Образцы растительного сырья Родиолы четырехраздельной исследованы на наличие конкретных групп БАВ (флавоноиды, 4-оксикумарины и фенолокислоты, органические кислоты). Разработаны методики определения содержания в нём действующих веществ.
Актуальность проблемы. Лекарственные растения отличаются большим разнообразием химического состава и содержат многие десятки биологически (фармакологически) активных веществ, от которых зависит спектр их фармакологической активности. В большинстве лекарственных растений в том или ином количестве присутствуют эфирные масла, флавоноиды, полифенолы, полисахариды и пр. Структура таких веществ варьирует внутри группы достаточно сильно, вследствие чего при одном и том же или близком спектре биологического действия они заметно различаются по отдельным его видам. Количество веществ в лекарственных растениях может колебаться от десятков до сотен. Всем этим обусловлено доминирование того или иного фармакологического эффекта (эффектов) конкретного растения и его осмысленный выбор при назначении с лечебными или профилактическими целями.
Наряду с этим лечебные свойства лекарственных растений зависят от присутствия в них ряда веществ с уникальным фармакологическим действием (антрагликозиды, алкалоиды, стероидные соединения и пр.). Такие вещества содержатся лишь в лекарственных растениях определенных видов или в близких видах ботанического семейства и придают лекарственным растениям узкую, строго определенную иммунокорригирующую активность.
Введение. Предметом исследований на модуле «Фармацевт-аналитик» в настоящее время является растение Родиола четырехраздельная (Красная щетка). Она произрастает в Казахстане, Китае, Пакистане, Монголии и России, главным образом в альпийском поясе. Интерес к этому растению обусловлен разнообразным компонентным составом, определяющим его видовую принадлежность. Попытки изучения состава биологически активных веществ (БАВ), содержащихся в Родиоле четырехраздельной, предпринимались российскими учеными [1, 2]. К настоящему времени установлено, что в составе БАВ Родиолы четырехраздельной присутствуют дубильные вещества пирогалловой группы, антрагликозиды, эфирное масло, органические кислоты, сахара, белки, жиры, воски, стерины, третичные спирты, фенолы, дубильные веществ, гликозиды (тирозол, трицетин), флавоноиды, микроэлементы – марганец, цинк, хром, кобальт, медь, никель, серебро, молибден. Однако до настоящего времени конкретный состав веществ, входящих в вышеуказанные БАВ в этом растении, до конца не изучен.
Благодаря уникальному составу БАВ Родиоле четырехраздельной присущи многие фармакологические свойства. В частности, такие вещества, как фитогормоны, оказывают положительное воздействие на щитовидную железу, надпочечники и гормональные системы в целом. Одно из основных действующих веществ - гликозид салидрозид способствует проявлению онкопротекторных, противовоспалительных, противоинфекционных и адаптогенных свойств, устраняет эндокринные нарушения при гинекологических заболеваниях, патологии щитовидной железы, надпочечников. Антоцианы вызывают профилактический и лечебный эффект при заболеваниях бактериальной, вирусной, грибковой этиологии. Данное растение используют в народной медицине при лечении женских заболеваний. Растение способствует также устранению различных эндокринных нарушений и патологий надпочечников. В качестве дополнительной терапии красную щетку с успехом применяют при лечении тяжелых заболеваний вирусного, грибкового и бактериального происхождения. Кроме того, Красная щетка обладает способностью омолаживать организм, останавливать рост раковых клеток, запускать защитные силы организма. За счет действия экстракта красной щетки обеспечивается активация цепи внутриклеточных дыхательных ферментов, повышение скорости энергетических реакций, увеличение количества нарабатываемой в митохондриях энергии и оптимизация ее использования.
