Введение. Растительное сырье видов рода подорожник Plantago (L.) семейства Plantaginaceae известно как перспективный источник различных биологически активных веществ: гидроксикоричных кислот, флавоноидов, полисахаридов, витамина К, аукубина и др. [3, 4, 6]. Гидроксикоричные кислоты являются наиболее распространенными полифенольными кислотами высших растений, проявляющими в экспериментах антиоксидантные, антирадикальные свойства, доказана иммуностимулирующая, противовирусная и противовоспалительная активность [2, 5, 6].
Цель исследования. Целью нашей работы являлось изучение содержания гидроксикоричных кислот в листьях подорожника среднего.
Материалы и методы. В качестве объектов исследования использовали листья подорожника среднего (Plantago media L.), собранные в различных регионах Украины в период цветения. Сбор и сушка сырья проводилсясогласно общепринятых методик.
Для идентификации гидроксикоричных кислот использовали качественные реакции и тонкослойную хроматографию на пластинках Sorbfil АФ-А. Количественное содержание суммы орто-дигидроксикоричных кислот в сырье определяли спектрофотометрическим методом согласно Государственной Фармакопеи при длине волны 525 нм на спектрофотометре Specord-200 AnalyticJenaUV-vis [1]. Так как при проведении предварительных исследований с помощью ТСХ достоверно идентифицирована хлорогеновая кислота, нами была разработана методика её спектрофотометрического определения при длине волны 327 нм. В качестве стандартного образца использовали 50% спиртовой раствор стандарта хлорогеновой кислоты фирмы Aldrich Lot SLBF3987V (содержание >95 %).
Результаты и обсуждения. При проведении качественных реакций на присутствие гидроксикоричных кислот, проявлялось сине-зеленое окрашивание раствора различной интенсивности. Хроматографичекие исследования на пластинках Sorbfil АФ-А подтвердили наличие 4 веществ, имеющих в УФ- имели светло-голубую или голубую флюоресценцию, изменяющуюся после обработки парами аммония гидроксида на зеленую и желто-зеленую, что является характерным для класса гидроксикоричных кислот. По характерному свечению в УФ- свете, величине Rf, окраске пятен после проявления парами аммония гидроксида и диазореактива, а также при сравнении со стандартными образцами кислоты хлорогеновой, неохлорогеновой и литературными данными, в исследуемых образцах достоверно обнаружено присутствие хлорогеновой и неохлорогеновой кислоты; предположительно -актеозида, плантамайозида.
При спектрофотометрическом определении суммы производных орто-дигидроксикоричных кислот расчет содержания производилось в пересчете на актеозид при длине волны 525 нм. Сумма орто-дигидроксикоричных кислот в листьях подорожника среднего составляла от 1,176 ± 0,039% до 1,518 ± 0,028%. Полученные данные коррелируются с накоплением в исследуемом сырье хлорогеновой кислоты. Концентрация данной гидроксикоричной кислоты в листьях подорожника среднего колеблется от 0,095 ± 0,004% до 0,109 ± 0,009% в зависимости от места произрастания растения.
Анализ полученных данных свидетельствует о возможности использования данных методик для определения содержания гидроксикоричных кислот в лекарственном сырье видов рода подорожник.
Вывод. В результате проведенных исследований методом ТСХ достоверно идентифицированы хлорогеновая и неохлорогеновая кислоты. Методом спектрофотометрии определены сумма орто-дигидроксикоричных кислот от 1,176 ± 0,039% до 1,518 ± 0,028%, а также содержание хлорогеновой кислоты от 0,095 ± 0,004% до 0,109 ± 0,009% в листьях подорожника среднего.
Список литературы
- Державна Фармакопея Украіни : в 3 т. / Держ. п-во «Украінський науковий фармакопейний центр якості лікарських засобів». - 2-е вид., 2014, Т. 3, С. 426-427.
- Левицкий А. П., Вертикова Е. К., Селиванская И. А. Хлорогеновая кислота : биохимия и физиология // Мікробіологія і біотехнологія, 2010, № 2, С. 6 - 20.
- Медведьев Ю.В., Передеряев О.И., Арзамасцев А.П., Эллер К.И., Прокофьева В.И. Определение гидроксикоричных кислот в лекарственном растительном сырье и объектах растительного происхождения // Вопросы биологической, медицинской и фармацевтической химии, 2010, № 3, С. 25 - 31.
- Мельник О. А., Унгурян Л. М. Пошук лікарських засобів на основі рослинноі' сировини, що містять кислоту хлорогенову // Фармацевтичний часопис, 2011, № 1, С. 90 - 94.
- Хортецкая Т.В., Мазулин А.В., Еренко Е.К., Смойловская Г.П., Мазулин Г.В. Накопление аукубина в листьях Plantago media L. // Состояние и перспективы оптимизации и эффективности в фармакогнозии, технологи, клинике: Сб. материало научно-практической конференции с международным участием, посвященной 30-летию кафедры фармакогнозии и фармацевтической технологи Ярославской государственной медицинской академи. - Ярославль : ИПК «Индиго», 2014, С. 195 - 197.
- Ivana N. Beara, Marija M. Lesjak, Dejan Z. Orcic, Natasa В. Simin, Dragana D. Cetojevic-Simin, Biljana N. Bozin, Neda M. Mimica-Dukic. Comparative analysis of phenolic profile, antioxidant, antiinflammatory and cytotoxic activity of two closely-related Plantain species: Plantago altissima L. and Plantago lanceolata L. // LWT - Food Science and Technology, 2012, 47, Р. 64 - 70.