Введение. В современном мире волосы ежедневно подвергаются различным механическим, термическим и химическим воздействиям, что может сказаться на их структуре. Они повреждаются даже после однократного окрашивания стойкой краской для волос, содержащей обесцвечивающие вещества. Сейчас около 75% женщин красят свои волосы постоянно. Среди молодежи изменение цвета - один из основных способов создать модную причёску и, таким образом, само выразиться. Также окрашивание волос используется, чтобы закрасить седину. При окраске получение желаемого цвета волос происходит путем окисления цветообразующих компонентов. При этом происходит частичное или полное разрушение естественного пигмента волос. В процессе окрашивания поверхность волоса становится открытой, и естественные пигменты удаляются в зависимости от природного цвета в большей или меньшей степени, а место, где находился пигмент волоса, занимает частица краски. Оттуда она уже не смывается, так как закрепляется достаточно глубоко [1].
В наших ранее опубликованных работах была показана эффективность методики ферментативного гидролиза для изолирования некоторых лекарственных веществ (фенобарбитал, димедрол) из природно неокрашенных волос для целей диагностики употребления их, в том числе и с немедикаментозной целью [2, 3].
Цель исследования. Разработка методики изолирования и определения лекарственных веществ в окрашенных волосах.
Материалы и методы. Эксперименты проводились с использованием следующих реактивов: трипсин (ООО «Самсон-Мед»), химотрипсин (ООО «Самсон-Мед»), химопсин (ООО «Сам- сон-Мед»). Выполнение настоящего исследования осуществлялось с применением аппаратуры: хроматограф с масс-селективным детектором Agilent 7890 A/5977 MSD на колонке HP - 5ms (30 м х 0.25 мм х 0.25 мкм), управление с помощью программы MassHunter GC MS, обработка полученных данных в программах MassHunter Qualitative Analysis и MassHunter Quantitative Analysis. В эксперименте были использованы лабораторные животные: белые, рыжие и черные морские свинки. Содержание и исследование животных осуществляли в соответствии с действующими принципами Хельсинской декларации по защите позвоночных животных, используемых для экспериментальных и научных целей. Перед началом и в ходе эксперимента животных содержали в стандартных условиях вивария на сбалансированной диете. Определялся влияние природной матрицы на возможность обнаружения лекарственных веществ в природно окрашенных волосах.
Ферментативный гидролиз химопсином, трипсином и химотрипсином выполняли в следующих условиях: раствор фермента готовили в соотношение фермент:субстрат 1:50. Навеску фермента растворяли в фосфатном буфере с рН 7,4 среды, затем термостатировали при 37 оС в течение 3 ч. Полученные пробы центрифугировали при 4600 об/мин в течение 10 мин. Затем отбирали центрифугат. К осадку добавляли вторую порцию раствора фермента в равном объеме, перемешивали и термостатировали следующие 3 ч в аналогичных условиях. После чего данную операцию повторяли с третьей порцией фермента. Общее время гидролиза составило 9 ч. К центри-фугату добавляли 20% раствор серной кислоты до рН 2-3 среды. Либо 25% раствор аммиака до рН 9-10 среды. Далее добавляли 3 мл хлороформа и перемешивали в течение 10 мин. Экстракцию хлороформом повторяли 3 раза порциями по 3 мл. Полученные вытяжки объединяли и выпаривали досуха. Сухой остаток растворяли в 500 мкл комплексного растворителя и исследо-вали методом газовой хроматографии с масс-селективным детектированием в условиях описанных выше.
Результаты и обсуждения. На хроматограммах наблюдаются пики эндогенных веществ, таких как пропиловый эфир дексагеновой кислоты, фенилэтиловый эфир декановой кислоты, дециловый эфир декановой кислоты, пропиловый эфир октодекановой кислоты, L-аланин, L- фенилаланин, дипропиловый эфир бутендиоевой, оксодеканы, гексадеканы, октодеканы, олеиновая кислота, холестерин, октодекановая кислота, гексадекановая кислота, которые были идентифицированы с помощью базы данных прибора.
Выводы. Анализ белых и природно окрашенных (черных и рыжих) образцов волос показал, что их состав идентичный, но интенсивность пиков существенно выше у природно окрашенных образцов. В дальнейшем планируется использовать методику для обнаружения димедрола и фенибута в природно и искусственно окрашенных волосах.
Список литературы
- Плотникова И.Ю. Технология парикмахерских работ: учебное пособие для нач. проф. Образования / И.Ю. Плотникова, Т.А. Черниченко. - 9-е изд., стер. - М.: Издательский центр «Академия», 2013. - 189 с., [24] с. цв. ил.
- Слустовская Ю. В. Определение производных барбитуровой кислоты в волосах с использованием методики кислотного и ферментативного гидролиза / Ю.В. Слустовская, М.В. Крысько // Молодая фармация - потенциал будущего: материалы научной конференции. Санкт-Петербург, 25-26 апреля 2016 г.- СПб.: СПХФА, 2016. - С. 704-707.
- Слустовская Ю.В. Определение димедрола в волосах с использованием щелочного и ферментативного гидролиза / Слустовская Ю.В., Кашеутова В.С., Стрелова О.Ю. IV всероссийская научно-практическая конференция с международным участием «инновации с здоровье нации» 9-10 ноября 2016 г. - СПб.: СПХФА, 2016 С. 587-590.