В последнее время более тщательными исследованиями фармакологической активности Родиолы четырехраздельной начали заниматься ученые России, Германии и Китая. К настоящему времени разработан ряд биологически активных добавок из Родиолы четырехраздельной (в основном Российского производства) - это фиточай из корней этого растения с противовоспалительным действием для лечения мастопатии, миомы матки, эрозий, кист и т.д.; драже производства компании ХОРСТ, ООО, применяемые при лечении гинекологических заболеваний, нарушениях гормонального баланса в организме; растительное масло с экстрактом Красной щетки производства «AltayMix»; растительный сбор совместно с Эхинацеей производства «Фармхим», г. Шымкент, Казахстан; фиточай на основе Родиолы розовой и Родиолы четырехраздельной, произведенный в Германии; комплекс для поддержки обменных процессов в организме «Энергиа» (ООО «Артлайф») [3-8]. В Польше была проведена серия опытов in vivo (с мышами и крысами) по определению эффективности спиртовой настойки Родиолы четырехраздельной в борьбе с онкологическими заболеваниями, в ходе которых получены достаточно обнадеживающие результаты.
Целью исследований, представленных в данной работе, является изучение состава биологически активных веществ в Родиоле четырехраздельной (Rhodiola quadrifida), на основе которых в дальнейшем будут разработаны новые высокоэффективные и малотоксичные лекарственные формы.
Материалы и методы ииследования. Растительное сырье Родиолы четырехраздельной, методы химического и физико-химического анализа.
Результаты и их обсуждение
Образцы растительного сырья Родиолы четырехраздельной Алтайского края (Восточный Казахстан) были исследованы по известным методикам [9] на наличие следующих групп БАВ:
- флавоноиды (качественные реакции; ТСХ в системах растворителей бутанол:уксусная кислота: вода (4:1:5), бензол:уксусная кислота (9:2), хлороформ: уксусная кислота (9:1), хроматограммы просматривали в УФ-свете, а также при обработке парами раствора аммиака);
- 4-оксикумарины и фенолокислоты (качественные реакции; ТСХ в системах растворителей бутанол:уксусная кислота: вода (4:1:5), н-гексан: бензол:спирт этиловый 96 % (5:4:1), хлороформ:этилацетат:муравьиная кислота (2:1:1), проявитель - 10 % спиртовый раствор гидроксида натрия и диазореактив сульфаниловой кислоты);
- органические кислоты (ТСХ в системе растворителей н-пропанол:2 М раствор аммиака (7:3), проявитель - 0,04 % раствор бромкрезолового зеленого).
Была проведена стандартизация сухих экстрактов, полученных из растительного сырья Родиолы четырехраздельной, по показателям качества, регламентируемым фармакопейными статьями Государственной фармакопеи [10-12]. Определена влага, сухой остаток и примеси тяжелых металлов. Установлено, что для сухого экстракта, полученного из корневищ Родиолы четырехраздельной, потеря в массе не превышает 1 %, содержание примесей тяжелых металлов составляет не более 0,01 %.
Для проведения первичной качественной оценки биологически активных веществ в сухих экстрактах Родиолы использовали специфичные реакции на содержание антоцианов, дубильных веществ, флавоноидов [13]. Определение антоцианов проводили по реакции с раствором ацетата свинца. Дубильные вещества пирокатехиновой пробы в экстракте определяли реакцией с раствором железа (III) аммония сульфата. Для определения флавоноидов проводили цианидиновую пробу и общегрупповую реакцию образования халкона. Определение флавоноидов проводилось спектрофотометрическим методом на приборе спектрофотометр ЮНИКО 1200/1201 с измерением оптической плотности растворов при длине волны 415 нм. В группе полифенольных соединений (флавоноидов) определены индивидуальные соединения: цинарозид, алигенин-7-глюкуронид, лютеолин, апигенин. В группе фенилкарбоновых кислот обнаружены индивидуальные соединения: кофейная, хлорогеновая, неохлорогеновая, феруловая, хинная, шикимовая кислоты. Количественное содержание дубильных веществ в изучаемых объектах определялось перманганатометрическим методом. Определение антоцианов осуществлялось спектрофотометрическим методом при длине волны 510 нм. Микроэлементный анализ растительного сырья проводился методом атомно-абсорбционной спектрометрии на приборе КВАНТ-АФА.
