Выделение и характеристика тритерпеноидов из растения astragalus alopecias pall. произрастающего в южном Казахстане

АННОТАЦИЯ

В статье приводятся данные о выделенных индивидуальных веществах из Астрагала лисовидного. Сравнительным анализом ИК - спектров, 1Н и 13С ЯМР спектров установлено, что выделенные вещества являются, циклоунифолиозидом А, 3—O—в—D—глюкопиранозидом в- ситостерина и 3—O—в—D—глюкопuранозидом олеаноловой кислоты.

Ключевые слова: ИК - спектры, 1Н и 13С ЯМР спектры, тритерпеноиды, циклоартан, олеаноловая кислота

Цель исследования: выделение вторичных метаболитов астрагала лисовидного.

Материалы и методы.

Растение Astragalus alopecias Pall. собрано в мае 2013года в Арысском районе с. Кожатогай Южно-Казахстанской области в научно - исследовательском объекте «Бактыолен» «Юго-Западного научно-исследовательского института животноводство и растениводства». Для изучения использовали надземную часть этого растения. Высушенная и измельчённая надземная часть растения (223,74г) была экстрагирована этиловым спиртом. Полученный экстракт сгущали отгонкой спиртов на роторном испарителе и к сгущённому остатку добавили двойной объём воды. Остатки спиртов дополнительно отгоняли на роторном испарителе. Получен 25,74 г этанольного экстракта. Для дальнейшего выделения индивидуальных соединений этанольный экстракт надземной части подвергли колоночной хроматографии на силикагеле элюированием системами 1 и 2.

Результаты и обсуждение. Циклоунифолиозид А (1) (Рис.1), C40H66O12. В ИК-спектре соединения (1) имеются полосы поглощения, характерные для гидроксильных, метиленовых и сложноэфирных групп при 3435, 3050, 1734 и 1251 см-1 соответственно. В спектре 1Н ЯМР рассматриваемого соединения в области сильного поля 0,21; 0,57м.д. резонируют протоны метиленовой группы циклопропанового кольца в виде синглетов. В диапазоне 0,72-1,31м.д. наблюдаются трехпротонные сигналы семи метильных групп. Таким образом, можно предположить, что соединение относится к тритерпеноидам циклоартанового ряда.

Наличие в 1Н и 13С ЯМР спектрах сигналов одного аномерного протона (S(IH)= 4,17 м.д.) и одного аномерного атома углерода (S(13C)= 106,27 м.д.), говорит о том, что соединение 1 является монозидом. В соединении 1 присутствуют две ацетильные группы, о чём свидетельствуют два трехпротонных синглета, химические сдвиги которых 2,45 и 3,10 м.д., и сигналы соответствующих атомов углерода при 25,76; 25,09 м.д. в спектрах 1Н и 13С ЯМР. В гликозиде 1 атом С-3 претерпел эффект гликозилирования и резонирует при 87.48 м.д. Это даёт возможность утверждать, что остаток D-глюкозы присоединён к генину через гидроксил при С-3. Сравнительный анализ показало, идентичность спектральных данных гликозида 1 с таковыми, циклоунифолиозида А, имеющего строение З-О-р-О-глюкопиранозид 6,16-ди-O-ацетил-24R- циклоартан-3р,6а,1бр,24,25-пентаола [1]. Данное соединение было выделено ранее из растения Astragalus unifoliolatus Bunge.

Сравнительный анализ спектров ¹H и ¹³C ЯМР литературными данными показал, что генином является в-ситостерин (3). Углеродные атомы С-5 и С-6 при двойная связи резонируют в спектрах ЯМР ¹³С при 141.2 и 122.08 м.д. соответственно. Метильные группы СН3-26 и СН3-27 присоединенные к боковой цепи агликона в положении С-25 в спектре ¹Н ЯМР резонируют при 1.03 и 1.02 м.д. Метильная группа СН3-29 в спектре ¹Н ЯМР резонирует при 1.00 м.д. В спектре ¹Н ЯМР имеется сигнал метильной группы СН3-21 при 1.02 м.д. В слабом поле в области 3.39 - 3.80 м.д. резонируют сигналы протонов углеводной части. Аномерный атом Н в спектре ¹Н ЯМР углеводной части резонирует при 5.40 м.д.

