Определение органических кислот в траве verbascum thapsus и verbascum songaricum

В статье приведены данные о качественном составе и количественном содержании органических кислот в траве коровяка обыкновенного и коровяка джунгарского. В результате проведенного эксперимента было установлено наличие в траве данных видов коровяка 14 органических кислот. В исследуемых объектах наблюдалось высокое содержание лимонной, яблочной и феруловой кислот. Кроме того, в траве в большом количестве содержались малоновая, ванилиновая, янтарная и щавелевая кислоты.

Введение. Verbascum thapsus L. (коровяк обыкновенный) и Verbascum songaricum Schrenk (коровяк джунгарский) двулетние травянистые растения семейства норичниковые – Scrophulariaceae. Коровяк обыкновенный широко распространен на территории Европы, на Кавказе, Алтае, в Восточной Сибири, а также Средней Азии. Коровяк джунгарский растет в Средней Азии, Иране и на Кавказе [1, 3].

Химический состав коровяка обыкновенного и коровяка джунгарского представлен иридоидами, флавоноидами, сапонинами, эфирным маслом, углеводами, в частности слизью [6, 11].

В Британской травяной фармакопее присутствует статья на листья коровяка обыкновенного. В Украине и в Казахстане трава коровяка обыкновенного и коровяка джунгарского является неофицинальным сырьем. Поэтому актуальным является углубленное фитохимическое изучение данного сырья.

Органические кислоты имеют широкий спектр действия. Они проявляют антимикробную, иммуностимулирующую, антиоксидантную, противовоспалительную, гепатопротекторную, кардиопротекторную активность [4, 5, 7, 8, 9, 10].

Органические кислоты в траве коровяка обыкновенного и коровяка джунгарского изучены недостаточно. Поэтому целесообразным было провести изучение качественного состава и количественного содержания органических кислот методом газовой хроматографии в траве двух видов коровяка, заготовленных в Украине и Республике Казахстан в июле 2014 года.

Цель исследования. Целью работы было изучение качественного состава и количественного содержания органических кислот в траве коровяка обыкновенного и коровяка джунгарского методом газовой хроматографии.

Материалы и методы исследования. Определение качественного состава и количественного содержания органических кислот проводили методом газовой хроматографии.

Трава коровяка обыкновенного коровяка джунгарского была заготовлена в период цветения в 2014 г. в Украине и Казахстане.

50 мг сырья помещали в виалу на 2 мл, добавляли внутренний стандарт (50 мкг тридекана в гексане) и приливали 1 мл метилирующего агента (14% BCl3 в метаноле, Supelco 3-3033). Смесь выдерживали в герметично закрытой виале 8 часов при 65°С, затем фильтровали и добавляли 1 мл воды очищенной. Для извлечения метиловых эфиров жирных кислот прибавляли 0,2 мл хлористого метилена, встряхивали несколько раз в течение часа, а затем проводили хроматографирование.

Введение пробы (2 мкл) в хроматографическую колонку проводили в режиме splitless, то есть без деления потока, что позволяет ввести пробу без потери на деление и существенно (в 10-20 раз) увеличить чувствительность метода хроматографирования. Скорость введения пробы составляла 1,2 мл/мин в течение 0,2 мин.

При проведении анализа придерживались следующих условий хроматографирования: хроматограф Agilent Technologies 6890 с масс-спектрометрическим детектором 5973; хроматографическая колонка - капиллярная INNOWAX, внутренний диаметр 0,5 мм, длина 30 м; скорость газа-носителя (гелий) 1,2 мл/мин; температура нагревателя ввода пробы - 250ºС; программируемая температура термостата -от 50 до 250º С, со скоростью 4 град/мин.

Для идентификации компонентов использовалась библиотека масс-спектров NIST 05 и WILEY 2007 с общим количеством спектров более 470000 в сочетании с программами для идентификации AMDIS и NIST.

Для количественных расчетов использовался метод внутреннего стандарта [2].

Расчет содержания компонентов (С, мг/кг) проводили по формуле:

C = к ■ K -1000, где

К1=П1/П2 (П1 - площадь пика исследуемого вещества, П2 - площадь пика стандарта);

К2=50/М (50 - вес внутреннего стандарта (мкг), введенного в образец, М - навеска образца (мг)).

Результаты и обсуждение. В результате проведенных исследований установлено наличие в траве коровяка обыкновенного и траве коровяка джунгарского 14 органических кислот.

Результаты эксперимента приведены в таблице 1.

Таблица 1 Количественное содержание органических кислот в траве коровяка обыкновенного и коровяка джунгарского

№ п/п

Соединение

Содержание органических кислот мг/кг в траве

коровяка

обыкновенного

коровяка джунгарского

1.

