В цветках C. pseudomelanocarpa M. Pop. методом хромато-масс-спектрометрии выявлено и установлено содержание 49 соединений, из которых 5 ароматических и 13 терпеноидных соединения. Общий выход эфирного масла составляет 0,34%. Основными терпеноидными соединениями являются лимонен, а-терпинеол, линалоол, цис-линалоолоксид, транс-линалоолоксид, гераниол, геранилацетон, метилизоэвгенол, сквален, гексагидрофарнезилацетон. Доминирующими являются сквален (18,54%) и а-терпинеол (0,65%), среди ароматических соединений - бензофенон (7,77%).
Ключевые слова: Crataegus pseudomelanocarpa, цветки, хромато-масс-спектрометрия, терпеноиды, ароматические соединения.
Род Crataegus L. (Боярышник) семейства Rosaceae представлен в мировой флоре более 1500 видами, его представители применяются в научной и нетрадиционной медицине многих стран. Crataegus pseudomelanocarpa является представителем секции Pentagynae, к которой относится фармакопейный вид Crataegus pentagyna Waldst. et Kit. Известно, что близкие виды могут иметь сходный химический состав [3]. Исходя из этого, научный интерес представляет фитохимическое изучение Crataegus pseudomelanocarpa с целью расширения номенклатуры растительных источников биологически активных веществ (БАВ).
Целью данной работы стало определение качественного и количественного содержания ароматических и терпеноидных соединений цветков Crataegus pseudomelanocarpa M. Pop.
Материалы и методы. Объектом исследования стали цветки C. pseudomelanocarpa M.Pop., заготовленные на территории Украины (г. Харьков, ботанический сад университета им. В.Н. Каразина, май 2014 г.). Качественный состав и количественное содержание веществ в цветках определяли хромато-масс-спектрометрическим методом [1, 2]. Навеску воздушно-сухого сырья (0,5 г) помещали в виалу на 20 мл и добавляли внутренний стандарт - тридекан, с последующим использованием полученной концентрации внутреннего стандарта для расчетов. Количественное содержание веществ пересчитывали на сырье. Исследование проводили на хроматографе Agilent Technology HP6890 GC с масс-спектрометрическим детектором 5973N. Условия анализа: хроматографическая колонка кварцевая, капиллярная HP-5MS. Длина колонки 30 м, внутренний диаметр 0,25 мм. Газ-носитель - гелий. Скорость движения газа-носителя 1 мл/1 мин. Объем пробы - 2 мкл. Введение пробы splitless, без разделения потока. Скорость введения пробы 1,2 мл/1мин. в течение 0,2 мин. Температура термостата 50 0С с программированием 4 0/мин. до 220 0С. Температура детектора и испарителя 250 0С.
Результаты и их обсуждение
Полученные спектры рассматривали как на основе общих закономерностей фрагментации молекул органических веществ под действием электронного удара, так и в сравнении с данными масс-спектральной библиотеки NIST 05 и WILEY 2007 с общим количеством спектров более 470000 в комплексе с программами для идентификации AMDIS и NIST.
В результате исследования установлено, что выход летучих соединений из цветков C. pseudomelanocarpa M. Pop. составляет 0,34%, из них 0,015% - ароматические соединения, 0,079% - терпеноидные соединения, 0,062% - жирные кислоты, 0,16% - высшие углеводороды. Обнаружено 49 веществ разной химической структуры. Ароматические и терпеноидные соединения, идентифицированные в цветках, представлены в табл. 1.
Количественное содержание ароматических соединений и терпеноидов составило 898,3 мг/кг, что составляет 26,50% от суммы летучих веществ. Среди ароматических соединений (в мг/кг) - бензальдегид (1,4), в-фенилэтиловый спирт (21,4), 2-метокси-4-винилфенол (9,5), бензофенон (69,8), бензилбензоат (10,3); среди терпеноидов - лимонен (2,7), транс-линалоолоксид (6,3), цис- линалоолоксид (4,2), линалоол (4,1), а-терпинеол (22,3), гераниол (4,1), анисовый альдегид (41,4), эвгенол (10,1), геранилацетон (4,8), метилизоэвгенол (1,6), дигидрометилжасмонат (8,7), гексагидрофарнезилацетон (37,0), сквален (628,6).
Среди терпеноидов доминирует сквален (18,54%); среди ароматических соединений - бензофенон (2,06%).
Таблица 1 -Ароматические и терпеноидные вещества цветков C. Pseudomelanocarpa
|
Соединение |
Время удерживания |
Количественное содержание в сырье (мг/кг) |
|
Лимонен |
8,90 |
2,7 |
|
Бензальдегид |
9,69 |
1,4 |
|
транс-Линалоолоксид |
11,07 |
6,3 |
|
цис-Линалоолоксид |
11,82 |
4,2 |
|
Линалоол |
11,93 |
4,1 |
|
в-Фенилэтиловый спирт |
15,23 |
21,4 |
|
а-Терпинеол |
16,20 |
22,3 |
|
Гераниол |
18,47 |
14,1 |
|
Анисовый альдегид |
21,28 |
41,4 |
|
2-Метокси-4-винилфенол |
21,98 |
9,5 |
|
Эвгенол |
23,01 |
10,1 |
|
Геранилацетон |
24,58 |
4,8 |
|
Метилизоэвгенол |
24,95 |
1,6 |
|
Дигидрометилжасмонат |
30,42 |
8,7 |
|
Бензофенон |
31,09 |
69,8 |
|
Гексагидрофарнезилацетон |
31,70 |
37,0 |
|
Бензилбензоат |
33,11 |
10,3 |
|
Сквален |
42,76 |
628,6 |
Выводы
- В цветках C. pseudomelanocarpa M. Pop. методом хромато-масс-спектрометрии выявлено и установлено содержание 49 соединений, из которых 5 ароматических и 13 терпеноидных соединения. Общий выход эфирного масла составляет 0,34%.
- Основными терпеноидными соединениями C. pseudomelanocarpa M. Pop. являются лимонен, а-терпинеол, линалоол, цис-линалоолоксид, транс-линалоолоксид, гераниол, геранилацетон, метилизоэвгенол, сквален, гексагидрофарнезилацетон, Доминирующими являются сквален (18,54%) и а-терпинеол (0,65%).
- Среди ароматических соединений идентифицированы бензальдегид, в-фенилэтиловый спирт, 2-метокси-4-винилфенол, бензофенон, бензилбензоат. Доминирующим является бензофенон - 7,77% от суммы летучих веществ.
ЛИТЕРАТУРА
- Сидора Н.В., Ковальова А.М., Комісаренко А.М. Хромато-мас-спектрометричне дослідження ліпофільних сполук глодів представників секцій Tenuifoliae Sarg. / Актуальні питання фармацевтичноі і медичноі' науки та практики. - №2. - 2012. - С. 26-30.
- Direct resistively heated column gas chromatography (Ultrafast module-GC) for high-speed analysis of essential oils of differing complexities / C. Bicchi, C. Brunelli, C. Cordero, P. Rubiolo and others // J. Chromatogr. A. - 2004. - V. 1024, №1 - 2. - Р. 195 - 207.
- Quattrocchi, Umberto. CRC world dictionary of plant names: common names, scientific names, eponyms, synonyms and etymology / Umberto Quattrocchi. - Roca-Ratea. Florida. USA. 2012. - v. I. A. - C. 634 p.