В спектре ¹Н ЯМР соединения 2 атом водорода в положении С-3 претерпел эффект гликозилирования и резонирует при 3.92 м.д.

Таким образом, сравнительным анализом спектральных данных ¹Н и ¹³С-ЯМР спектров установлено, что соединение 2 является 3-O- e-D-глюкопиранозидом в—ситостерина [2].

З-О-в-О-Г.ііокоііііраііозіід олеаноловой кислоты (4) (Рис. 3). С30Н58О8, [3].

В ИК-спектре соединения 4 имеются полосы поглощения характерные для гидроксильной и свободной карбоксильной групп соответственно при 3447 и 1699 см^-1.

В спектре ¹Н ЯМР соединения 4 в области сильного поля находятся сигналы семи метильных групп, резонирующих при 0.98; 0.99; 1.02; 1.01; 1.13; 1.03 и 1.04 м.д., а также сигнал от протона при двойной связи, в слабом поле при 5.40 м.д. Структура соединения 4 окончательно подтверждена с помощью ¹Н, ¹³С ЯМР и двумерных спектров (COSY, TOCSY). В спектре ¹³С ЯМР углеродные атомы двойной связи С-12 и С-13 резонируют в слабом поле при 123.68 и 145.26 м.д.

Анализ спектральных данных ¹H и ¹³C ЯМР соединения 4 показал наличие в нём сигналов одного анмерного протона и углеродного атома, которые резонируют при 5.40 и 103.22 м.д.

Кислотным гидролизом установлена природа углеводной части. Бумажной хроматографией в гидролизате обнаружена D-глюкоза.

В спектре ¹H и ¹³С ЯМР атом водорода H-3 и углеродный атом С-3 агликонной части гликозида претерпел эффект гликолизирования и резонируют при 3.44 и 88.57 м.д. соответственно. Это указывает на то, что остаток D-глюкозы присоединён к генину через ОН при С-3. Спектральные данные ¹H и ¹³С ЯМР генинной части соединения 4 имеют характерные для тритерпеноида олеананового ряда сигналы.

Сравнительный анализ значений химических сдвигов с литературными данными показало что генином гликозида 4 является олеаноловая кислота (5). Таким образом, установлено, что выделенное из растения Astragalus alopecias соединение 4 является 3-О-в-О-глюкопиранозидом олеаноловой кислоты.

ВЫВОДЫ:

Показано, что надземная часть растения Астрагала лисовидного является источником тритерпеновых соединений. Из надземной части растения выделены три соединения тритерпеновой природы.

1. Выделено и идентифицировано на основании спектральных данных ЯМР ¹H и ¹³С тритерпеновое соединение циклоартанового ряда, циклоунифолиозид А, имеющее строение 3- O-P-D-глюкопиранозид 6,16-ди-O-ацетил-24R-циклоартан-3 Р,6а, 1бр,24,25-пентаола.

122

1. Выделено и идентифицировано на основании спектральных данных и химического превращения, тритерпеновое соединение, гликозидной природы имеющее строение 3-O-P-D- глюкопиранозид в—ситостерина.
2. Выделено и идентифицировано на основании спектральных данных и химического превращения, тритерпеновый гликозид, имеющее строение З-О—вЮ-глюкопиранозид олеаноловой кислоты.

ЛИТЕРАТУРА

1. Кучербаев К.Дж., Утениязов К.К., Качала В.В., Саатов З., Шашков А.С. Тритерпеновые гликозиды растений рода Astragalus. Строение циклоунифолиозида А из Astragalus Unifoliolatus // Химия природ. соедин. - Ташкент, 2002. - № 2. - С. 146-148.
2. Bukharbayeva А.Е., Anes A.T., Kucherbaev K.J., Patsaev А.К. Triterpenoids from Astragalus alopecias of South Kazakhstan Flora // Украінська науково-практична конференція “Проблеми синтезу біологічно активних речовин та створення на іх основі лікарських субстанцій”. 2425 квітня 2014 р., - Харків, 102с.
3. Бухарбаева А.Е., Кучербаев К.Дж., Патсаев А.К., Анес А.Т., Сырманова Н.Р.
4. Фитохимическое исследование и определение доброкачественности растения Astragalus alopecias флоры Южного Казахстана // «Пути успешного достижения решений проблем естественно- гуманитарного образования и нуки в период интенсивного развития Казахстана» 15-16 мая 2014 г. Туркестан , 2014