Капроновая кислота

33,00

30,60

2.

Щавелевая кислота

326,30

305,20

3.

Нонановая кислота

25,30

24,50

4.

Малоновая кислота

455,90

518,00

5.

Фумаровая кислота

54,70

31,30

6.

Янтарная кислота

301,80

279,60

7.

Бензойная кислота

146,90

115,30

8.

Фенилуксусная кислота

17,00

25,00

9.

Салициловая кислота

45,60

43,70

10.

Яблочная кислота

1080,70

983,30

11.

Азелаиновая кислота

216,50

220,40

12.

Лимонная кислота

3391,90

3159,10

13.

Ванилиновая кислота

367,20

354,60

14.

Феруловая кислота

611,80

652,80

Как видно из таблицы 1, в исследуемых объектах наблюдалось достаточно высокое количество лимонной, яблочной и феруловой кислот.

Кроме того, в траве коровяка обыкновенного и коровяка джунгарского следует отметить высокое содержание малоновой (455,90 мг/кг и 518,00 мг/кг), ванилиновой (367,20 мг/кг и 354,60 мг/кг), щавелевой (326,30 мг/кг и 305,20 мг/кг) и янтарной (301,80 мг/кг и 279,60 мг/кг) кислот соответственно. Следует отметить также, что в качественный состав органических кислот травы коровяка обыкновенного и коровяка джунгарского, заготовленных в Украине и Республике Казахстан идентичен.

Выводы.

  1. Методом газовой хроматографии в траве коровяка обыкновенного и траве коровяка джунгарского были идентифицированы органические кислоты, а также установлено их количественное содержание.
  2. В результате исследований было установлено наличие в траве изучаемых видов коровяка 14 органических кислот.
  3. Установлено, что высокое содержание лимонной, яблочной и феруловой кислот наблюдалось во всех исследуемых объектах.
  4. Результаты проведенных исследований могут быть использованы при создании новых фитосредств и их стандартизация.

 

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ:

  1. Лекарственные растения: энцикл. / сост. И.Н. Путырский, В.Н. Прохоров. - 2-е изд. - М.: Книжный Дом, 2005.
  2. Определение органических кислот в сырье Tribulus terrestris L. / Б.М. Кливняк, Н.Е.Бурда, Я.В. Рожковский и др. // Фармация Казахстана. 2014. - № 6. - С. 31-34.
  3. Пастушенков, Л.В., Пастушенков, А.Л., Пастушенков, В.Л. Лекарственные растения: использование в народной медицине и быту. - Л. : Лениздат, 1990.
  4. Anti-inflammatory activities of new succinic and maleic derivatives from the fruiting body of Antrodia camphorata / S.-C. Chien, M.-L. Chen, H.-T. Kuo et al. // J. Agric. Food Chem. 2008. - Vol. 56, № 16. - Р. 7017-7022.
  5. Antioxidant properties of ferulic acid and its related compounds / H. Kikuzaki, M. Hisamoto, K. Hirose et al. // J Agric Food Chem. 2002. - Vol. 50(7). - P. 2161-2168.
  6. Fabad, J. Chemical Constituents of Verbascum L. Species / J. Fabad // Pharm. Sci. 2004. - Vol. 29. - P. 93-107.
  7. Hepatoprotective effect of syringic acid and vanillic acid on CCl4-induced liver injury / A. Itoh, K. Isoda, M. Kondoh et al. // Biol Pharm Bull. 2010. - Vol. 33(6). - P. 983-987.
  8. Inhibitory effect of oxalic acid on bacterial spoilage of raw chilled chicken / D.M. Anang, G. Rusul, S. Radu et al. // J. Food Prot. 2006. - Vol. 69, № 8. - Р. 1913-1919.
  9. Roman Merkl, Iveta Hrádková, Vladimir Filip and Jan Šтİđгкаİ. Antimicrobial and Antioxidant Properties of Phenolic Acids Alkyl Esters// Czech J. Food Sci. 2010. - Vol. 28, № 4. - P. 275-279.
  10. The Cardioprotective Effects of Citric Acid and L-Malic Acid on Myocardial Ischemia / Reperfusion Injury / Xilan Tang, Jianxun Liu, Wei Dong et al. // Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine. 2013. - Article ID 820695. - Р. 111.
  11. Triterpene saponins from Verbascum songaricum / K. Seifert, A. Preiss, S. Johne, J. Schmidt et al. // Phytochemistry. 1991. - Vol. 30 (10). - P. 3395-3400.
Год: 2014
Город: Алматы
Категория: Медицина