Одной из наиболее трудных задач современной медицины является проблема лечения злокачественных опухолей. Наряду с совершенствованием известных методов лечения постоянно ведутся поиски новых, одним из которых является лекарственное лечение. Активным противоопухолевым соединением алкилирующего ряда является циклофосфан (эндоксан), обладающий невысокой токсичностью. Задачей данного исследования явилось изучение гистологических изменений в экспериментальной опухоли крыс лимфосаркома Плисса после многократного внутрибрюшинного введения терапевтических доз циклофосфана.
Актуальность. Одной из наиболее трудных задач современной медицины является проблема лечения злокачественных опухолей, и она усложняется ещё и тем, что контингент больных с запущенными формами рака за последнее время стал увеличиваться. Поэтому наряду с совершенствованием известных методов лечения злокачественных опухолей постоянно ведутся поиски новых, одним из которых является лекарственное лечение. Активным противоопухолевым соединением алкилирующего ряда является циклофосфан (эндоксан), обладающий невысокой токсичностью. Его положительная особенность заключается в широком спектре действия в отношении многих экспериментальных штаммов опухолей. В доступной литературе имеются данные о способности циклофосфана подавлять рост, а также задерживать процесс метастазирования экспериментальных перевивных опухолей [1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12 ,13, 14, 15]. Задачей исследования явилось изучение гистологических изменений в экспериментальной опухоли лимфосаркома Плисса после многократного введения терапевтических доз циклофосфана.
Материалы и методы. Материалом для исследования служили 3-месячные белые беспородные лабораторные крысы-самцы, которым подкожно перевивались клетки штамма экспериментальной опухоли лимфосаркома Плисса. После перевивки опухолевого штамма животные распределялись по трём группам (по 5 штук в каждой). Hачиная с третьего дня от начала эксперимента, крысам группы №3 производилось внутрибрюшинное введение противоопухолевого препарата (циклофосфан), который задавался шестикратно один раз в сутки в дозе 15 мг/кг (терапевтическая доза). Крысы группы № 1 усыплялись передозировкой медицинского эфира на 15-й день от начала эксперимента, а крысы групп №2 и №3 усыплялись аналогичным способом на 20-й день. После убоя и вскрытия животных ткань опухоли извлекалась и фиксировалась в 10%-ном растворе нейтрального формалина. Парафиновые срезы, толщиной 5-7 мкм, окрашивались гематоксилин- эозином и изучались под светооптическим микроскопом.
Обсуждение. Ткань опухоли крыс группы №1 (пятнадцатый день опухолевого роста) образована плотно расположенными опухолевыми клетками, границы многих из которых довольно хорошо различимы. Цитоплазма клеток зернистая. Ядра округлые, овальные, бобовидные и неправильной формы с очерченной кариолеммой и отчётливо видимыми ядрышками. Диаметр клеток опухоли составляет 6,51±0,2 мкм, а диаметр их ядер - 3,86±0,14 мкм.
В опухолевой ткани располагаются отдельные полости, которые либо лишены содержимого, либо содержат бесструктурную эозинофильную массу с беспорядочно разбросанными в ней опухолевыми клетками. В одних случаях такие полости имеют округлую или овальную форму и ровные границы, диаметр их просвета не превышает 85 мкм. В других же случаях они имеют вид трещин с диаметром просвета, достигающим 140 мкм.
В некоторых участках опухолевые клетки расположены редко, а пространства между ними заполнены бесструктурной эозинофильной массой с разрушающимися ядрами опухолевых клеток. Встречаются также некротизирующиеся участки различных размеров, состоящие из бесструктурной эозинофильной массы с беспорядочно разбросанными в ней опухолевыми клетками, а также осколками их ядер.
В ткани опухоли обнаруживаются пучки поперечнополосатых мышечных волокон.
Опухоль крыс группы №2 (двадцатый день опухолевого роста) характеризуется наличием отдельных обширных некротизированных участков, представляющих из себя бледно окрашенную бесструктурную глыбчатую массу. Хотя значительный удельный вес приходится на сохранившуюся опухолевую ткань.
На границе между некрозами и сохранившейся опухолевой тканью располагаются участки, имеющие сетчатую структуру. В них беспорядочно разбросаны разрушающиеся гиперхромные ядра, а также осколки ядер опухолевых клеток. Иногда внутри таких участков имеют место обширные кровоизлияния.
Сохранившаяся ткань опухоли образована плотно расположенными клетками, среди которых очень редко обнаруживаются фигуры митоза. Границы клеток неразличимы. Их округлые, овальные и угловатые ядра (диаметром 6,59±0,24 мкм) характеризуются хорошо очерченной кариолеммой и отчётливо видимыми (одним или несколькими) ядрышками и хроматиновым рисунком. В большинстве случаев размер ядрышек обратно пропорционален их количеству в каждом ядре, хотя имеются случаи, когда в одном ядре содержатся ядрышки значительно различающиеся по размеру.
Иногда внутри сохранившейся ткани опухоли просматриваются тонкие соединительнотканные прослойки. Изредка здесь обнаруживаются кровенаполненные кровеносные сосуды. Во многих участках новообразования между опухолевыми клетками располагается густая капиллярная сеть.
Здесь же имеются полости разных размеров, содержащие разрозненные опухолевые клетки. Также имеются мелкие полости, заполненные гомогенной коллоидоподобной массой с вакуолями.
