АННОТАЦИЯ
Описаны биофармацевтические свойства верапамила гидрохлорида, его растворимость и проницаемость. Проведено изучение сравнительной кинетики растворения (профилей растворения) лекарственных средств верапамила гидрохлорида.
Ключевые слова: верапамила гидрохлорид, «биовейвер», профиль растворения.
Таблетки верапамила гидрохлорида обладают высокой биодоступностью [2]. Однако часто наблюдаются различия в терапевтической эффективности, которые в ряде случаев обусловлены различием в высвобождении действующего вещества из лекарственной формы дженериков. Подтверждение биоэквивалентности воспроизведенных лекарственных средств (ЛС) с помощью теста «Растворение» считают одним из актуальных подходов к этой проблеме [6, 8]. В последнее время предлагают использовать этот тест в качестве альтернативы испытаниям in vivo при оценке биоэквивалентности воспроизведенных ЛС.
В руководстве FDA для промышленности [8] по тесту «Растворение» для твердых лекарственных форм рекомендуется биофармацевтическая классификация ЛС, предложенная в 1995 г., в основу которой положены растворимость лекарственного вещества и его всасывание в желудочно-кишечном тракте (ЖКТ). Согласно принятому мнению, вещество «хорошо растворимо», если при значениях pH 1-8 в 250 мл буфера растворяется вся доза действующего вещества. Считается также, что вещество «хорошо всасывается», если из ЖКТ всасывается не менее 90% дозы.
В соответствии с данными критериями выделяют 4 группы веществ: 1) хорошо растворяются + хорошо всасываются; 2) плохо растворяются + хорошо всасываются; 3) хорошо растворяются + плохо всасываются; 4) плохо растворяются + плохо всасываются.
Для анализа нами были выбраны ЛС группы блокаторов кальциевых каналов, в частности верапамила гидрохлорид. То, что верапамила гидрохлорида - соль, образованная азотистым основанием и минеральной кислотой, обусловливает хорошую растворимость этого соединения в растворах минеральных кислот и в воде. Вместе с тем биодоступность верапамила гидрохлорида при пероральном применении достаточно высока [2]. Поэтому данное ЛС можно отнести к 1-й группе по биофармацевтической классификационной системе (БКС).
Цель настоящей работы - изучение кинетики растворения таблеток верапамила гидрохлорида разных производителей для того, чтобы сделать вывод о влиянии вспомогательных веществ на высвобождение действующего вещества.
Экспериментальная часть
Объектами исследования были таблетки верапамила гидрохлорида трёх разных производителей.
Изучение сравнительной кинетики растворения проводили в соответствии с требованиями ВОЗ в 3 буферных средах с рН 1,2 (солянокислый буфер); 4,5 (ацетатный буфер); 6,8 (фосфатный буфер) и в соответствии с требованиями Руководства по клиническим исследованиям «Исследование биодоступности и биоэквивалентности» [3]. Все буферные растворы готовились по методикам ГФУ [1]. рН растворов измеряли на рН-метре, в случае необходимости доводили рН до нужного значения. Тест «Растворение» проводили в аппарате Pharma Test «Прибор с лопастью» (температура - 37ОС, скорость вращения лопасти - 75 об/мин, объем среды растворения - 900 мл).
В одну корзину помещали по 1 таблетке каждого из препаратов верапамила гидрохлорида соответственно. Последовательный отбор проб проводили через 10, 15, 20, 30, 45 мин по 10 мл, такой же объем буферного раствора добавляли в среду растворения для сохранения объема. Полученным пробам давали отстояться при комнатной температуре в течение 20-30 мин, затем фильтровали через бумажный фильтр «синяя лента». Для получения статистически достоверных результатов исследование проводили по 6 раз для каждого препарата.
Содержание извлеченного действующего вещества определяли методом УФ-спектрофотометрии. Оптическую плотность проб измеряли на спектрофотометре Evolution 60S при длинах волны 278 и 300 нм в кювете с толщиной слоя 10 мм. Параллельно измеряли оптическую плотность раствора стандарта верапамила гидрохлорида с концентрацией 0,04 мг/мл в соответствующем буфере. Раствором сравнения служил тот же буферный раствор, который использовался в качестве среды растворения.
