АННОТАЦИЯ
С использованием высокоэффективной жидкостной хроматографии разработана методика качественного и количественного анализа аскорбиновой кислоты в фитопрепарате «Урглисал». Хроматографию проводили использованием хроматографа Agilent 1200 (Agilent, США) в следующих условиях: колонка - Zorbax XDB C18 0.4 х 5 см с частицами 5ц, подвижная фаза 25 мМ раствор серной кислоты в воде, детектирование при 250 нм. Содержание аскорбиновой кислоты в препарате составил 70.362 мкг/мл. Ошибка разработанной методики составляет + 3,92 %.
Ключевые слова: аскорбиновая кислота, высокоэффективная жидкостная хроматография
До сих пор сохраняется актуальность и разработка новых лекарственных средств на основе растительных источников в связи с комплексным или уникальным их действием на организм человека. Особенно важно отметить комбинированные растительные препараты, которые содержат ряд биологически активные вещества и действуют комплексно. Одним из перспективных лекарственных растений являются сырьё солодки голой - Glycyrrhiza glabra L., шалфея лекарственной - Salvia officinalis L. и крапивы двудомной - Urtica dioica L. Нами на основе указанных лекарственных растений был получен препарат. Предварительные исследования показали, что он содержит такие биологически активные соединения как флавоноиды, терпеноиды, дубильные вещества, аминокислоты, витамины, макро и микроэлементы.
Целью настоящей работы является разработать методику качественного и количественного определения аскорбиновой кислоты в комплексном фитопрепарате «Урглисал» с использованием метода ВЭЖХ.
Материалы и методы.
Подлинность и количественное содержание аскорбиновой кислоты в препарате определяли методом ВЭЖХ. Хроматографию проводили использованием хроматографа Agilent 1200 (Agilent, США) в следующих условиях: колонка - Zorbax XDB C18 0.4 х 5 см с частицами 5ц, подвижная фаза 25 мМ раствор серной кислоты в воде, детектирование при 250 нм. Идентификацию аскорбиновой кислоты (АК) и дегидроаскорбиновой кислоты (ДАК) проводили по сравнению времен удерживаний пиков.
Приготовление раствора рабочего стандартного образца аскорбиновой кислоты: навеску растворяли в подвижной фазе в концентрации 0,220 мг/мл (абсолютная концентрация с учетом чистоты 0.220 х 0.985 = 0.217 мг/мл), раствор стандарта перед нанесением на колонку фильтровали через миллипоровский фильтр с порами 0.22 микрон. Дегидроаскорбиновую кислоту получали окислением раствора АА раствором иода (KI3) по известной методике. После окисления образец
ДАК разбавляли до концентрации АА, фильтровали через миллипоровый фильтр и использовали в качестве стандарта ДАК. Полученные результаты представлены на рисунках 1-3.
Из представленных хроматограмм видно, что время удерживания аскорбиновой и дегидроаскорбиновой кислот составляет 0,96 и 0,67 мин., соответственно.
Концентрации АК и ДАК расчитывали по формуле: тл лтл SJtf-SHip .діі; ’
Концентрация АК = —г-——— ; j.L'i “111'.
где SAK-smp - площадь пика аскорбиновой кислоты в хроматограмме испытуемого раствора
SAK-std - площадь пика аскорбиновой кислоты в хроматограмме стандарта
Dill - разведение испытуемого образца
Концентрация аскорбиновой кислоты в экстракте жидком при вычислении вышеприведенной
формулой составил 70.362 мкг/мл. Содержание дегидроаскорбиновой кислоты - 22.642 мкг/мл.
Как показывают результаты анализов, общее содержание аскорбиновой кислоты в жидком экстракте составляет (АК + ДАК) = 92.9 мкг/мл.
ЛИТЕРАТУРА
1. Скалозубова Т.А., Марахова А.И., Сорокина А.А. Изучение фенольных соединений листьев крапивы двудомной// Прикладная аналитическая химия. - 2011. - №3 (5). - С. 20 - 26.
2. М.В. Егоров, В.А. Куркин, Г.Г. Запесочная, В.А. Быков. Качественный и количественный анализ сырья и препаратов солодки. // ВЕСТНИК ВГУ. -Фармация. -2005. -№ 1. -С. 175 - 180