Исследование органических кислот травы марьянника серебристоприцветникового (melampyrum argyrocomum fisch. ex lebed)

Введение. Марьянник серебристоприцветниковый - однолетнее травянистое растение семейства норичниковые (Scrophulariaceae). Его химический состав практически не изучен, в его надземной части найдены только иридоиды: аукубин, ацетат аукубина, каталпол [4].

Цель исследования. Изучение качественного и количественного содержания органических кислот травы марьянника серебристоприцветникового.

Объектом исследования служила трава марьянника серебристоприцветникового,

заготовленная в 2016 г. в Курском районе Курской области в период цветения растений.

Материалы и методы. Качественное обнаружение аскорбиновой кислоты проводили хроматографированием водного извлечения в тонком слое сорбента на пластинках Sorbfil в системе растворителей 96% спирт этиловый - концентрированный раствор аммиака (16:4,5), проявитель - раствор бромкрезолового зеленого. Аскорбиновая кислота проявлялась в виде желтого пятна на зеленом фоне [1].

Далее органические кислоты исследовали методом газожидкостной хромато-масс- спектрометрии [2]. Исследование состава органических кислот проводили методом газожидкостной хроматографии. Для анализа 50,0 мг измельченного воздушно-сухого сырья марьянника серебристоприцветникового помещали в виалу «Agilent» на 2,0 мл, прибавляли 50,0 мкг тридекана в гексане (внутренний стандарт) и 1,0 мл метилирующего агента (14% BCl3 в спирте метиловом, Supelco 3-3033). Смесь выдерживали в герметично закрытой виале 8 часов при температуре 65⁰ С. Далее реакционную смесь сливали с растительного сырья и разбавляли 1,0 мл воды очищенной. Извлечение метиловых эфиров органических кислот проводили хлористым метиленом, а затем их хроматографировали на газо-жидкостном хроматографе Agilent Technologies 6890 с масс-спектрометрическим детектором 5973N. Условия анализа: хроматографическая колонка-капиллярная INNOWAX, длиной 30 м, внутренний диаметр 0,25 мм; газ-носитель-гелий, скорость газа-носителя-1,2 мл/мин., объем пробы - 2 мкл.; скорость ввода пробы 1,2 мл/мин в течении 0,2 минут. Идентификацию жирных кислот осуществляли путем сравнения со стандартными образцами метиловых эфиров, а также используя библиотеку масс- спектров NIST O8 и WILLEY 2007 в сочетании с программами для идентификации AMDIS и NIST. Концентрацию индивидуальных органических кислот рассчитывали методом внутреннего стандарта [2].

Количественное определение органических кислот и аскорбиновой кислоты проводили согласно методик ГФ XI издания титрометрическим методом.

Результаты и обсуждения. В результате хроматографического анализа в траве марьянника серебристоприцветникового идентифицирована аскорбиновая кислота. Методом газожидкостной хромато-масс-спектрометрии в траве марьянника серебристоприцветникового установлено наличие 13 органических кислот и определено их содержание (табл. 1).

Таблица 1 - Состав органических кислот травы траве марьянника серебристо- прицветникового

Преобладающими среди них являются фумаровая (2238,97 мг/кг), яблочная (903,10 мг/кг) и лимонная (855,26 мг/кг) кислоты.

Выводы. Методом ТСХ и газожидкостной хромато-масс-спектрометрии определено наличие 14 органических кислот в траве марьянника серебристоприцветникового и проведение их идентификации.

Установлено количественное содержание суммы органических кислот и аскорбиновой кислоты в траве марьянника серебристоприцветникового.

Список литературы

1. Бубенчикова В.Н., Логутев С.В., Булатникова Ж.А. Исследование состава органических кислот бородавника обыкновенного и герани луговой // XVIII Российский национальный конгресс «Человек и лекарство» сб. материалов конгр. (тез. докл.). - М., 2011. - С. 584.
2. Бубенчикова В.Н., Старчак Ю.А. Карбоновые кислоты травы тимьяна мелового (Thymus cretaceus Klok. et Schost.) //Фармация и фармакология. - 2014. - № 5(6). - С. 4-7.
3. Государственная фармакопея СССР. Вып. 2. Общие методы анализа. Лекарственное растительное сырье МЗ СССР - 11-е изд., доп. М.: Медицина, 1989. - 400 с.
4. Растительные ресурсы России: Дикорастущие цветковые растения, их компонентный состав и биологическая активность. Т. 4. Семейства Caprifoliaceae - Lobeliaceae / Отв. ред. А.Л. Буданцев. - СПб.; М.: Товарищество научных изданий КМК, 2011. - 630 с.