Для определения характера спектра поглощения были сняты ультрафиолетовые спектры стандартного образца (СО) верапамила гидрохлорида во всех буферных средах с концентрацией действующего вещества 0,04 мг/мл. Для определения высвободившегося действующего вещества в таблетках верапамила гидрохлорида в тесте «Растворение» Фармакопея США рекомендует использовать разницу оптических плотностей при длинах волн 278 нм и 300 нм [7].
В результате проведенного эксперимента были получены профили высвобождения верапамила гидрохлорида из таблеток трёх производителей. Согласно анализу полученных данных, верапамила гидрохлорид достаточно быстро переходит в раствор: уже через 15 мин высвобождается не менее 70% действующего вещества, после чего процесс растворения резко замедляется. Как это часто бывает, наиболее значимые различия между профилями высвобождения наблюдались в начале проведения теста - в точке 10 мин. В солянокислой среде наблюдается максимальное высвобождение верапамила гидрохлорида.
Сопоставимость полученных профилей высвобождения оценивается с помощью рекомендованного модельно-независимого метода путем расчета 2 параметров: фактора различия (f1) и фактора подобия (f2). ВОЗ рекомендует для сравнения профилей высвобождения использовать только фактор подобия. Фактор различия показывает разницу между кривыми в процентах, фактор подобия оценивает, соответственно, подобие 2 кривых в процентах. Считается, что различие между кривыми отсутствует, если фактор различия (f1) принимает значения от 0 до 14, а фактор подобия (f2) - от 51 до 100.
Таблица 1- Сводная таблица значений факторов различия и подобия для кривых высвобождения верапамила гидрохлорида из таблеток
|
рН |
f1 образец №1/референтный препарат |
f1 образец №2/референтный препарат |
f2 образец №1/референтный препарат |
f2 образец №2/референтный препарат |
|
1,2 |
4,94 |
3,73 |
67,29 |
72,68 |
|
4,5 |
6,03 |
2,90 |
61,84 |
75,44 |
|
6,8 |
5,04 |
4,28 |
65,59 |
71,04 |
Таким образом, даже в выбранных условиях растворения, которые благоприятствуют высвобождению верапамила гидрохлорида из лекарственного препарата, можно найти различия между препаратами с использованием общепринятого способа расчета.
Выводы:
1. Для сравнения препаратов-дженериков, содержащих верапамила гидрохлорид, можно использовать тест «Растворение» с применением рекомендованного расчета факторов различия и подобия.
2. По результатам изучения сравнительной кинетики растворения, статистической обработки, расчета факторов подобия и отличия наблюдается эквивалентность профилей растворения препаратов верапамила гидрохлорида при рН 1,2; 4,5; 6,8.
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
- Государственная фармакопея Украины. - Доп. 2. - Х.: РИРЕГ, 2008. - 620 с.
- Компендиум 2010. Лекарственные препараты [Электронный ресурс] справочник / под ред.: В. Н. Коваленко, А. П. Викторова. - Электрон. дан. - К. : МОРИОН, 2010. - 1 эл. опт. диск (CD-ROM). - Систем. требования: Windows 2000, Windows XP, Windows 2003. - Загл. с контейнера.
- Руководство 42-7.1:2005. Руководства по клиническим исследованиям. Лекарственные средства. Исследование биодоступности и биоэквивалентности. - К. - 2005. - 19 с.
- British Pharmacopoeia. - London. The Stationary Office. - 2001. - Vol. 1-2. - 3199 p.
- European Pharmacopoeia. - 6th ed. - Strasbourg: European Department for the Quality of Medicines, 2008. - 2416 p.
- Lindenberg M., Kopp S., Dressman J. Classification of orally administered drugs on the WHO Model List of Essential Medicines according to the biopharmaceutics classification system // European Journal of Pharmaceutics and Biopharmaceutics. - 2004. - №58. - p. 265-278.
- The United States Pharmacopoeia, XXIV ed. - United States Pharmacopoeia Convention, Inc, 2000.- P.2149
- WHO Technical Report Series 937, annex 8 “Proposal to waive in vivo bioequivalence requirements for WHO Model List of Essential Medicines immediate-release oral dosage forms” // WHO expert Committee on Specifications for Pharmaceutical Preparations, 2006.