В настоящее время имеется достаточно научных данных, раскрывающие механизмы самозащиты и регенерации слизистой оболочки желудка в физиологических условиях и при язвенном процессе. С учетом этого, применяемые в настоящее время этиопатогенетические методы лечения во многом решили проблему лечения язвенной болезни. Однако, все они направлены на эрадикацию инфекции H.pylori и, практически не разработаны препараты стимулирующие регенераторные процессы в поврежденной язвенным процессом слизистой оболочке.
Материал и методы. Экспериментальные исследования включали создание модели индометациновой язвы желудка у крыс (1-ая часть), изучение репаративных процессов СОЖ при введении инзимола интрагастрально (2-ая часть) и изучение противоульцерозных свойств препарата у крыс при применении препарата на фоне больших доз индометацина (3-яя часть). Репаративные процессы оценивались морфологически и морфометрически в гистологических препаратах.
Результаты исследований. В эксперименте, для изучения репаративных свойств инзимола, 10 крысам 1-ой группы с индометациновой язвой желудка, интрагастрально вводили 0,2 мл препарата (150 ПЕ/мл) 1 раз в сутки в течение 6 дней. 10 крыс с моделью индометациновой язвы желудка вошли во 2-ую группу (контрольную), которым вводили 0,1 мл изотонического раствора nacl интрагастрально из расчета 5 мг/кг веса в течение 6 дней подряд. Результаты исследований показали, что в 1-ой группе крыс язвенные дефекты СОЖ остались лишь у 2 (20,0%) особей (таблица 1).
Таблица 1 - Сравнительная характеристика изменений СОЖ у крыс с индометациновыми язвами при лечении инзимолом и в контрольной группе
|
Условия опыта |
Состояние СОЖ в конце эксперимента |
|||
|
животные с язвами |
площадь язв, мм2 |
язвенный индекс |
||
|
абс |
% |
|||
|
1 группа-опытная (n=10). интрагастральное введение 0,2 мл р-ра инзимола |
2 |
20,0 |
0,76±0,40* |
0,49* |
|
2 группа-контрольная (n=10). интрагастральное введение изотонического р-ра NaCl (5 мг/кг) |
10 |
100,0 |
30,5±0,23 |
8,43 |
Примечание - *различия достоверны по отношению к контрольной патологии (р<0,001).
Площадь язвенного дефекта у крыс основной группы была в 40 раз меньше и отмечалось существенное уменьшение язвенного индекса, чем в контрольной группе, у которых в конце лечения язвы оставались у всех особей (100,0%). Сравнительное изучение структурных изменений СОЖ до и после лечения инзимолом (таблица 2) показали, что до начала эксперимента у всех особей (100,0%) наблюдались различной степени выраженности активность воспалительного процесса, эрозивные и деструктивные изменения.
Таблица 2 - Сравнительная характеристика структурных изменений СОЖ у экспериментальных крыс с индометациновыми язвами
|
Характеристика структурных изменений СОЖ |
В начале эксперимента (n=20) |
В конце эксперимента |
||||
|
1 группа - опытная (n=10) |
2 группа- контрольная (n=10) |
|||||
|
абс |
% |
абс |
% |
абс |
% |
|
|
1. Лимфогистиоцитарная инфильтрация |
20 |
100,0 |
2 |
20,0 |
9 |
90,0 |
|
2.Фибриноидное набухание ткани подслизистого слоя |
15 |
75,0 |
1 |
10,0 |
8 |
80,0 |
|
3.Гемморрагическое пропитывание серозно-мышечного слоя и собственной пластинки |
19 |
95,0 |
1 |
10,0 |
8 |
80,0 |
|
4.Острый эрозивный процесс |
20 |
100,0 |
1 |
10,0 |
10 |
100 |
|
5.Язвенный деструктивный дефект |
20 |
100,0 |
2 |
20,0 |
9 |
90,0 |
|
б.Формирование новых сосудов |
0 |
0 |
8 |
80,0 |
1 |
10,0 |
|
7. Формирование грануляций |
0 |
0 |
10 |
100,0 |
1 |
10,0 |
У 100,0% особей отмечалась лимфогистиоцитарная нейтрофильная инфильтрация с выраженным отеком серозной и субсерозной зоны, у 75,0% - фибриноидное набухание подслизистого слоя с фибропластическими изменениями мышечного слоя, у 95,0% - гемморрагические пропитывания серозномышечного слоя и собственной пластинки, у 85,0% - глубокий эрозивный дефект с лимфоидной инфильтрацией подслизистого слоя с наличием фибринозно-некротических масс. В конце эксперимента в основной группе деструктивные изменения с лимфогистиоцитарной инфильтрацией периульцерозной зоны наблюдались лишь у 2 (20,0%) особей. Фиброзное набухание ткани подслизистого слоя и геморрагическое пропитывание серозномышечного слоя и собственной пластинки, острые эрозии и деструкция наблюдались только в 2-х гистологических препаратах. В целом, заживление язвенного дефекта СОЖ с формированием грануляционной ткани и новых сосудов у экспериментальных крыс с индометациновыми язвами отмечено в 80% случаев.
