Введение. Описторхоз - заболевание из группы трематодозов, вызываемое паразитическими плоскими червями из рода Opisthorchidae (O. felineus и O. viverrini). Заражение происходит при употреблении в пищу инвазированной рыбы [2].
В настоящее время один из актуальных противоописторхозных препаратов, празиквантел (бильтрицид), обладает рядом побочных эффектов и противопоказаний [3].
В связи с этим поиск более безопасных лекарственных средств для лечения описторхоза является актуальной задачей.
Цель работы. Исследование дозозависимой противоописторхозной активности фракций сесквитерпеновых лактонов полыни горькой и полыни Гмелина на модели in vitro.
Материалы исследования. В качестве объектов исследования использовали надземную часть полыни горькой (Artemisia absinthium L.) и полыни Гмелина (Artemisia gmelinii L.), заготовленных на территории Томской области в июле 2015 года.
Получение фракции сесквитерпеновых лактонов проводили по методам Рыбалко К.С. [4] и Дрожджа-Петровского [1]. Противоописторхозную активность фракций сесквитерпеновых лактонов (СЛ) оценивали на модели экспериментального описторхоза in vitro [5].
Исследуемые образцы тестировались в дозах 100, 300 и 600 мкг/мл. В качестве препарата сравнения использовали бильтрицид в дозе 50 мкг/мл. Оценку жизнеспособности марит описторхов проводили через 24, 48 и 72 часа экспозиции по величине их двигательной активности.
Результаты и обсуждения. Бильтрицид проявил выраженную противоописторхозную активность уже через 24 часа экспозиции. У всех марит описторхов в данной группе наблюдался паралич мышечного аппарата, что сопровождалось полным их обездвиживанием и последующей потерей жизнеспособности.
По прошествии 24 часов, в дозе 100 мкг/мл все образцы продемонстрировали полное отсутствие противоописторхозной активности, так как все мариты описторхов в группах сохранили нормальные показатели двигательной активности и жизнеспособности.
В дозе 300 мкг/мл в течение 24 часов наибольшую противоописторхозную активность показала фракция СЛ полыни горькой по методу Дрожджа-Петровского, о чем свидетельствовала очень слабая двигательная активность, видимая только в микроскопе 20х, соответствующей группы марит описторхов. В дозе 600 мкг/мл через 24 часа одинаковую эффективность проявили фракции СЛ полыни горькой, полученные методами Рыбалко К.С. и Дрожджа-Петровского, что сопровождалось признаками очень слабой двигательной активности у всех марит описторхов в группах.
В дозе 100 мкг/мл в течение 48 часов фракция СЛ, полученная из полыни горькой по методу Дрожджа-Петровского, продемонстрировала незначительный эффект, вызвавший редуцирование двигательной активности марит описторхов в группе.
В дозе 300 мкг/мл через 48 часов наибольший эффект проявила фракция СЛ, полученная из полыни Гмелина по методу Дрожджа-Петровского - наблюдалась очень слабая двигательная активность марит описторхов, видимая только в микроскопе 20х.
В дозе 600 мкг/мл через 48 часов экспозиции наибольшую и равную противоописторхозную активность проявили фракции СЛ полыни горькой, полученные методами Рыбалко К.С. и Дрожджа-Петровского (мариты описторхов в этих группах проявляли признаки очень слабой двигательной активности, отмеченные под микроскопом 20х).
Эти же образцы проявили аналогичный эффект и через 72 часа экспозиции. В дозе 100 мкг/мл через 72 часа признаки устойчивого противоописторхозного эффекта (отсутствие двигательной активности и потеря жизнеспособности марит описторхов) проявила фракция СЛ полыни горькой по методу Дрожджа-Петровского.
В дозе 300 мкг/мл через 72 часа одинаковую выраженную активность проявили фракции полыни горькой и полыни Гмелина, полученные методом Дрожджа-Петровского, что выражалось очень слабой двигательной активности большинства марит описторхов в группах.
Вывод. В результате скрининговых исследований in vitro была установлена выраженная противоописторхозная активность фракции сесквитерпеновых лактонов полыни горькой, полученной методом Рыбалко К.С., в дозе 600 мкг/мл, в течение 24 часов экспозиции.
Это может свидетельствовать о перспективности дальнейших химико-фармакологических исследований этого растения в рамках поиска новых антигельминтных средств.
Список литературы
- А.И. Драб, К.А. Нурмухаметова, Р.Н. Пак, С.М. Адекенов. Противоописторхозное действие экстракта соссюреи солончаковой. // Химико-фармацевт. журн., 2005, Т.39, № 8, С. 30-32
- А.М. Бронштейн, В.И. Лучшев. Трематодозы печени: Описторхоз, клонорхоз. // Русский медицинский журнал., 1998, Т.6, № 3, С. 140-148.
- В.Д. Завойкин, О.П. Зеля, М.М. Михайлов, В.В. Брагин. Тактика широкого применения празиквантеля в комплексе мер борьбы с описторхозом. Общие подходы к амбулаторному лечению больных описторхозом в очагах. // Мед. паразитол. и паразитар. болезни., 2001, №2, С. 13-17.
- К.С. Рыбалко. Природные сесквитерпеновые лактоны. - Москва, Медицина, 1978. 320 с.
- Keiser, J., In vitro and in vivo trematode models for chemotherapeutic studies. Parasitology, 2010. 137(3): p. 589-603.