Биопрепарат «энойл» для биоремедиации нефтезагрязненных почв

В настоящее время известны десятки биопрепаратов, изготовленных на основе микроорганизмов-нефтедеструкторов, представленных в различной препаративной форме. Важной характеристикой любого биопрепарата является форма его выпуска [1, 2]. При этом основным показателям любых препаративных форм является титр микроорганизмов- деструкторов углеводородного загрязнения, показывающий концентрацию микроорганизмов в препарате, который позволяет судить о потенциале данного препарата к окислению нефти [3]. Целью исследования является разработка биопрепарата для биоремедиации почв при низких температурах.

Материалы исследований. Микроорганизмы: Bacillus amyloliquefaciens И-15, Serratia marcescens Н3К, Rhodococcus erythropolis ДН-1.

Результаты и обсуждение. Для разработки биопрепарата был отобран консорциум, состоящий из активных углеводородокисляющих штаммов Serratia marcescens Н3К, Rhodococcus erythropolis ДН-1, Bacillus amyloliquefaciens И-15. При этом штаммы, входящие в состав консорциума выращивали отдельно при следующих отработанных режимах: рН 5,0-7,0; оптимальная посевная концентрация клеток от 100 000 до 100 000 000 кл/см3; температура культивирования от 200С до 35 0С в течение 24-48 ч. на питательной среде СПБ. При соблюдении указанных параметров культивирования отмечалось максимальное накопление биомассы. При этом титр клеток у штамма Rhodococcus erythropolis ДН-1 составил 9,0±0,16 lg КОЕ/см3, у Bacillus amyloliquefaciens И-15 - 9,18±0,21 lg КОЕ/см3 и у штамма Serratia marcescens Н3К отмечался на уровне 9,25±0,23lg КОЕ/см3. Концентрирование культуральной жидкости проводили методом центрифугирования.

Далее для получения препаративной формы концентрированного биологического препарата, полученные осадки бактериальных клеток объединяли (1:1:1) и добавляли разработанный в лабораторных условиях защитный раствор №1 в соотношении 1:3. Титр клеток в 1 см3 концентрированной формы биопрепарата составил 11,00 lgKOE/смЗ.

Эффективность разработанного биологического препарата определяли на минеральной среде Ворощиловой-Диановой с добавлением 1% нефти. Препарат вносили в концентрации 108 кл/см3 в среду, загрязненной 1% нефтью. Загрязненную минеральную среду с нефтью после

добавления препарата инкубировали при 150 об/мин. на качалке «Innova43R» при температуре 100С (рисунок 2).

Степень окисления нефти определяли по остаточному содержанию нефтяных углеводородов методом гравиметрии. В результате было установлено, что разработанный биопрепарат разрушал 91% нефти в течение 14 суток.

Полученная концентрированная форма биологического препарата представляет собой жидкую однородную суспензию, бежевого цвета и без запаха, предназначенного для утилизации нефтяных загрязнений (рисунок 1).

Таким образом, была разработана технология изготовления концентрированной жидкой формы биологического препарата на основе микроорганизмов Bacillus amyloliquefaciens И-15, Serratia marcescens Н3К, Rhodococcus erythropolis ДН-1, способного разрушать до 91% нефти.

Список литературы

Т.Н. Морозова, Е.С. Белик, Л.В. Рудакова. Использование бактериального препарата для ремедиации техногенно загрязненных почв. Вестник ПНИПУ. Прикладная экология. Урбанистика. 2015. № 3. с.71-73

Рогозина Е.А., Андреева О.А., Жаркова С.И., Мартынова Д.А., Орлова Н.А. Сравнительная характеристика отечественных биопрепаратов, предлагаемых для очистки почв и грунтов от загрязнения нефтью и нефтепродуктами. http://www.ngtp.ru . с.6-14.

Коронелли Т.В. Принципы и методы интенсификации биологического разрушения углеводородов в окружающей среде // Прикладная биохимия и микробиология. - 1996.- Т. 32, № 6. - с. 579-585.

Год: 2016
Город: Шымкент
Категория: Медицина