АННОТАЦИЯ
Изучены качественный состав и количественное содержание гидроксикоричных кислот в надземной части трех культивируемых представителей семейства Lamiaceae (Ocimum americanum, Lophanthus anisatus и Satureja hortensis) методами бумажной и высокоэффективной жидкостной хроматрографии. В сырье каждого вида установлено наличие и содержание гидроксикоричных кислот (хлорогеновой, кофейной, п-кумаровой, ферулловой или розмариновой). Розмариновая кислота доминирует в траве всех изученных видов.Результаты исследований могут быть использованы в хемотаксономии Губоцветных, а также при планировании фармакологических экспериментов.
Ключевые слова: Ocimumamericanum, Lophanthusanisatus, Saturejahortensis, гидроксико- ричные кислоты
Актуальность темы. Гидроксикоричные кислоты принадлежат к группе фенольных соединений с выраженными антиоксидантными и противовоспалительными свойствами; установлен седативный, иммуностимулирующий, гипохолестеринемический и ноотропный эффект этих соединений [3, 8]. Представители подсемейства Nepetoideae семейства Lamiaceae привлекают внимание исследователей как перспективный источник гидроксикоричных кислот [1, 6, 7].
Цель исследования. Цель наших исследований - анализ качественного состава и количественного содержания гидроксикоричных кислот в траве трех неофицинальных эфиромасличных растений подсемейства Nepetoideae семейства Lamiaceae: Ocimum americanum L., Lophanthus anisatus Adans. и Satureja hortensis L. Объектом исследований является надземная часть растений, собранная время их цветения в условиях культуры на территории Тернопольской обл. (Украина).
Материалы и методы. Идентификацию гидроксикоричных кислот осуществляли методом бумажной хроматографии (бумага «Filtrak 4») 20% спиртово-водных экстрактов надземной части растений в двух системах растворителей: этилацетат-муравьиная кислота-вода (10:2:3) и 2 % кислота уксусная. Результаты оценивали в УФ-свете до и после обработки хроматограмм парами аммиака.
Изучение качественного состава, а также количественного содержания гидроксикоричных кислот проводили методом высокоэффективной жидкостной хроматографии. Осуществляли обратно-фазную хроматографию с использованием колонки Supelco Discovery C18 размером 250x4.6 мм, как сорбент использовали силикагель [2]. В качестве подвижной фазы использовали сольвент А (0,005 N ортофосфорная кислота фирмы Sigma-Aldrich) и сольвент B (ацетонитрил фирмы Sigma-Aldrich). Режим хроматографирования был следующим: максимальная скорость подачи подвижной фазы 0,7 мл/мин, рабочее давление элюента 100-120 bar (10000-12000 кПа);
температура термостата колонки 25 0С; объем введенной пробы 5-20 мкл, время хроматографирования - 50 мин. Режим элюирования - градиентный. Время сканирования 0,6 сек, диапазон детектирования - 190-400 нм, длина волны 330 нм. В качестве стандартных образцов использовали п-кумаровую, ферулловую, хлорогеновую, розмариновую и кофейную кислоты (Sigma-Aldrich). Для экстракции гидроксикоричных кислот и приготовления образцов стандартных растворов использовали метанол.
Результаты и обсуждение. Анализ результатов проведения бумажной хроматографии позволил установить наличие в траве растений розмариновой и хлорогеновой кислот. На основе ВЭЖХ-анализа 60% метанольных экстрактов в каждом из растений обнаружено наличие 3-4 гидроксикоричных кислот и установлено их количественное содержание (табл. 1, рис. 1). Идентифицированные нами нами гидроксикоричные кислоты являются производными п- кумаровой кислоты.