В контрольной (2-ой) группе крыс, заживление дефекта СОЖ происходило медленнее. У 100,0% особей сохранялись глубокий эрозивный дефект, гиперплазия фолликулов с реактивным центром, отек подслизистого слоя, диффузная лимфоидная инфильтрация собственной пластинки. Эпителизация язв происходила грубее, путем наползания на дефекты СО отдельных языков эпителиальных клеток. Клетки, покрывающие дефекты, образовывали поверхность по типу “булыжной мостовой”. Сравнительное изучение морфологических изменений в 2-х группах экспериментальных крыс с индометациновыми язвами желудка показало высокую фармакологическую активность ПФП инзимол, оказывающего противовоспалительный, противоотечный и регенераторный эффекты. Оказалось также, что инзимол усиливает образование новых микрососудов в толще СО экспериментальных животных. Эти результаты наглядно демонстрирует диаграмма, представленная на рисунке 1.
3 часть эксперимента заключалась в изучении противоульцерозных свойств инзимола. У 10 крыс (3-яя группа) в течение 10 дней, на фоне интрагастрального введения больших доз индометацина, проводили обработку СО 0,2 мл раствора инзимола (150 ПЕ). В изъятых желудках у крыс отмечались умеренно выраженная воспалительная инфильтрация и отсутствие язв. Морфологические исследования показали, что при предварительной обработке СОЖ крыс раствором инзимола, значительно уменьшалась частота деструктивных изменений и кровоизлияний (таблица 3), по сравнению с животными 2-ой (контрольной) группой (р<0,001).
У крыс 3-ей опытной группы частота деструкций почти в 8 раз меньше, а частота кровоизлияний в 4 раза меньше наблюдались, чем у животных контрольной группы. Результаты позволяют сделать заключение, что инзимол при профилактическом применении уменьшает ульцерогенное действие индометацина, т.е. препарат обладает противоульцерозным действием. Инзимол способствует снижению темпов пролиферации клеток, гиперплазии фундальных желез, обусловленным главным образом увеличением числа добавочных клеток. При этом темпы дифференцировки не снижаются. Увеличение темпа пролиферации клеток, возрастание числа слизеобразующих добавочных клеток, очевидно, способствует увеличению резистентности СОЖ к кислотно-пептическому фактору. Результатом этого является ускоренное заживление язв при интрагастральном введении крысам раствора инзимола. Выполненное нами в эксперименте на крысах с индометациновыми язвами желудка морфологическое исследование позволило установить, что в механизме фармакологического действия инзимола, наряду с противовоспалительным, противоотечным, репаративным и противоульцерозными свойствами, у препарата имеется антацидный эффект. Усиление слизеобразования, за счет увеличения добавочных клеток, способствует ослаблению влияния на СОЖ кислотно-пептического фактора. Полученные экспериментальные данные позволили обосновать применение ПФП инзимол при лечении больных ЯБДПК.
ЛИТЕРАТУРА
- Вельш А.А. Экспериментальное обоснование применения иммобилизованного фермента - иммозим в комплексном лечении гнойных процессов в мягких тканях. Активные вопросы гнойной ЧЛХ: Сб.науч.тр.-Красноярск, 1988.-С.18-20.
- Dundar Y., Hill R., Dicson R., Walley T. Comparative efficacy of thrombolytics in acute myocardial infarction: a systematic review.Q.J.Med. - 2003.- У.9б.- Р.103-113.
- Нурмаков А.Ж., Надыров М.Т., Калиев А.К. Применение системной энзимотерапии в комплексе профилактики послеоперационных осложнений // Вестн.хир.Казахстана. - 2009.- №1(17).- С.54-55.
- Фадеева Т.В. Микробиологические аспекты инфицирования, реинфицирования и суперинфицирования при висцеральных гнойных процессах в условиях многопрофильной клиники: автореф.дисс....док.биол. наук. Иркутск, 2007.- 4б с.
- Гостищев В.К., Толстых П.И., Васильева З.Ф. и др. Опыт экспериментальных и клинических испытаний в медицине различных форм иммобилизованных протеиназ // Вопр.Мед.Химии. - 1985.- №4.- С.212-214. 239
- Иммобилизованные клетки и ферменты. Методы. [Под ред. Дж. Вудборда. пер. с англ. Е.В. Дайниченко, Г.П. Самохина; Под ряд. И.В. Березина.-М.:Мир.,1988.-215с.