У поверхности опухоли (за её пределами) можно встретить скопления разрозненно лежащих опухолевых клеток с отчётливыми границами. Их гиперхромные ядра занимают большую часть объёма клетки, а цитоплазма имеет вид тонкого ободка. Диаметр таких клеток составляет 7,56±0,2 мкм, а диаметр их ядер – 4,95±0,17 мкм.
Опухоль крыс группы №3 содержит многочисленные обширные деструктивные участки, которые, в одних случаях, представляют из себя комковатую массу, усеянную пикнотичными ядрами опухолевых клеток, в других же случаях, они имеют сетчатую структуру с редкими осколками ядер. Обнаруживаются также небольшие полости, заполненные гомогенной колоидоподобной массой с вакуолями; данные полости содержат одиночные опухолевые клетки с отчётливыми границами. Некоторые деструктивные участки инфильтрированы форменными элементами крови.
Участки сохранившейся опухолевой ткани образованы плотно расположенными клетками с гиперхромными ядрами различной формы. В данных участках обнаруживаются кровеносные сосуды.
Выводы. Многократное внутрибрюшинное введение терапевтических доз циклофосфана обусловливает выраженные деструктивные изменения в экспериментальной перевивной опухоли крыс лимфосаркома Плисса.
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
- Берёзкин М.В. Влияние циклофосфана на суточный ритм митозов и темп роста перевиваемой опухоли преджелудка мышей при введении его в различные часы суток.// Бюллетень экспериментальной биологии и медицины.- 1971.- Т. 71.- №5.- С. 92-95.
- Берёзкин М.В., Арбузов С.П. Влияние циклофосфана на суточный ритм митозов в опухоли и в эпителии роговицы мышей.// Суточные ритмы физиологических процессов организма.- М.: 1972.- С. 29-33.
- Берёзкин М.В. Влияние циклофосфана на клеточное деление в опухоли и нормальной ткани мышей при введении его в различные часы суток.: Автореферат диссертации на соискание учёной степени кандидата медицинских наук. М.: 1973.- 26 с.
- Герке П.Я., Демидова В.К., Эренпрейс Я.Г., Буйкис И.М., Зирне Р.А., Хилкова И.Н. Исследование гистологических и гистохимических изменений экспериментальной опухоли и органов опухоленосителя под влиянием антибластических препаратов нифурона и циклофосфана.// Проблемы функциональной морфологии.- Рига: 1971.- Т. 5.- С. 129-162.
- Демидова В.К., Буйкис И.М., Эренпрейс Я.Г., Зирне Р.А., Черепович Г.Э. Влияние циклофосфана на гистологическую и цитохимическую структуру опухоли и органов опухоленосителя с чувствительным и нечувствительным к химиотерапии штаммом.// Проблемы функциональной морфологии – Рига: 1972.- В.6.- С. 93-106.
- Каплиева И.В. Некоторые амнергические механизмы реализации противоопухолевой активности циклофосфана при различных способах экспериментальной химиотерапии.: автореферат дисс. …. канд. мед. наук.- Ростов-на-Дону: 2008.- 27 с.
- Киселёва Е.Г., Солякова Т.И., Коновалова Н.П. Клеточный цикл в опухоли в период восстановления после химиотерапии циклофосфаном.// Актуальные проблемы экспериментальной химиотерапии опухолей.- Черноголовка: 1980.- С. 97-100.
- Киселёва Е.Г. Влияние циклофосфана на деление опухолевых клеток.// Вопросы онкологии.- 1971.- Т. 17.- №5.- С. 74-78.
- Рыков В.А., Арефева А.К. Патоморфоз саркомы 45 крыс при комбинированной терапии циклофосфаном и диакарбом.// Актуальные проблемы экспериментальной химиотерапии опухолей. - Черноголовка: 1980. - Ч.1.- С. 104-105.
- Сипров А.В., Кинзирская Ю.А. Применение эмоксипина для коррекции гематотоксичности циклофосфана в эксперименте.// Бюллетень экспериментальной биологии и медицины.- 2008.- В. 146.- №7.- С. 72-75.
- Чиссов В.И., Русаков И.Г., Щитков К.Г., Игитов В.И., Солодовник В.Д., Солодкая Т.И., Ильина А.И. Повышение противоопухолевого эффекта циклофосфана в эксперименте.// Вопросы онкологии.- 1985.- Т.31.- №12.- С. 80-86.
- Щербакова Э.Г., Бухман В.М., Исакова Е.Б., Липатов Н.Н. Стимуляция противоопухолевой резистентности организма сочетанием низкодозового циклофосфамида с пероральным введением лизоцима и нуклеината натрия в эксперименте.// Российский биотерапевтический журнал.- 2009.- В. 8, №4.- С. 49-52.
- Эмануэль Н.М., Богданов Г.Н., Коновалова Н.П., Киселёва Е.Г., Васильева Л.С., Дьячковская Р.Ф. Кинетика регрессии некоторых экспериментальных опухолей при воздействии имифоса и циклофосфана.// Экспериментальная и клиническая фармакотерапия.- Рига: 1970.- В.1.- С. 65-72.
- Todorova Valentina K., Kaufmann Yihong, Klimberg V. Susanne. Increased efficacy and reduced cardiotoxicity of metronomic treatment with cyclophosphamide in rat breast cancer.// Anticancer Res.- 2011.- V. 31.- №3.- Р. 215-220.