|
Название вещества |
Время удер живания, мин |
Ocimum americanum |
Lophanthus anisatus |
Satureja hortensis |
|
Хлорогеновая кислота |
18.38-22.53 |
31.85 |
25.45 |
- |
|
Кофейная кислота |
25.45-31.80 |
0.46 |
2.35 |
1.19 |
|
п-Кумаровая кислота |
31.81-32.74 |
- |
1.85 |
0.82 |
|
Ферулловая кислота |
37.17 |
- |
- |
2.82 |
|
Розмариновая кислота |
40.89-40.90 |
278.75 |
119.32 |
146.52 |
Таблица 1 - Количественное содержание гидроксикоричных кислот в траве исследуемых видов, х10-2, %
Как видно из полученных результатов (см. табл. 1, рис. 1), доминирующий компонент травы всех трех видов - розмариновая кислота, которая является известным антиоксидантом и достаточно распространена среди других представителей подсемейства Nepetoideae семейства Lamiaceae [4, 8]. Максимальное содержание этого соединения обнаружено в траве Ocimum americanum, минимальное - в траве Lophanthus anisatus. Следует отметить, что при изучении
26
водных экстрактов травы изучаемых растений [6] было установлено доминирование п- гидроксикоричной и ферулловой кислот.
При культивировании в Грузии [4] трава Satureja hortensis характеризуется наибольшим содержанием розмариновой и хлорогеновой кислот. ВЭЖХ-анализ травы Ocimum basislicum, выращенного в Румынии [7], показал доминирование в листьях растения п-кумаровой и ферулловой кислот.
Как видно из полученных результатов, качественный состав гидроксикоричных кислот является, в значительной степени, сходным как в исследуемых нами видах, так и в выращенных в других странах растениях из родов, к которым они принадлежат. Это свидетельствует о хемотаксономическом родстве растений. Вместе с тем, количественное содержание этих соединений довольно сильно варьирует, что можно объяснить влиянием на растения разных климатических условий, особенностями культивирования и их значительным внутривидовым полиморфизмом [3].
ВЫВОДЫ
Методами бумажной и высокоэффективной жидкостной хроматографии проанализированы качественный состав и количественное содержание гидроксикоричных кислот в надземной части трех представителей подсемейства Nepetoideae семейства Lamiaceae - Ocimum americanum, Lophanthus anisatus и Satureja hortensis. Розмариновая кислота является доминирующим компонентом надземной части всех трех исследованных видов растений. Полученные результаты могут быть использованы в хемотаксономии Губоцветных, а также при планировании дальнейших фармакологических исследований.
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
- Кошовий, О.М.. Фенольний склад деяких представників підроду Sclarea роду Salvia // О.М. Кошовий //Акт. пит. фарм. і мед. науки та практики. - 2012. - Т. 3(10). - С. 11-14.
- Марчишин, С.М. Определение гидроксикоричных кислот в антиаллергическом сборе методом ВЭЖХ / С. М. Марчишин, С. С. Козачок // Сетевое научное издание : Медицина и образование в Сибири. - 2013. — № 4— Режим доступа:http://ngmu.ru/cozo/mos/article/text full.php?id=1101
- Ноотропная активность некоторых фитопрепаратов и фенилпропаноидов / В.А. Куркин (и др.) // Растит. ресурсы. - 2007. - Вып. 2. - С. 76-83.
- Химический состав и фармакологическая активность листьев чабера садового (SaturejahortensisL.) произрастающего в Грузии / Э.П. Кемертелидзе ( и др.), Химико-фарм. журнал. - 2004. - Т.38, № 6. - С. 33-35.
- Чумакова, В.В. Изучение фенольных соединений травы лофанта анисового / В.В. Чумакова, О.И. Попова // Фармация. - 2011. - № 3. - С. 20-22.
- Шанайда, М.И. Анализ содержания органических кислот в надземной части представителей семейства Lamiaceae Juss./ М.И.Шанайда, В.В.Шанайда// Лекарственные растения: фундаментальные и прикладные аспекты: докл. Междунар. науч. конф., Новосибирск, Россия, 21-22 мая 2013. - Новосибирск, 2013. - С.243-244.
- EvaluationofantioxidantandantimicrobialactivitiesandphenolicprofileforHyssopusofficinalis, OcimumbasilicumandTeucrium chamaedrysL. / L. Vlase (etc.) // Molecules. - 2014.- Vol. 19, № 5. - P. 5490-5507.
- PetersenM. Rosmarinicacid / M.Petersen,M. Simmonds // Phytochemistry. - 2003. -Vol. 62, № 2. - P. 121-125.