АННОТАЦИЯ
Предложена экстракционно-фотометрическая методика количественного определения метопролола тартрата в таблетках. Методика основана на образовании ионного ассоциата с метиловым оранжевым, хлороформный раствор которого имеет максимум поглощения при длине волны 431 нм. В процессе работы подобраны реактивы для образования ионного ассоциата (0,1% раствор метилового оранжевого, фосфатный буферный раствор с рН 3,5). Методика позволяет определить содержание метопролола тартрата в пределах концентрации от 22,0-10-4 до 2,2-10-3 г/мл. Изучена стабильность хлороформного раствора ионного ассоциата (стабилен в течение часа) и линейность, которая свидетельствуют о корректности методики количественного определения.
Ключевые слова: количественное определение, бета-адреноблокатор, метопролола тартрат, таблетки, экстракционно-фотометрический метод.
Метопролола тартрат - кардиоселективный в1-адреноблокатор. Применяется при ишемической болезни сердца, стенокардии, инфаркте миокарда, артериальной гипертензии, тахикардии. Количественное определение метопролола тартрата в таблетках проводят хроматографическим [1] и спектрофотометрическим методами [2]. Для количественной оценки метопролола тартрата в субстанции используют метод кислотно-основного титрования в неводной среде [3,4].
Цель исследования - разработка высокочувствительной, простой в исполнении экстракционно-фотометрической методики количественного определения метопролола тартрата в таблетках, основанной на измерении оптической плотности хлороформного раствора ионного ассоциата с метиловым оранжевым.
Материалы и методы.
В качестве объекта исследования использовали таблетки «Метопролол таблетки 50 мг» (Артериум, Украина), серия №68378 и стандартный образец метопролола тартрат (Индия), серии №Ф.07000048 999.
Реактивы: краситель метиловый оранжевый ч.д.а; вода очищенная; спирт 96%; аммония ацетат ч.д.а; фосфатный буферный раствор с рН=3,5; хлороформ.
Аналитические оборудование: спектрофотометр Evolution 60S фирмы Thermo Fisher Scientific, США, потенциометр рН-150МИ, исследования проводили с использованием весов электронных лабораторных «AXIS» ANG 200 (Польша), мерной посуды класса А.
Методика. Приготовление исследуемого раствора метопролола тартрата. К точной навеске порошка таблеток, эквивалентной 50 мг, прибавляют 20 мл воды очищенной Р, встряхивают на протяжении 5 минут, доводят объем водой очищенной Р до 50,0 мл, перемешивают и фильтруют.
Аликвоту исследуемого раствора объемом 0,5 мл переносят в делительную воронку. Прибавляют 20 мл буферного раствора с рН=3,5, 3 мл 0,1% раствора метилового оранжевого, 10 мл хлороформа. Встряхивают в течение 5 минут и оставляют для разделения слоев. Хлороформную вытяжку фильтруют через бумажный фильтр в мерную колбу на 50 мл. Экстракцию хлороформом повторяют еще дважды, используя каждый раз по 10 мл хлороформа. Отфильтровывают через тот же фильтр в мерную колбу, доводят объем хлороформом до метки, перемешивают. Аналогично готовят раствор сравнения с использованием 0,05 г стандартного образца метопролола тартрата. Оптическую плотность полученного раствора измеряют при длине волны 431 нм относительно компенсационного раствора, на спектрофотометре в кювете с толщиной слоя 10 мм. В качестве компенсационного раствора используют хлороформ.
Содержание метопролола тартрата в таблетках рассчитывали в граммах, в пересчете на среднюю массу одной таблетки.
Результаты и обсуждения.
Результаты количественного содержания метопролола тартрата в таблетках «Метопролол» приведены в таблице 1
Таблица 1 - Метрологические характеристики среднего результата метопролола тартрата в таблетках (Р=95%, t(P,v)=2,57)
|
v |
x |
S2 |
S |
Sx |
Ax |
Ax |
8,% |
|
1 |
2 |
3 |
4 |
5 |
6 |
7 |
8 |
|
5 |
0,05 |
6,7-10-86 |
0,0003 |
0,00011 |
0,00027 |
0,00011 |
0,22 |
Как видно из данных таблицы относительная ошибка среднего результата ±0,22% не превышает нормы допустимых отклонений ±7,5%, т.е. таблетки метопролола тартрата 50 мг по количественному содержанию соответствуют требованиям Государственной фармакопеи Украины [5].
Проверка стабильности растворов является одним из элементов изучения робастности методики и должна проводиться перед началом изучения всех остальных валидационных характеристик. Для оценки робастности проверяли стабильность хлороформных растворов (исследуемого и стандартного) путем измерения по три раза с выниманием кюветы оптической плотности при длине волны 431 нм в течение часа через 15, 30, 45, 60 минут. Результаты статистической обработки экспериментальных данных и оценка их путем сравнения с критическими значениями приведены в табл.2.
|
t, мин розчину |
исследования стабильности t,, мин |
Среднее |
RSDt |
At |
3max,% |
||||
|
0 |
15 |
30 |
45 |
60 |
|||||
|
Ао |
0,538 |
0,536 |
0,536 |
0,534 |
0,533 |
0,535 |
0,3852 |
0,8213 |
1,54 |
|
А |
0,540 |
0,538 |
0,538 |
0,537 |
0,534 |
0,537 |
0,4076 |
0,8690 |
|
Таблица 2 - Стабильность растворов во времени
Установлено, что анализируемые растворы стабильны в течение 60 минут.
Линейность изучали для 9 концентраций модельного раствора, которые охватывают диапазон от 80% до 120% от номинального содержания в препарате. На основе полученных данных строили график зависимости оптической плотности от концентрации исследуемого вещества в нормализованных координатах (рис.1).
Установлено, что, выполняются все требования по параметрам линейной зависимости, т.е. линейность методики подтверждается во всем диапазоне исследуемых концентраций (табл. 3).
22
В результате выполнения экспериментальных исследований доказано, что хлороформный раствор ионного ассоциата метопролола тартрата с метиловым оранжевым при комнатной температуре достаточно устойчив. Предлагаемая методика позволяет достоверно определять количественное содержание метопролола тартрата в таблетках.
ЛИТЕРАТУРА
- Metoprolol tartrate tablets // US Pharmacopeia. - 2007. - Vol. III: Formulated Preparations:Specific Monographs. - 1070
- Chaitali Dhale, Suhas Joshi, Shubhangi Shete. Development and validation of spectrophotometric method for determination of metoprolol tartrate // Journal of Applied Pharmacy - 2014. - V. 6. - Issue 3. - Р. 280 -285
- Metoprolol tartrate // British Pharmacopoeia. - Vol. III: Formulated Preparations: Specific Monographs. - 2009. - 10952
- Metoprolol tartrate // The Japanese Pharmacopoeia. - [Sixteenth Edition]. - 2011. - 2326
- Государственная фармакопея Украины // Государственное предприятие «Научноэкспертный фармакопейный центр». - 1-е изд. - Доп. 2. - Харьков: Государственное предприятие «Научно-экспертный фармакопейный центр», 2008. - 620 с.