Циклолехманозид А из растения astragalus lehmannianus

В продолжение химических исследований тритерпеновых соединений растений рода астрагал (Бобовые) [1-3], нами выделено из надземной части растения Astragalus lehmannianus Bunge новый тритерпеновый гликозид, названный нами циклолехманозид А (1).

Выделение циклоартановых гликозидов. Воздушно-сухую надземную часть растения (1.2 кг), заготовленную в мае 2007 года Республики Каракалпакстана (низкогорья Султануздаг), исчерпывающе экстрагировали метанолом (8л × 5). Метанольные экстракты упарили до сиропообразного состояния, а к оставшейся после отгонки растворителя массе добавляли двойной объём воды, водный раствор экстрагировали сначала хлороформом, затем н-бутиловым спиртом. Бутанольное извлечение упаривали досуха, сухой остаток хроматографировали на колонке с силикагелем. После упаривания растворителей в вакууме получили 68 г бутанольного извлечения. Дальнейшее разделение веществ на индивидуальные соединения проводился методом колоночной хроматографии на силикагеле элюированием системами 4 и 5. При этом из бутанольной фракции выделены 75 мг (0.0063 % здесь и далее выход дан в пересчёте на воздушно-сухое сырьё) соединения 1, названное нами циклолехманозидом А (1), C47H80O19, т.пл. 196-198 ºС (из метанола).

Кислотный гидролиз соединения 1. Циклолехманозид А (35 мг) растворяли в 10 мл метанола, содержащего 0.5% серной кислоты, и кипятили на водяной бане в течение 1 ч, затем реакционную смесь разбавили 20 мл воды и упарили метанол. Выпавший осадок отфильтровали, промывали водой и сушили. Фильтрат нейтрализовали карбонатом бария. После нейтрализации в фильтрате методом БХ в сравнении с заведомыми образцами обнаружили D-ксилозу и D-глюкозу.

Остаток хроматографировали на колонке, элюируя системой 1. Выделили 8 мг генина 2, идентифицированного с циклокантогенином сравнением с заведомым образцом на ТСХ и по данным спектра ¹Н ЯМР.

Спектр ¹Н ЯМР циклокантогенина (400 МГц, C5D5N, δ, м.д., J/Гц, 0-ТМС): 0.34 и 0.62 (2Н-19, д, ²J=4.0 Гц), 1.05, 1.38, 1.44, 1.49, 1.90, 1.90 (6xCH3, с), 1.11 (CH3-21, д, J=6.5 Гц), 3.67 (H-3, дд, J=11.4 Гц), 3.94 (H-24, дд, J=10.2 Гц), 4.74 (H-6, тд, J=6.3 Гц), 4.76 (H-16, тд, J=6.3 Гц) [4].

Установление химического строения соединения 1. В спектре ¹Н ЯМР нового гликозида 1 в сильном поле при δ 0.35 и 0.58 м.д. прослеживаются два однопротонных дублета с характерной геминальной константой спин-спинового взаимодействия (КССВ) ²J=4 Гц и сигналы семи метильных групп в пределах δ 0.99-1.29 м.д. Эти данные свидетельствуют о принадлежности рассматриваемого гликозида к тритерпеноидам циклоартанового ряда [5-7].

Как уже было сказано выше, кислотный гидролиз соединения 1 приводит к получению циклокантогенина (2), D-ксилозы и D-глюкозы.

Аномерные протоны моносахаридных остатков резонируют в спектре ¹Н ЯМР гликозида 1 при δ 4.42 м.д. (H-1 остатка β-D-ксилопиранозы), δ 4.48 м.д. и δ 4.65 м.д. (H-1 остатка β-D-глюкопиранозы) в виде дублетов с КССВ ³J=7.4, ³J=7.8 и ³J=7.9 Гц соответственно. Значит, моносахаридные остатки в составе изучаемого гликозида имеют пиранозную форму, ⁴С1-конформацию и β-конфигурацию. Об этом же свидетельствуют величины химических сдвигов углеродных атомов моносахаридных остатков в спектре ¹³С ЯМР соединения 1. Упомянутые показатели спектра ЯМР ¹³С указывают также на терминальный характер обоих моносахаридных остатков. Следовательно, соединение 1 представляет собой тридесмозидный гликозид.

Действительно, сравнительный анализ спектров ¹³С ЯМР соединения 1 и циклокантогенина показывает, что атомы С-3, С-6 и С-16 испытывают эффект гликозилирования и резонируют при 90.22, 78.21 и 82.23 м.д. соответственно.

В спектре ¹³С ЯМР соединения 1 аномерные углеродные атомы моносахаридных остатков прослеживаются при δ 106.51 м.д. (С-1 остатка β-D-ксилопиранозы), δ 104.78 м.д. и δ 105.05 м.д. (С-1 двух остатков β-D-глюкопиранозы). Величины химических сдвигов аномерных углеродных атомов свидетельствуют о том, что остаток D-ксилозы расположен при С-3, а остаток D-глюкозы – при С-6 и С-16.

Наличие в спектрах ЯМР ¹Н и ¹³С сигналов трёх аномерных протонов при 4.42, 4.48 и 4.65 м.д., а также трёх аномерных углеродных атомов при 104.78, 105.05 и 106.51 м.д., свидетельствует о том, что соединение 1 является триозидом [8,9].

Таким образом, результаты проведённых химических и спектральных исследований позволяют нам заключить, что новый тритерпеновый гликозид циклоартанового ряда циклолехманозид А имеет структуру 3-О-β-D-ксилопиранозид, 6, 16-ди-О-β-D-глюкопиранозид-24S-циклоартан-3β,6α,16β,24,25-пентаола.

Список литературы

1. Т.Х. Наубеев, А.А. Жанибеков, М.И. Исаев, Химия природ. соедин., 724 (2012)
2. А.А. Жанибеков, Т.Х. Наубеев, К.К. Утениязов, Х.М. Бобакулов, Н.Д. Абдуллаев, Химия природ. соедин., 405 (2013)
3. T.X. Naubeev, А.А. Janibekov, К.Dzh. Kucherbayev., Uzbek Biological Journal, 35 (2017)
4. E. Bedir, I. Calis, R. Aquino, S. Piacente, C. Pizza, J. Nat. Prod., 61, 1469 (1998)
5. E. Bedir, I. Calis, R. Aquino, S. Piacente, C. Pizza, J. Nat. Prod., 62, 563 (1999)
6. Т.Х.Наубеев, К.К.Утениязов, М.И.Исаев, Химия природ. соедин., 229 (2011)
7. М.И.Исаев, Б.А.Имомназаров, Ю.М.Фадеев, П.К.Кинтя, Химия природ. соедин., 360 (1992)
8. Наубеев Т.Х., Утениязов К.К. Химия природ. соедин., 460 (2007)
9. Кучербаев К.Дж., Утениязов К.К., Качала В.В., Саатов З., Шашков А.С., Химия природ. соедин., 364 (2002)