АННОТАЦИЯ
В настоящем исследовании разработана спектрофотометрическая методика количественной оценки суммы флавоноидов суппозиториев с экстрактом маклюры, с целью дальнейшего изучения данного препарата в качестве простатопротекторного средства.
Ключевые слова: стандартизация, суппозитории, изофлавоноиды, спектрофотометрия, осайин.
Введение
Хронический простатит и аденома простаты остаются весьма распространенными заболеваниями. Высокая социальная значимость данной проблемы обусловлена тем, что эти патологии встречаются во всех возрастных и этнических группах среди мужского населения, с негативным влиянием на половую, репродуктивную функции и психоэмоциональную сферу, существенным ухудшением качества жизни мужчин [1, 2].
В последние годы широкое применение в терапии заболеваний предстательной железы нашли препараты растительного происхождения. Это связано с тем, что благодаря наличию в них различных групп биологически активных веществ (БАВ), обеспечивается всестороннее влияние на несколько звеньев патогенеза заболевания, а также, в значительной степени, меньшему количеству побочных эффектов, которые наблюдаются при использовании синтетических лекарственных средств [3, 4].
Разработанные нами суппозитории с масляным экстрактом маклюры оранжевой (Maclura pomifera, Moraceae), являются богатым источником тритерпенов и фитостеринов. В проведенных нами фитохимических исследованиях отмечено содержание в них таких веществ как лупеол, в- ситостерин, известные своими простатопротекторными свойствами. Наряду с тритерпенами высокое терапевтические воздействие оказывает присутствие изофлавонов, обладающих
противовоспалительными и антиоксидантными свойствами [5, 6, 7, 8].
Целью настоящей работы является разработка методики количественной оценки суммы флавоноидов суппозиториев с масляным экстрактом маклюры оранжевой.
Материалы и методы
Объектом исследования являлись суппозитории с масляным экстрактом маклюры полученные методом выливания в поливинилхлоридные формы, в качестве основы был использован твердый жир.
При разработке методики количественного анализа суппозиториев использовались физикохимические методы, рекомендованные государственными фармакопеями Украины и Казахстана [9, 10].
Количественное определение проводили спектрофотометрическим методом в видимой области. Для анализа использовались спектрофотометры марки ThermoScientific Evolution S60 (США) и Apel PD303S (Япония).
Определение суммы изофлавоноидов выполнялось в пересчете на достоверный образец осайин ("BioBioPha Co., Ltd.", Китай; CAS:482-53-1).
Результаты и обсуждение
Для количественного определения суммы изофлавоноидов был использован метод дифференциальной спектрофотометрии, основанный на избирательном взаимодействии раствора алюминия хлорида с соединениями флавоноидной структуры. В результате образуется раствор насыщенного желтого цвета, что позволяет измерить его оптическую плотность в видимой области.
Методика анализа заключается в следующем: около 10 г измельченных суппозиториев (точная навеска) отвешивается в коническую колбу, прибавляют 20 мл 95% спирта этилового и нагревают на кипящей водяной бане в течение 10 мин при перемешивании. Полученный раствор охлаждают, фильтруют через бумажный фильтр в мерную колбу на 50 мл и доводят спиртом этиловым до метки (раствор А).
5 мл раствора А переносится в мерную колбу на 25 мл и добавляется 5 мл 2% раствора алюминия хлорида и нагревается при температуре 80° в течение 30 мин, далее раствор охлаждают до комнатной температуры и доводят до метки. Раствор сравнения готовят аналогично, без добавления алюминия хлорида. Измеряют оптическую плотность на спектрофотометре при длине волны 419 нм в кювете с толщиной слоя 10 мм относительно раствора сравнения (рисунок 1).
где D - оптическая плотность испытуемого раствора; b - средняя масса суппозитория, в граммах; m - масса навески препарата, в граммах; Dst - оптическая плотность раствора стандартного образца; mst - масса стандартного образца, в граммах.
Приготовление раствора стандартного образца осайина. Около 0,025 (точная навеска) осайина растворяют в 40 мл спирта этилового при нагревании и после охлаждения доводят до 100 мл (раствор А).
5 мл раствора А переносят в мерную колбу на 25 мл, добавляют 5 мл 2% раствора алюминия хлорида и нагревается совместно с исследуемым образцом при температуре 80° в течение 30 мин. Далее раствор охлаждают до комнатной температуры и доводят до метки. Раствор сравнения готовят аналогично, без добавления алюминия хлорида.
Статистически обработанные результаты количественных определений приведены в таблице 1.
|
БАВ |
X |
f |
P |
S |
t (95, 6) |
А* |
*±А* |
E |
|
|
Сумма изофлавоноидов |
2,41 |
5 |
0,95 |
0,0539 |
0,0220 |
2,45 |
0,054 |
2,41± 0,054 |
2,24% |
Таблица 1 - Метрологические характеристики количественного определения в суппозиториях с экстрактом маклюры
Таким образом, нами разработана методика, позволяющие проводить количественную оценку суммы флавоноидов суппозиториев с экстрактом маклюры. Относительная погрешность не превышала ± 2,24 %.
Выводы
- Разработана методика количественного определения в суппозиториях суммы изофлавоноидов в перечете на осайин. Ошибка метода не превышает ± 2,24 %.
ЛИТЕРАТУРА
- Переверзев А. С., Сергиенко Н. Ф., Илюхин Ю. А. Заболевания предстательной железы. Харьков - 2005. - 260с. ISBN: 966-8591-054.
- Аль-шукри С. Х., Солихов Д. Н. Современные методы лечения хронического простатита (обзор литературы) //Нефрология. - 2009. - Т. 13. - №. 2. - С. 86-91.
- Коротков В. А. Сравнительный анализ рынка простатопротекторов Казахстана, России и Украины // Вестник ЮКГФА. - 2013. - №3.(64). - С. 6-10.
- Мирошников В. М. Лекарственные растения и препараты растительного происхождения в урологии. М.: МЕДпресс-информ. - 2005. - 240с.
- Коротков В.А., Кухтенко А.С.,Абдрахимова Г. Идентификация фитостеринов в масляном экстракте маклюры // Вестник ЮКГФА. - 2013. - Т.3. - №.4(65). - С.20-22.
- Коротков В.А., Кухтенко А.С.,Кенжалиева Г. Разработка методики количественного определения суммы тритерпенов и фитостеринов в суппозиториях // Вестник ЮКГФА. - 2013. - Т.3. - №.4(65). - С.27-29.
- Saloua F., Eddine N. I., Hedi Z. Chemical composition and profile characteristics of Osage orange( Maclura pomifera) //Industrial crops and products. - 2009. - V. 29. - N 1. - P. 1-8.
- Tsao R., Yang R., Young J. C. Antioxidant isoflavones in osage orange, Maclura pomifera (Raf.) Schneid //Journal of agricultural and food chemistry. - 2003. - V. 51. - №. 22. - P. 6445-6451.
- Государственная Фармакопея Республики Казахстан, I изд., Астана - 2008.- 591с.
- Державна фармакопея Украіни, I вид., Харків - 2001. - 531 с.