория: Медицина