Выводы. Таким образом, был проведен более тщательный анализ БАВ, содержащихся в составе Красной щетки, позволивший установить конкретный компонентный состав флавоноидов, антоцианов, дубильных веществ и др., что позволит разработать в дальнейшем новые лекарственные формы на основе данного растительного сырья.
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ:
- Путырский И.Н., Прохоров В.Н. Универсальная энциклопедия лекарственных растений. – Минск: Книжный дом- М.: Махаон, 2000.
- Каухова И.Е. Теоретические и экспериментальные основы разработки эффективных ресурсосберегающих технологий лекарственных средств растительного происхождения: автореф. дисс. доктора фарм. наук / И.Е. Каухова. СПб, 2007. – 48 с.
- Widenfeld H., Dumaa M., Malinowski M., Narantuya S. Phytochemical and analytical studies of extracts from Rhodiola rosea and Rhodiola quadrifida // Pharmazie. – 2007. – № 62. – S. 308-311.
- Moon Y.J. Pharmacokinetics and bioavailability of the bioflavonoid biochanin A: effects of quercetin and EGCG on biochanin A disposition in rats / Y.J. Moon, M.E. Morris. Molecular pharmaceutics. - 2007. - Vol. 4. - P. 865-872.
- The phytoestrogens isoflavones from Trifoliumpratense L. (Red clover) protects human cortical neurons from glutamate toxicity / F. Occhiuto, G. Zangla, S. Samperi et. al. // Phytomedicine. - 2008. - Vol. 5. - P. 122-128.
- Effects of dietary red clover on blood factors and cardiovascular fatty streak formation in hypercholesterolemic rabbits / S. Asgaiy, J. Moshtaghian, G. Naderi et al. // Phytotherapy research. - 2007. - Vol. 21. - P. 768-770.
- Effects of phytoestrogens derived from red clover on atherogenic adhesion molecules in human endothelial cells / T. Simoncini, S. Garibaldi, X. D. Fu et al. // Menopause. - 2008. - Vol. 15. - P. 542-550.
- Гусев Н.Ф. Лекарственные растения Оренбуржья (ресурсы, выращивание и использование) / Н.Ф. Гусев, Г.В. Петрова, О.Н. Немерешина. - Оренбург: Издательский центр ОГАУ, 2007. - 332 с.
- Решетникова, М.Д. Химический анализ биологически активных веществ лекарственного растительного сырья и продуктов животного происхождения: Учебное пособие / М.Д. Решетникова, В.Ф. Левинова, А.В. Хлебников и др.; под ред. проф. Г.И. Олешко. - Пермь, 2004. - 335 с.
- Государственная фармакопея СССР: вып. 2. Общие методы анализа. 11-е изд. - М., 1990. - С. 323-325.
- Государственная фармакопея СССР: вып. 1. Общие методы анализа. 11-е изд. - М., 1987. - С. 286-287.
- Государственная фармакопея СССР: вып. 2. Общие методы анализа. 11-е изд. - М., 1990. - С. 238-239.
- Аблатаева З.Б., Мухамбиталиева М.Э., Садыкова А.А., Омарова Р.А., Бевз Н.Ю., Краснов Е.А. Получение экстрактов родиолы четырехраздельной и оценка биологически активных веществ в её составе // Матеріали XXX Всеукраïнськоï науково-практичноï конференцİï з міжнародною участю «ЛІКИ - ЛЮДИНІ. СУЧАСНІ ПРОБЛЕМИ ФАРМАКОТЕРАПɪÏ І ПРИЗНАЧЕННЯ ЛІКАРСЬКИХ ЗАСОБІВ». - Харків: 23 травня 2013. - С. 127-130.